血脂康对高脂血症大鼠脂联素、瘦素及炎症因子的影响

吴冬梅 潘 涛 施广飞

1南京军区南京总医院汤山分院（江苏南京210000）

2南京中医药大学第一临床医学院（江苏南京210046）

3江苏省南京鼓楼医院（江苏南京210008）

脂联素、瘦素、白细胞介素6（IL-6）是脂肪组织分泌的细胞因子。脂联素不仅与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病有关，还具有抗炎、抗动脉粥样硬化（AS）作用；而瘦素可能通过影响血脂代谢、诱导氧化应激及炎症反应参与AS的形成。本文通过观察血脂康对脂联素、瘦素及C反应蛋白（CRP）、IL-6的影响发现其抗动脉粥样硬化的另一机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 清洁级SD大鼠36只，雄性，体质量（200±10）g，南京军区南京总医院比较医学科提供。

1.2 试剂及仪器 血脂康胶囊由北大维信生物科技有限公司生产，批号 20070611；CRP、IL-6试剂盒（美国 ADL公司生产，南京夏斯生物科技公司提供）；脂联素、瘦素试剂盒（上海西唐生物科技有限公司）。Olympus 2700型生化自动分析仪；DENLEY DRAGONWellscan MK3 酶标仪（Thermo，芬兰）；Wellwash 4 MK2洗板机（Thermo，芬兰）；PYX-DHS数字显示隔水式电热恒温培养箱；TGL-168离心机（上海安亭科学仪器厂）。

1.3 高脂饲料配方 造模用高脂饲料由81.3%基础饲料加10%猪油、5%白糖、3%胆固醇 （粉剂）、0.2%丙基硫氧嘧啶 （片剂）、0.5%胆酸钠（粉剂）混合，加工成外观与普通饲料相似的高脂饲料。

1.4 造模及分组 大鼠随机分为三组，每组12只，分笼饲养，饲养环境温度25℃恒温。大鼠适应环境1d后开始实验。各组大鼠实验开始时在无菌操作下，一次性腹腔内注射维生素D360万U/kg，随后正常组饲喂普通饲料，余各组饲喂高脂饲料。造模6周后，各组随机取眼眶血4mL，标本离心后取血清检测血脂指标，证实造模成功，进入治疗阶段。正常组灌胃纯净水2mL，1次/d；模型组灌胃纯净水 2mL，1次/d；血脂康组灌胃血脂康1000mg/（kg·d），2mL，1 次/d。 各组均于每日早 9 时定时灌药。1.5 血液标本采集 治疗6周后，禁食不禁水1d。应用氯胺酮100mg/kg腹腔内注射麻醉，待大鼠意识丧失、四肢肌肉松弛后（约5～10min），将大鼠四肢固定于动物手术台上。首先于剑突下剪开皮肤及皮下组织，剖开胸腔暴露心脏，于下腔静脉右心房处，以无菌注射器取血8～10mL，将血样暂时存放生化管中，4℃冰箱保存。血标本采集完毕，离心后取血清于-70℃恒温冰箱内保存待测。脂联素、瘦素、CRP、IL-6测定均采用双抗体夹心ELISA法。

2 结 果

2.1 各组治疗前后血脂水平比较 见表1。模型组、血脂康组治疗前总胆固醇明显高于正常组（P＜0.05），说明高脂血症大鼠模型造模成功。血脂康组治疗后与模型组相比总胆固醇明显降低（P＜0.05）。模型组、血脂康组治疗前低密度蛋白胆固醇水平均高于正常组（P＜0.05），模型组与血脂康组相比，差异有统计学意义（P＜0.05），提示血脂康能明显降低低密度脂蛋白水平。

表1 各组治疗前后血脂水平比较（mmol/L

表1 各组治疗前后血脂水平比较（mmol/L

与正常组比较，*P＜0.05；与模型组相比，△P＜0.05。下同。

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2.2 各组治疗前后CRP、IL-6比较 见表2。治疗前，血脂康组、模型组与正常组相比，CRP、IL-6 明显增高（P＜0.05）；治疗后，血脂康组CRP、IL-6较模型组明显降低（P＜0.05）。

