一次微生物实验室室间比对的报告和体会

2011-03-28纪静

实验与检验医学 2011年3期

纪静

(厦门市翔安区疾病预防控制中心[厦门市翔安区公共卫生大楼]，福建厦门 361102)

实验室室间比对试验是判定实验室检验能力的一个重要的评价方法，是按照预先规定的条件，由两个或多个实验室对相同或类似的测试样品进行检测的组织、实施和评价，从而确定实验室能力、识别实验室存在的问题与实验室间的差异，是判断和监控实验室能力的有效手段之一。为确保微生物实验室检测质量，提高实验室人员的细菌鉴定水平，2010年7月26日我中心参加了厦门市疾病预防控制中心主办的厦门市区级疾控机构微生物实验室室间比对质控考核。现将我室参加此次室间比对质控考核的结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1 .1 半固体琼脂管1支，编号B.检验项目：常见食源性致病菌 (提示两种混合菌)方法按GB/T4789-2008及 GB/T4789-2010方法进行检测。

1.1 .2 检验培养基与试剂所用分离、增菌、选择、鉴定培养基系北京陆桥技术责任有限公司产品。ID32E、ID32STAPH鉴定系统系法国生物梅里埃公司产品。沙门菌O和H诊断血清由卫生部兰州生物制品研究所提供。所有培养基和试剂均在有效期内使用。

1.1 .3主要仪器电热恒温培养箱ATB Expression自动细菌鉴定仪由法国生物梅里埃公司生产。

1.2 检测方法 GB/T4789-2008及 GB/T4789-2010“食品卫生检验方法微生物部分”。

1.2 .1分离培养半固体琼脂考核样划线接种XLD平板、TCBS平板、MAC平板、SMAC平板、血平板、BP平板。37℃18h后。

1.2 .2 菌落特征 TCBS平板上无可疑菌落生长，XLD平板上有粉色、中等大小，中心带黑色菌落。MAC平板上有无色半透明菌落，SMAC平板无可疑菌落生长，血平板上有两种不同菌落，中等大小为无色半透明不溶血菌落，较小菌落为白色圆形，光滑凸起，周围有透明溶血圈。BP平板上的菌落呈黑色，周围为一混浊带，外层有一透明圈。

1.2 .3分别挑取血平板上无色不溶血菌落(样品B-1菌)及白色周围有透明溶血圈菌落(样品B-2菌)分别涂片做革兰染色镜检。样品B-1菌为革兰阴性无芽胞杆菌。样品B-2菌为革兰阳性葡萄状球菌。根据各培养基平板上菌落特征、革兰染色结果及作业指导书提示两种混合菌初步判定两菌可疑为沙门菌及葡萄球菌。

1.2 .4生化反应分别挑取可疑菌接种营养琼脂平板和三糖铁琼脂，B-1菌同时接种赖氨酸脱羧酶试验培养基，37℃培养18h。

1.2 .5血清学鉴定分别挑取XLD平板上有粉色、中心带黑色菌落、MAC平板上疑有无色半透明菌落、血平板上半透明不溶血菌落做沙门血清凝集试验。

样品B-1菌株：沙门菌诊断血清A-F群多价O凝集，O4凝集，第1相HI凝集，第2相不凝集，生理盐水对照不凝集。由于第2相不凝集，用简易平板法做位相变异实验。方法：将0.35%～0.4%半固体琼脂平板烘干表面水分，挑取HI因子血清1环，滴在半固体平板表面，放置片刻，待血清吸收到琼脂内，在血清部位的中央点种B-1菌株，培养24h后，在形成蔓延生长的菌苔边缘取菌检查。结果第2相H1，2凝集。查常见沙门菌抗原表，结果为鼠伤寒沙门菌。样品B-2菌株：血浆凝固酶阳性(玻片法试管法均阳性)。