黄芪药材加工工艺的改进Δ

孙静，王昌利，张佩烨

（1.陕西中医学院，咸阳市 712046；2.湖南中医药大学，长沙市 410208）

黄芪药材加工工艺的改进Δ

孙静1，2＊，王昌利1，张佩烨1

（1.陕西中医学院，咸阳市 712046；2.湖南中医药大学，长沙市 410208）

目的：研究不同加工饮片的方法对黄芪中黄芪甲苷含量的影响，改进药材加工工艺。方法：对黄芪采用改进工艺——鲜切法和传统干切法制备饮片，用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定2种饮片中黄芪甲苷含量并进行比较。结果：鲜切法所得饮片中黄芪甲苷含量为0.072%，高于传统干切法所得饮片中黄芪甲苷含量（0.046%）。结论：鲜切法优于传统干切法；该含量测定方法简便、准确，重复性好，适用于黄芪中黄芪甲苷含量的测定。

黄芪；黄芪甲苷；高效液相色谱-蒸发光散射检测法；加工工艺

黄芪为常用中药，其性温，味甘，归肺、脾经，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功效，常用于治疗气虚乏力、食少便溏等证。2005年版《中国药典》收载了黄芪生品和蜜炙品2个品种，并将黄芪甲苷作为检测黄芪质量的指标成分[1]。但饮片传统加工炮制方法周期长、资源浪费较大、有效成分损失较为严重，故笔者结合陕西省中药材种植情况，对黄芪药材进行饮片制备工艺的改进，具有较强的实践意义。

本文采用高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）法[2～12]测定鲜切法黄芪饮片、传统干切法黄芪饮片中黄芪甲苷的含量，比较了2种加工方法对饮片中有效成分含量的影响，以期为黄芪药材炮制工艺改进、黄芪饮片规范化生产、临床疗效增加提供理论依据。

1 仪器与试药

2996 型HPLC仪（美国Waters公司）；2420检测器、Accurasil ODS C18色谱柱（北京金欧亚科技发展有限公司）。

鲜品黄芪，购于陕西省宝鸡市，经陕西中医学院生药教研室王继涛高级实验师鉴定为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus（Fisch）Bge.var.mongholicus（Bge.）的根；黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0781-9706）；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 药材饮片制备

2.1.1 鲜切法黄芪饮片 将新鲜黄芪除去表面泥沙后，置于阳光充足且通风良好的空间内晾晒，测定含水量，控制含水量在70%左右，将药材置于切药机中切成厚为2～3mm的薄片，于60℃烘干，备用。

2.1.2 传统干切法黄芪饮片 将新鲜黄芪晒至七成干（含水量为20%），除去表面泥沙，洗净，润透，置于切药机中切成厚为2～3mm的薄片，于60℃烘干，备用。

2.2 含量测定

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品5.03mg，置于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，制成每1mL含0.503mg的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 分别取“2.1.1”和“2.1.2”项下饮片粉末约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40mL，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4h，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40mL，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，长12cm），以水50mL洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30mL洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.3 流动相的选择[2，8]试验过程中，比较了不同浓度的乙腈-水（90∶10、35∶65、36∶64）为流动相时的出峰情况。结果，当乙腈-水为90∶10时，在7min内出峰；当乙腈-水为35∶65时，出峰时间均在25min以上；当乙腈-水为36∶64时，在10～15min内出峰且峰形良好，故最终选取乙腈-水（36∶64）为流动相。

2.2.4 图谱分析时间的确定 取供试品溶液，注入HPLC仪，记录1h左右色谱图，根据图谱确定分析时间。结果，在30min后无明显峰出现，因此选取分析时间为30min。

2.2.5 色谱条件 色谱柱：Thermo ODS C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-水（36∶64）；流速1mL·min-1；柱温：40℃；分析时间：30min；进样量：5μL。

2.2.6 对照试验 分别吸取对照品溶液5、10μL，注入HPLC仪，记录色谱图。以进样量（X）为横坐标，吸收峰峰面积积分值（Y）为纵坐标，按外标两点法计算，得对数方程为lgY＝0.8394X+6.607[9]。