表2 各组治疗前后CRP、IL-6比较

表2 各组治疗前后CRP、IL-6比较

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2.3 各组治疗前后脂联素、瘦素水平比较 见表3。治疗前，血脂康组、模型组与正常组相比，脂联素水平均明显降低 （P＜0.05），瘦素水平明显增高（P＜0.05），治疗后，血脂康组较模型组脂联素明显增高（P＜0.05），瘦素明显降低（P＜0.05）。

表3 各组治疗前后脂联素、瘦素水平比较

表3 各组治疗前后脂联素、瘦素水平比较

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3 讨 论

动脉粥样硬化是一个极慢而复杂的病理过程，血管内皮细胞功能与动脉粥样硬化的发生、发展密切相关，各种危险因素导致血管内皮细胞损伤后，大量炎症因子和细胞浸润，尤其是巨噬细胞在内皮下聚集，吞噬大量脂质形成泡沫细胞，从而形成粥样斑块。内皮的慢性炎症可能是由多种机制所触发，但主要是由于肿瘤坏死因子（TNF-α）、IL-6、单核细胞趋化蛋白 1（MCP1）和抵抗素等促炎性细胞因子与NO和脂联素等抗炎性因子的失衡所致。脂肪组织分泌的IL-6是血中IL-6的主要来源之一，IL-6参与了炎症反应、胰岛素抵抗和动脉粥样硬化的发生［1-2］。CRP被认为是急性心血管事件最强的炎性标记物，CRP具有直接促炎症的效应，在动脉粥样硬化斑块内可以刺激炎性介质的释放与表达，是冠心病的独立危险因素。瘦素是由白色脂肪组织合成和分泌的一种多肽激素，是由肥胖基因的编码产物。有研究发现瘦素浓度依赖性的促血小板聚集作用。在动脉粥样斑块中，瘦素可使血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶合成增加，从而导致血管重塑。研究显示瘦素是独立的冠心病危险因素，可通过独立影响脂代谢参与冠心病，其可直接抑制甘油三酯的形成和促进脂肪酸的氧化。

脂联素是近来发现的脂肪细胞因子，也称为GBP-28［3-4］，是由apM1基因编码的含244个氨基酸的蛋白，在人类脂肪细胞中特异性地高表达。多项研究表明脂联素具有抗炎、抗动脉粥样硬化作用。针对动脉粥样硬化形成的几种主要细胞成分其作用机制有以下方面：脂联素能减少TNF-α所刺激内皮细胞表达的细胞黏附分子VCAM-1、E-选择素、ICAM-1等，从而防止血液中单核细胞等黏附到内皮细胞上；并发现脂联素能抑制单核细胞来源的巨噬细胞脂质摄取及清道夫受体的表达，抑制巨噬细胞向泡沫细胞的分化［6］。 进一步研究［7］显示，脂联素通过 IL-10表达选择性增加人巨噬细胞中其织金属蛋白酶抑制剂1的表达而防止斑块破裂，减少血栓形成。表明不仅在炎症反应所导致的动脉粥样硬化的初始形成及进展，而且在其急性血栓并发症中，脂联素都起着极重要的作用。

血脂康是从中药红曲中提炼精制而成的天然他汀类药物，主要成分为洛伐他汀，还含有多种不饱和脂肪酸和必需氨基酸。研究［8］表明血脂康使ox-LDL巨噬细胞降解值下降，抑制巨噬细胞摄取ox-LDL；明显下降CRP［9］，并且与血脂变化无明显相关；抑制血管平滑肌细胞增殖迁移［10］；减轻动脉粥样硬化，维持血管壁弹性及减少粥样硬化的面积［11］。表明血脂康可抗炎、抗动脉粥样硬化，不但具有直接调脂作用，还可降低CRP、IL-6及瘦素等炎症因子，升高脂联素这一抗炎因子，通过维持炎症因子与抗炎因子之间的平衡而影响抗动脉粥样硬化作用。

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