乳腺癌超声表现与分子生物学指标的相关性研究

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，超声诊断是乳腺癌临床诊断的重要手段。本研究将乳腺癌的超声表现与病理组织学和分子生物学指标相结合，旨在探索乳腺癌的声像图形态学表现与分子生物学指标表达的关系，提升超声诊断乳腺癌的临床价值，为乳腺癌临床诊治方案的选择及预后判断提供更丰富的影像学信息。

1 资料与方法

1.1 病例资料 收集济宁医学院附属医院 2008-11～2010-05行外科手术且经病理证实的乳腺癌 137例，年龄26～81岁，平均49.60±9.90岁。术前均行超声检查，且术前均未行放、化疗。

1.2 超声仪器设备及检查内容 采用GE Vivid 7，Siemens Acuson Sequoia 512超声诊断仪，探头频率7～12MHz。主要观察指标：肿块大小（＜1cm/1～2cm/＞2cm）、形态（规则/不规则）、纵横比（＞1/＜1）、边缘毛刺征（有/无）、周边高回声晕征（有/无）、内部回声（出现无回声区/未见无回声区）、微小钙化（有/无）、血流（0级/1级/2级/3级）及淋巴结转移（有/无）征象。

1.3 病理学方法 肿瘤切片均经过常规取材、10%福尔马林溶液固定、石蜡包埋、HE染色。显微镜下观察肿瘤组织的内部及周边组织成分及形态学特点。免疫组化由本院病理科协助，采用ElivisionTMplus染色法，染色步骤根据试剂盒说明书进行。雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor, PR)的结果判断标准：细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性反应，阳性细胞1%～9%为低表达,≥10%为高表达；人表皮生长因子受体-2（human epidermal grow th factor receptor 2, CerbB-2）的结果判断标准：胞膜出现棕黄色颗粒为阳性反应，阳性细胞＜10%为阴性，10%～30%为弱阳性，＞30%为阳性。所有试剂均购自福州迈新公司。

图1 A.超声声像图示浸润性导管癌肿块边缘见毛刺征象，周边有明显高回声晕；B.病理切片示肿瘤ER表达阳性

1.4 统计学分析 用SPSS 13.0软件行数据处理，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病理结果 137例乳腺癌均经病理学证实。肿块直径0.5～6.0cm。ER阳性率为56.2%（77/137），PR阳性率为45.3%（62/137），CerbB-2阳性率为75.2%（103/137）。

2.2 二维超声图像结果 137例，肿块＞2cm 占46.7%（64/137）；形态不规则占 82.5%（113/137）；纵横比＞1占35.8%（49/137）；边缘毛刺征出现率为58.4%（80/137）（图 1）；周边高回声晕征出现率为29.2%（40/137）（图1）；内部无回声区出现率为17.5%（24/137）（图2）；微钙化出现率为59.9%（82/137）（图3）；后方回声衰减出现率为31.4%（43/137）；淋巴结转移出现率为44.5%（61/137）；内部呈3级血流出现率为20.4%（28/137）。

2.3 乳腺癌超声表现及与分子生物学指标的关系见表1。

图2 A.超声声像图示浸润性导管癌肿块内部见多个无回声区；B.病理切片示肿瘤PR表达阳性

图3 A.超声声像图示浸润性导管癌肿块内见密集成簇分布的微小钙化；B.病理切片示肿瘤CerbB-2表达阳性

纵横比＞1组ER、PR阳性率（75.5%和59.2%）高于纵横比＜1组（45.5%和37.5%）；有毛刺组ER、PR阳性率（66.3%和53.8%）高于无毛刺组（42.1%和33.3%）；周边高回声晕组ER、PR阳性率（75.0%和60.0%）高于无晕组（48.5%和39.2%）；内部无回声区组 PR阴性率（75.0%）高于未见无回声区组（50.4%）；微钙化组CerbB-2阳性率（81.7%）高于无微钙化组（65.5%），差异均有统计学意义（P＜0.05）。

乳腺癌肿块大小、后方回声类型、淋巴结转移及血流均与 ER、PR、CerbB-2表达无显著相关性（P＞0.05）。

表1 乳腺癌超声征象与分子生物学指标的关系

3 讨论

组织病理形态学变化是乳腺癌超声影像学表现的基础，肿瘤的生物学行为影响着乳腺癌的病理形态学改变，进而影响其超声表现。ER、PR和CerbB-2基因是目前表达乳腺癌生物学行为最具代表性的分子生物学指标。多数研究认为ER、PR阳性表达的肿瘤较阴性表达者分化好，对内分泌治疗敏感，患者的无病生存期及总存活时间长，预后较好；CerbB-2及其受体过度表达与肿瘤恶性程度高、发生远处转移及患者的预后差呈正相关[1～4]。目前的研究表明，针对CerbB-2阳性肿瘤，临床选用赫赛汀治疗可显著改善预后。本研究将乳腺癌超声图像与分子生物学指标相结合进行观察分析，探讨乳腺癌超声表现与肿瘤生物学特性之间的关系，更深入地研究乳腺癌超声图像的病理基础及超声检查在乳腺癌临床诊疗中的价值。