2.2.7 样品含量测定 分别吸取2种供试品溶液，每种3份，每份5μL，注入HPLC仪，记录色谱图。按“2.2.6”项下方法计算黄芪甲苷含量（以每1g药材中黄芪甲苷计）。不同黄芪炮制方法下黄芪甲苷含量见表1。

表1 不同黄芪炮制方法下黄芪甲苷含量Tab1 Content of astragalosideⅣin Astragli Radix by different processing methods

2.2.8 稳定性试验 取黄芪鲜切供试品溶液在室温下放置，分别于2、4、6、8h按上述色谱条件测定，共测定5次。结果，每1g药材中黄芪甲苷含量分别为0.0726%、0.0732%、0.0741%、0.0777%、0.0733%，RSD＝3.09%（n＝5），表明黄芪鲜切供试品溶液中黄芪甲苷至少在8h内稳定。

2.2.9 精密度试验 取干切法黄芪饮片的供试品溶液10μL，按上述色谱条件进样测定5次。结果，每1g药材中黄芪甲苷含量分别为0.0756%、0.0753%、0.0741%、0.0766%、0.0801%，RSD＝2.99%（n＝5），表明本方法精密度较高。

2.2.10 重复性试验 取同一批干切法黄芪饮片的供试品溶液适量，共6份，按上述色谱条件测定。结果，每1g药材中黄芪甲苷含量分别为0.0721%、0.0733%、0.0788%、0.0753%、0.0746%、0.0787%，RSD＝3.27%（n＝6），表明本方法重复性较好。

2.2.11 加样回收率试验 精密称取已测黄芪甲苷含量的黄芪样品约1.5g，共6份，分别准确加入黄芪甲苷对照品溶液0.5mL，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表2。

3 讨论

试验表明，鲜切法和传统干切法得到的饮片中黄芪甲苷含量均超过2005年版《中国药典》标准，黄芪鲜切品中的黄芪甲苷含量为0.072%，高于黄芪传统干切品的含量（0.046%）。本试验选择HPLC-ELSD法对不同加工炮制方法得到的黄芪饮片中有效成分黄芪甲苷含量进行测定，方法简便、精确、稳定、重复性好。

表2 加样回收率试验结果（n＝6）Tab2 Results of recovery test（n＝6）

结合陕西省黄芪药材种植情况，可考虑采收新鲜黄芪药材晾晒2d后趁药材未干透心，直接进行切片。这样既可减少传统加工炮制工艺中新鲜药材干燥后经水浸润再切片浸泡的环节，又可减少药材晾晒时间，降低从药材到饮片的加工成本及药材耗损，为保证药材临床疗效、实现产地加工一体化提供科学依据。

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Improvement of Processing Technology of Astragali Radix

SUN Jing，WANG Chang-li，ZHANG Pei-ye
（Shannxi University of Traditional Chinese Medicine，Xianyang 712046，China）
SUN Jing
（Hunan University of Traditional Chinese Medicine，Changsha 410208，China）

OBJECTIVE：To study the effects of different processing technologies on the content of astragalosideⅣ in Astragali Radix，and to improve processing technology.METHODS：Astragali Radix decoction pieces were prepared using improvement technology fresh-cutting method and traditional processing.The content of astragalosideⅣin 2kinds of decoction pieces was determined by HPLC-ELSD then compared RESULTS：The content of astragalosideⅣ in piece by fresh-cutting method was 0.072%，which was higher than the other of 0.046%.CONCLUSION：Fresh-cutting method is better than traditional processing.The method is simple,accurate，reproducible for the content determination of astragalosideⅣ in Astragali Radix.

Astragali Radix；AstragalosideⅣ；HPLC-ELSD；Processing technology

R282.710.2；R283.1

A

1001-0408（2011）19-1759-02

Δ国家科技支撑计划子课题（2006BAI06A07-01）；陕西省重大科技创新项目（2008ZKC05-19）

＊讲师，博士研究生。研究方向：中药制剂。电话：029-38185175。E-mail：ph.175@163.com

2010-09-06

2010-10-29）