镧对UV-C胁迫下番茄幼苗抗氧化酶活性的影响
2011-04-30王文刚李灵芝李海平
王文刚,李灵芝,张 惠,李海平
(1.太谷县农业局,山西太谷030800;2.山西农业大学园艺学院,山西太谷030801)
紫外辐射可分为UV-A(320~400 nm),UVB(280~320 nm)和 UV-C(200~280 nm)3 种。由于工业的发展对大气平流层臭氧的破坏,地表的紫外辐射除UV-B外,UV-C的辐射量也在增加,且已成为当今全球性环境问题之一[1]。
紫外辐射会引起植物细胞膜脂过氧化,产生自由基,从而对植物造成一定伤害[2-3]。而植物体内抗氧化系统可在一定程度上清除活性氧,维持体内活性氧的动态平衡[4]。稀土元素在有机体内含量很少,但对生物生命活动具有重要的调节作用,能够增强作物对不良生长环境的适应能力、诱导植物的抗逆性,从而减轻伤害[5-7]。
本试验研究了稀土元素镧在UV-C照射胁迫下对番茄幼苗抗氧化酶活性的影响,旨在探讨镧减轻番茄幼苗UV-C紫外伤害的途径和机理。
1 材料和方法
1.1 材料
将饱满的番茄种子(品种为Counter)播在育苗盘中,种子发芽后用清水浇灌,待2叶1心时定植于直径为15 cm的育苗钵中,用1/2剂量营养液(华南农业大学番茄营养液配方)进行培养。待番茄幼苗长至8~9片真叶时,选取大小整齐、健壮的番茄幼苗进行处理。
1.2 处理方法
LaCl3的质量浓度设为:30mg/L(T1),60mg/L(T2)。试验设4个组,即UV-C照射;UV-C照射+T1;UV-C照射+T2;无UV-C照射且不喷施LaCl3(CK),各组均3次重复。对番茄幼苗隔天喷施1次LaCl3,以叶片不滴液体为准,共喷施2次,喷施LaCl3结束2 d后进行UV-C照射处理。UV-C 照射时间分别为 1,2,3,4,5 h,用紫外灯(主波长253.7 nm)悬于番茄植株上方1.5m处进行辐照模拟,随着番茄幼苗的长高,调节紫外灯的高度,使番茄幼苗在整个试验时期保持同等的UV-C辐射胁迫。每天10:00开始照射,连续照射5 d,照射完毕按照顺序分别取各处理组番茄叶片进行测定。
1.3 测定指标及方法
每次按顺序取样并做好标记,依次测定番茄幼苗叶片超氧化物歧化酶(SOD)[8]、过氧化物酶(POD)[9]、丙二醛(MDA)[10]含量。试验数据采用Excel作图,用SAS软件进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 LaCl3对UV-C胁迫下番茄幼苗SOD活性的影响
SOD是生物体内清除活性氧的关键酶之一,其活性大小在一定程度上代表了植物清除活性氧的能力。由图1可知,番茄幼苗SOD活性随UV-C胁迫时间的增加呈先升高后降低的趋势。在较短时间UV-C胁迫下,番茄幼苗SOD活性逐渐升高,表明番茄幼苗启动了自身的抗逆机制,通过诱导SOD酶活性的上升来抑制活性氧对细胞膜脂的过氧化伤害,但是随着UV-C照射时间延长,番茄幼苗的SOD酶活性下降,且与对照相比差异极显著(P<0.01),说明过度的UV-C胁迫会导致番茄自身抑制活性氧伤害的能力下降,造成番茄幼苗叶片细胞膜脂的过氧化。
La3+对番茄幼苗在UV-C胁迫下SOD活性有正调节效应,喷施30mg/L LaCl3的番茄幼苗SOD活性高于对照,且高于单一UV-C胁迫组,辐射 1,2,3,4,5 h,分别比单一 UV-C胁迫组高38.78%,28.97%,30.24%,39.58%,64.14%,达到极显著差异水平(P<0.01);辐射 1,2,3,4,5 h,喷施60mg/LLaCl3的番茄幼苗SOD活性分别比单一UV-C胁迫组高53.13%,43.51%,15.75%,24.25%,41.97%,也达到极显著差异水平(P<0.01)。La3+通过提高番茄幼苗在UV-C胁迫下的SOD活性,在一定程度上能延缓番茄幼苗叶片细胞膜脂过氧化,提高番茄幼苗忍耐UV-C胁迫的能力。2组La3+对番茄幼苗SOD活性的影响均呈现先升高后降低趋势,在较短UV-C胁迫时间内,60mg/LLaCl3提高SOD活性的效应好于30mg/L LaCl3,但是随着UV-C胁迫时间延长,30mg/L LaCl3提高SOD活性的效应好于60mg/L LaCl3。
2.2 LaCl3对UV-C胁迫下番茄幼苗POD活性的影响
一般情况下,POD与SOD协同作用来维持植物细胞活性氧代谢的平衡。由图2可知,番茄幼苗POD活性在UV-C胁迫下呈波动下降趋势,表明UV-C胁迫使番茄幼苗叶片细胞产生了过多的H2O2,对番茄幼苗产生了一定的伤害。
