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EBV感染与婴儿肝炎综合征相关分析

2011-04-12山东省淄博市周村区人民医院检验科255300况红星

辽宁医学杂志 2011年1期
关键词:分泌物肝炎阳性率

山东省淄博市周村区人民医院检验科(255300) 况红星

婴儿肝炎综合征简称婴肝(IHS)是指 1岁以内的婴儿(包括新生儿)因病毒、细菌、弓形体等感染和全身性感染引起的中毒性肝炎、先天性代谢异常以及肝内或肝外胆道阻塞或畸形等原因引起的肝脏炎症的临床症候群,常发生各种合并症或并发症,其预后各不相同,重者可致死亡或留有严重的神经系统后遗症[1-2]。研究资料显示,引起该综合征的感染因子很多,包括乙型肝炎病毒、巨细胞病毒、EB病毒、单纯疱疹病毒、风疹病毒等。近年来,人们对ISH的研究主要集中在 CMV感染上,而对由 EBV感染导致的 ISH报道较少。

本研究对 80例 ISH患儿和 40例正常对照婴儿进行了 EBV VCA-IgM的检测。对患儿外周血细胞EB基因进行定量检测,PCR-Southern检测患儿咽分泌物 EBV DNA。探讨 ISH与 EBV感染的关系,借以对该病进行早期预防、治疗干预,延缓各种急慢性并发症的发生发展,从而改善患儿的生活质量。

1 主要仪器和试剂

1.1 主要仪器 1)DNA扩增仪 480型(美国 PE公司)。2)PE Geneamp5700型实时荧光定量 PCR分析仪(美国 ABI公司)。

1.2 主要试剂 1)酶联 EBV VCA-Ig抗体测定试剂盒(德国 NOVATEC公司)。2)EBV PCR荧光检测试剂盒(中山大学达安基因股份有限公司)。

2 资料来源及方法

2.1 患儿组 选择 2006年 3月至 2009年 6月我院儿科病区收治的 80例 ISH患儿作为研究对象,其中男 41例,女 39例,年龄 1天至 11月,平均(3.2±2.6)个月。80例患儿均具有黄疸、肝脾肿大、肝功异常等症状及体征,符合 ISH的诊断标准[3]。

2.2 对照组 选择 2006年 3月至 2008年 6月在我院健康查体的儿童 40例,其中男 20例,女 20例,年龄 1个月至 1岁,平均(3.3±2.8)个月。研究组和对照组婴儿的性别、年龄间差异无显著性。

2.3 方法 1)PCR-Southern检测咽分泌物 EBVDNA。2)实时荧光定量 PCR技术检测外周血 EBVDNA。3)酶联 EBV VCA-IgM测定。

2.4 统计学分析 采用计数资料卡方检验中的四格表资料的 X2检验和四格表精确检验法,SPSS11.6统计软件对实验结果进行统计学分析。

3 结 果

3.1 EBV特异性 IgM抗体检测结果 ISH患儿组与正常对照组血清病毒特异性 IgM抗体阳性率比较,ISH组 80例,EB-VCA-IgM为 11.25(9/80),正常对照组 40例,EB-VCA-IgM为 2.5(1/40)。与对照组比较,P<0.01。

3.2 PCR检测 EBV DNA结果 PCR-Southern检测咽分泌物 EBV DNA的结果,及 EBV BamHⅠ-W片段扩增产物长度为 129bp,部分标本 Southern杂交结果 ,见图 1。

图1 PCR-Southern杂交检测部分患儿咽分泌物EBV DNA结果 Lane 1:阳性对照 B95-8细胞;Lane 2:阴性对照 Ramos细胞;Lane 3,5,6,7,9,10,15,16:EBV阳性标本;Lane 4,8,11,12,13,14:EBV阴性标本。

3.3 实时荧光定量 PCR检测血标本 EBV DNA结果见表 1。

表1 婴儿肝炎综合征患儿组与对照组PCR检测结果

4 讨 论

ISH是一组由多种病因引起的病理及临床表现基本相似的临床症候群,其临床主要表现为黄疸、肝脾肿大及肝功能异常,多发生在 1岁以内的婴儿,是主要由病毒感染引起的一组综合征[3]。EB病毒的原发感染在婴幼儿往往呈隐形感染,临床可表现出上呼吸道病毒感染症状,还因为 B细胞的大量激活而引起淋巴结以及肝脾肿大,并可引起肝损伤[4]。

EBV感染在小儿非常普遍,我国 3~5岁儿童VCA-IgG抗体阳性率达 90%以上[5]。幼儿期 EBV感染多呈隐性而无临床症状,少数儿童 EBV感染后临床上可以出现上呼吸道病毒感染症状以及心肌炎、婴儿肝炎、过敏性紫癜、嗜血细胞综合征等多种疾病[6]。婴儿 EBV感染后导致婴儿肝炎的主要临床表现同巨细胞病毒性肝炎相似,主要表现为肝功能损害和肝脾肿大。

本研究中,25例患儿咽分泌物 EBV DNA阳性,16例患儿外周血 EBV DNA阳性,两者检出率明显高于正常对照组,其中咽分泌物 EBVDNA的检出率更高,表明咽上皮细胞和唾液腺是 EBV增殖的重要场所。

VCA-IgM是 EBV原发感染的标志,有研究认为VCA-IgM仅见于 EBV的原发感染。本研究中 80例患儿中 9例 VCA-IgM阳性,提示部分婴儿肝炎是由EBV的原发感染所致。患儿组 VCA-IgM阳性率与正常对照组相比差异无显著性,可能与患儿免疫功能低下,产生 IgM能力弱以及 VCA-IgM检测的灵敏度有关。

血清 VCA-IgM阳性率低于外周血和咽分泌物EBV DNA阳性率,可能由于研究对象均为 1岁以内的患儿,其细胞和体液免疫系统发育不成熟,产生IgM能力相对成人来说较弱,部分患儿病毒感染后不能有效产生免疫应答。

EBV感染参与部分 ISH的发生发展,临床对年龄较小伴肝功能损害的患儿,在排除宫内感染,尤其巨细胞病毒、乙肝病毒等感染后,应考虑到 EBV感染的可能。

[1] 姚桢.婴幼儿肝炎综合征的研究进展[J].临床肝胆病杂志,1994,10(1):12

[2] 朱启镕,王晓红,王建设.婴儿肝病综合征诊治修订方案[J].中华传染病杂志,2004,22(5):357

[3] 魏克伦.儿科疾病诊治指南[M].沈阳:东北大学出版社,1996:215

[4] Shibyya A,TsuchihashiT,WatanabeM,etal.Severe chronic active epstein-barr infection associated with multiple necrotic Icsions in the liver[J].Hepatol Res,2003,25:447

[5] 吴葆菁,李文益,张玉兰,等.小儿 EB病毒感染相关疾病临床研究[J].临床儿科杂志,2003,21(8):455

[6] Okan M.Overview and problematic standpoints of severe chronic active Epstein-Barr virus infection syndrome[J].Oncol Hematol,2002,(44):273

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