肿块形态：由于乳腺癌的恶性浸润行为，造成肿瘤形态不规则。Stavros等[5]报道肿瘤纵横比＞1的病理机制是恶性肿瘤的生长脱离了正常组织平面导致前后径增大，是鉴别肿块良、恶性的重要指标。本研究结果显示，肿块纵横比＞1组ER、PR阳性率大于纵横比＜1组，提示纵横比＞1的癌肿较纵横比＜1者恶性程度低，对内分泌治疗敏感，预后好。由于目前未见类似报道，结论还有待于进一步研究证实。本研究中纵横比＞1出现率并不高，为35.8%，大部分肿瘤表现为纵横比＜1，提示超声医师诊断乳腺癌，更应重视纵横比＜1的肿块，同时结合其他声像图表现，如边缘征象、内部回声、微小钙化等进行综合分析，以减少误诊、漏诊。

肿块边缘：边缘征象是超声诊断中鉴别乳腺肿瘤良、恶性的重要信息，边缘毛刺征及周边高回声晕征是超声诊断乳腺癌的经典指标[5]。本组资料显示，毛刺征及周边高回声晕征的出现率分别为 58.4%、29.2%，边缘有毛刺组ER、PR阳性率高于无毛刺组；周边有高回声晕组ER、PR阳性率高于无晕组。而ER、PR阴性肿瘤常提示肿瘤分化差、恶性程度高、抵抗内分泌治疗、预后不良[1,2]，结合本研究结果，提示超声图像边缘有毛刺征及高回声晕征典型征象的肿瘤较无此类征象者恶性程度低，适合内分泌治疗，总体预后较好。笔者进一步将肿块边缘进行影像学及病理学对比观察，发现毛刺征与高回声晕征的病理学基础相似，均为癌组织以条、带或灶状向周围组织浸润并伴有不同程度的间质反应，癌组织与间质组织交错。由此推测间质反应可能是形成乳腺癌超声显像毛刺征和晕征的病理形态学基础，而肿瘤边缘发生间质反应的机制与肿瘤生物学特性的关系还有待进一步探索。

内部回声：内部回声也是鉴别乳腺肿瘤良、恶性的重要指标，恶性肿瘤内部回声较低，有时出现极低或无回声区。本组资料137例癌肿内部无回声区出现率为17.5%，肿瘤内出现无回声区组PR阴性率高于无此征象组。目前，类似研究较少，国外研究曾提出肿瘤内部极低回声与ER、PR阴性表达相关[3]。观察此类肿瘤病理切片显示癌巢内部有不同程度的大片状坏死区，无此征象的肿瘤内部癌组织与间质分布不均，坏死少见，推测肿瘤内部出现无回声区可能与PR阴性肿瘤分化差、内部易发生坏死有关。超声显像乳腺癌肿瘤内部出现无回声区提示肿瘤的恶性程度高，预后较差。

微小钙化：病灶内微小钙化是乳腺癌的重要声像图特征。良性肿瘤多表现为粗大钙化，乳腺癌钙化常呈微小状、成簇分布。研究认为微小钙化由细胞溶解后碎屑及钙盐沉积形成[6]。本组137例肿瘤微钙化的出现率为59.9%，微钙化的出现与CerbB-2阳性表达相关，提示有微钙化征象的乳腺癌恶性程度较高，远处转移率高，预后较差，结论与国外研究[3,7,8]相一致。近年来，随着超声仪器及技术的改进更新，超声对微钙化的显示率明显提高，但限于机器调节或个人经验等因素，诊断中可能忽视病灶内微钙化的存在。本结果提示超声医师应重视观察微钙化征象，以减少漏诊的发生，提高乳腺癌的超声诊断准确性，并为乳腺癌的临床诊治及预后判断提供更丰富的影像学信息。

本组资料乳腺癌肿瘤大小、淋巴结转移、后方回声及血流与ER、PR、CerbB-2表达无显著相关性（P＞0.05）。目前，国内外多数学者认为淋巴结转移与CerbB-2过表达有关[3,4,6,8]。肿瘤大小与三种指标表达无显著相关性。关于超声肿瘤血流、后方回声与ER、PR、CerbB-2的关系目前国内外罕有报道，在上述领域还需要进一步进行探索研究。

本研究初步观察到乳腺癌超声表现与乳腺癌ER、PR、CerbB-2的表达状态存在相关性，肿瘤生物学特性决定的病理形态学改变是乳腺癌超声显像的基础。通过本项研究可进一步理解乳腺癌超声征象与肿瘤生物学行为之间的内在联系，并可根据乳腺癌超声声像图表现对其生物学特征及预后进行初步评估，为临床治疗方案的选择提供一定的帮助，从而进一步提升超声检查在乳腺癌临床诊疗中的价值。

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