在整个UV-C胁迫时期内,喷施LaCl3对番茄幼苗POD活性也有正调节作用。在UV-C胁迫下,喷施30mg/LLaCl3的番茄幼苗POD活性虽然低于对照,但是比单一UV-C胁迫组番茄幼苗 POD 活性高,辐射 1,2,3,4,5 h 分别高出15.57%,12.39%,9.39%,30.61%,47.75%,与单一UV-C胁迫组相比差异显著(P<0.05)或差异极显著(P<0.01);喷施 60mg/L LaCl3的番茄幼苗POD 活性辐射 1,2,3,4,5 h 分别比单一 UV-C胁迫组高 17.76%,18.09%,11.79%,19.58%,21.41%,差异也达到显著水平(P<0.05)。试验表明,La3+能够提高番茄幼苗在UV-C胁迫下POD的活性,有利于维持番茄幼苗细胞活性氧代谢的平衡。在较短UV-C胁迫时间内,60mg/L LaCl3提高POD活性的效应好于30mg/L LaCl3,随着UV-C胁迫时间延长,30mg/L LaCl3提高POD活性的效应好于60mg/L LaCl3。
2.3 LaCl3对UV-C胁迫下番茄幼苗MDA含量的影响
植物细胞膜脂含有不饱和脂肪酸,成为活性氧攻击的靶位点,丙二醛是主要的过氧化产物。由图3可知,随着UV-C胁迫时间的延长,番茄叶片出现了膜脂过氧化现象,细胞膜透性增大,表现为番茄叶片MDA含量极显著上升。
La3+有助于降低番茄幼苗在UV-C胁迫下的MDA含量,喷施30mg/L LaCl3的番茄幼苗MDA含量虽然高于对照,但是比单一UV-C胁迫组 MDA含量低,辐射 1,2,3,4,5 h 分别低于单一 UV-C胁迫组 19.89%,16.78%,22.99%,25.18%,23.29%,差异达到显著水平(P<0.05);喷施60mg/L LaCl3的番茄幼苗MDA含量辐射1,2,3,4,5 h, 分 别 比 单 一 UV-C 胁 迫 组 低16.65%,11.59%,15.15%,19.75%,14.98%,差异显著(P<0.05),表明La3+在一定程度上缓解了UV-C胁迫对番茄幼苗的伤害,减轻了膜脂过氧化程度,且30mg/L LaCl3对番茄幼苗MDA含量的降低效应好于60mg/LLaCl3。
3 结论与讨论
紫外胁迫为害与活性氧自由基的生成有关,SOD活性大小在一定程度上代表了植物清除活性氧的能力。陈拓等[11]研究发现,蚕豆叶片中SOD活性随着UV-B增强出现先升后降现象。孙令强等[12]的试验表明,低剂量UV-B处理黄瓜幼苗的SOD和POD含量均显著高于对照。杜英君等[13]研究表明,随着UV-C辐射时间的延长,紫杉针叶超氧化物歧化酶(SOD)活性有不同程度的下降,膜脂过氧化程度增加。刘芸等[14]观察到增强UV-B辐射会引起葫芦科植物栝楼幼苗细胞膜相对透性显著增加,SOD,POD活性急剧下降。吴杏春等[15]研究了3个不同类型水稻品种抗氧化系统在UV-B辐射增强条件下的变化,结果表明,UV-B辐射胁迫使水稻叶片超氧化物歧化酶(SOD)的活性先升后降。
本试验表明,较短时间UV-C胁迫下,番茄幼苗SOD活性逐渐升高,但随着UV-C胁迫时间延长,番茄幼苗SOD酶活性下降,UV-C胁迫导致番茄幼苗POD活性显著降低,说明过度的UV-C胁迫使番茄自身抑制活性氧伤害的能力下降,导致了番茄幼苗叶片细胞膜脂的过氧化,这与前人研究的结论基本一致。
La3+对番茄幼苗SOD,POD活性有显著的正调节能力,在UV-C胁迫条件下,喷施30mg/L LaCl3组番茄幼苗的SOD,POD活性平均增加了40.34%,23.14%;喷施60mg/L LaCl3组番茄幼苗的SOD,POD活性平均增加了35.72%,17.73%。试验表明,在UV-C胁迫下,La3+能够防止番茄幼苗叶片细胞膜脂过氧化作用,在一定程度上缓解了番茄幼苗叶片膜系统的伤害,可能是通过调控细胞基因表达途径增加抗氧化酶的数量[16-17],其机理还需进一步研究。
MDA是细胞膜脂过氧化的产物,在一定紫外胁迫强度内,植物细胞内的保护机制可以使MDA维持一定水平,胁迫超过一定的限度后,会使细胞代谢失活,膜脂过氧化作用增强,MDA含量升高。试验结果表明,随UV-C胁迫时间延长,番茄幼苗MDA含量显著增加,说明UV-C胁迫使番茄幼苗细胞膜脂发生了一定的过氧化作用,细胞膜透性增加。喷施30mg/LLaCl3组番茄幼苗MDA含量比单一UV-C胁迫组平均下降21.63%,喷施60mg/L LaCl3组番茄幼苗MDA含量比单一UV-C胁迫组平均下降15.62%,说明La3+有效防止了番茄幼苗在UV-C胁迫下细胞膜脂的过氧化作用。
总之,在UV-C胁迫下稀土元素La3+对番茄幼苗有一定的防护作用,增强了番茄幼苗抗氧化酶活性,降低了细胞膜脂过氧化产物MDA,有效防止了番茄幼苗在UV-C胁迫下细胞膜脂过氧化作用。综合比较得出,喷施30mg/L LaCl3对番茄幼苗的防护作用好于60mg/LLaCl3。
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