人细小病毒B19感染与早期自然流产关系的探讨①

方建红 姜晶 王桂喜 李玲

(青岛市城阳人民医院妇产科 山东青岛 266109)

早期自然流产的原因较为复杂,有害因素干扰早期胚胎发育是导致流产的重要原因之一。近些年,随着HPVB19检测手段的提高,HPVB19与不良妊娠结局的关系日益受到重视。曾有报道HPVB19可能与早期自然流产有关[1]。为了探讨HPVB19感染与妊娠早期自然流产的关系,本文通过ELISA方法检测早期自然流产孕妇和正常人工流产孕妇血清中HPVB19-IgM及IgG的含量,比较两者之间的差异,报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

(1)对象:选取2009年8月至2009年12月于我院门诊检查确诊的早期自然流产患者52例作为研究组。研究组的52例均有1～3次不明原因流产史,平均年龄为(27.0±2.2)岁,流产时妊娠天数为(38～83)d,平均(62.13±21.20)d,同时以同期、同地随机选取人工流产的健康孕妇45例作为对照组,平均年龄为(24.9±1.6)岁,流产时妊娠天数为(45～81)d,平均为(63.25±20.07)d,2组年龄和妊娠天数具有可比性(P＞0.05),所有病例均行实验室诊断排除了染色体、免疫因素、弓形虫、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒感染等原因引起的流产。(2)标本:无菌留取上述研究对象静脉血2～3mL,凝固后分离血清,-20℃保存备用。

1.2 试剂及方法

HPVB19-IgM及IgG的检测:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测,试剂盒购自德国IBLHamburg公司。主要步骤:(1)待检血清1∶100稀释,取100μL加入重组HPV B19抗原包被的反应孔中,并加入类风湿因子吸附剂5μL用以降低假阳性率,37℃孵育1h;(2)洗涤后加过氧化物酶标记羊抗人IgM及IgG多克隆抗体100μL;(3)加TBM底物液100μL并终止;(4)结果判定以标准抗体液吸光度±20%标准差(s)为界限值,待检孔吸光度大于上限为阳性。

1.3 统计学处理

统计学软件采用SPSS 16.0,采用Fisher确切概率法检验、χ2检验,危险度表示为OR值、95%CI的形式,P＜0.05认为有统计学意义。

2 结果

2.1 2组HPVB19-IgM的检验结果

在研究组52例早期自然流产的孕妇中,HPVB19-IgM阳性者为12例,阳性率为23.08%,而对照组45例孕妇血清中HPVB19-IgM阳性者仅为3例,阳性率只有6.67%,2组间差异有统计学意义,P=0.046。研究组HPVB19-IgM阳性的概率是对照组的4.20倍(95%CI 1.10-15.99)。

2.2 2组HPV B19-IgG的检验结果

在研究组52例早期自然流产的孕妇中,HPVB19-IgG阳性者为17例,阳性率为32.69%,而对照组45例孕妇血清中HPVB19-IgG阳性者为13例,阳性率28.89%,2组间差异无统计学意义,χ2=0.16,P=0.69。

4 讨论

自然流产的发病率占全部妊娠的10%～15%,多数为早期流产[2]。导致流产的原因很多,遗传基因缺陷是最常见的原因,46%～54%的自然流产与胚胎染色体异常有关,此外免疫、内分泌、解剖、感染及理化环境等因素均与流产的发生有关。其中,感染因素特别是HPVB19感染越来越受到人们的关注。

HPVB19隶属于细小病毒科红细胞病毒属成员,为单股负链无包膜DNA病毒,DNA约长5600bp,是体积最小、结构最为简单的DNA病毒之一。Cossart于1975年首次偶然在编号为B19的献血员血液中发现的[3]。与其他病毒性感染相似,感染HPVB19后会出现特异性抗体B19V-IgM,此抗体是近期感染的重要证据,一般B19V-IgM在感染B19V后3～10d出现,30d达高峰,持续3～4个月;B19V-IgG于感染后2周出现,持续数年,而单独检测B19V-IgG对诊断近期感染无意义,仅可证明曾经感染过B19V,并对B19V感染有一定的免疫力[4]。故本研究通过监测B19V-IgM和B19V-IgG来了解孕妇近期及以往感染HPVB19的状况。

研究证明HPV B19的宿主细胞是红细胞的祖细胞,其通过与红系祖细胞上P抗原受体结合而进入细胞,使红系造血细胞受到破坏,可引起传染性红斑、急性再生障碍性贫血、血小板减少性紫癜等多种疾病。HPVB19感染呈世界性分布,人类感染后多数呈亚临床感染,这种感染具有自限性。感染的临床表现因宿主免疫学和血清学状态不同而不同。近来的研究证明P抗原不仅存在于红系祖细胞,还可以存在于巨噬细胞、内皮细胞、部分孕妇的胎盘细胞和胎儿肝脏及心肌细胞上。感染了HPVB19的孕妇可能会出现病毒血症、皮疹、淋巴节肿大、关节炎、皮肤红斑、丘疹、非特异性低热、白细胞降低等。1984年Brown首次报道HPVB19可通过胎盘屏障,进入羊膜腔感染胎儿[5],胎儿感染HPVB19后可能累及胎儿造血系统,使红系造血细胞受到破坏,胎儿发生造血危象、严重贫血、水肿及神经系统畸形等,尤其是在孕早期感染HPV B19可引起胎儿水肿和死胎[6]。关于早期自然流产与HPVB19感染的关系曾有一些报道,认为两者之间存在某些联系[1,7],瑞典的研究发现,感染HPVB19的孕妇患早期流产的风险性是未感染组的3.76倍[8]。我们尚没有本地区大规模的HPVB19感染率的相关数据,但是通过我们区域性52例妊娠早期自然流产的调查,发现患者血清中HPVB19VIgM阳性率为23.08%,明显高于对照组的6.67%(P＜0.05);研究组近期感染HPVB19V的概率是对照组的4.20倍(95%CI 1.10-15.99),表明妊娠早期自然流产与近期HPVB19存在密切联系。

综上所述,妊娠期前后 HPVB19感染与妊娠不良结局有密切关系。不仅与胎儿畸形、胎儿水肿、死胎等有关,也是妊娠早期自然流产的原因之一。因此,预防HPVB19感染以及孕前或孕早期HPVB19-IgM的筛查对预防不良妊娠结局的发生和优生优育有重要意义。参考文献

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[2]乐杰.妇产科学[M].第6版.北京:人民卫生出版社,2004:89～92.

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[5]Brown T,Anand A,Ritchie LD,et al.Intrauterine parvovirus infectionassociated with hydrops fetalis[J].Lancet,1984,2(8410):1033.

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