胃癌组织中端粒酶和PCNA的表达及临床意义

何小兵 (长江大学医学院，湖北 荆州 434023)

王卫政 (长江大学附属第一医院 荆州市第一人民医院消化内科，湖北 荆州 434000)

胃癌组织中端粒酶和PCNA的表达及临床意义

何小兵
(长江大学医学院，湖北 荆州 434023)

王卫政
(长江大学附属第一医院 荆州市第一人民医院消化内科，湖北 荆州 434000)

目的：探讨端粒酶、增殖细胞核抗原(PCNA)在胃癌发生发展中的作用。方法：采用免疫组化SP法检测胃癌60例和胃炎24例(其中慢性萎缩性胃炎伴肠化生14例, 慢性浅表性非典型增生胃炎10例)组织中端粒酶及PCNA活性。结果：端粒酶在胃癌中的阳性表达率为76.67%,胃炎组织为20.83%,两者相比差异有统计学意义(P<0.05)；PCNA分别为73.30%、25.00%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论：端粒酶和PCNA参与了胃癌的发生发展过程，检测端粒酶、PCNA活性对胃癌的早期诊断有一定的参考价值。

胃肿瘤；胃炎；端粒酶；增殖细胞核抗原

胃癌是严重威胁人类健康的一种疾病，目前对胃癌尚缺乏令人满意的化学治疗药物。肿瘤化疗最理想的靶点是肿瘤细胞特有而正常细胞中不存在的物质。近年来发现，端粒酶在多种恶性肿瘤中都有较高的活性，是恶性肿瘤区别于正常细胞的重要物质基础。研究表明,端粒酶通过合成端粒DNA,阻止端粒消失,使细胞永生化而导致肿瘤的发生,是一种新的有望成为肿瘤早期诊断和治疗的标志物[1]。增殖细胞核抗原(PCNA)是一种仅在增殖细胞中合成与表达的多肽,表示细胞正处于增殖状态,近年来已广泛用于肿瘤细胞的动力学研究。笔者采用免疫组化法检测胃癌和胃炎组织中的端粒酶、PCNA活性,探讨两者在胃癌发生、发展过程中的作用及其临床意义。

1 对象与方法

1.1对象长江大学附属第一人民医院2008年3月至2010年2月收治的未经放疗、化疗的胃癌患者60例,其中男36例,女24例,年龄25～65岁,均留取手术切除的胃癌标本。对照组为胃炎病例24例，其中慢性萎缩性胃炎伴肠化生14例, 慢性浅表性非典型增生胃炎10例；男16例,女8例,年龄22～60岁,均为胃镜活检标本。

1.2端粒酶、PCNA检测方法采用免疫组化SP法。染色步骤按试剂盒说明书进行。PBS代替一抗作阴性对照。端粒酶以细胞质内出现棕黄色颗粒、PCNA以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。计数10个高倍视野(×400)下不少于1500个细胞中阳性细胞所占百分比: <6%为(-)、≥6%为()。

1.3统计学处理采用SPSS13.0统计软件。数据比较用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1胃癌组织中端粒酶、PCNA的表达胃癌组织中端粒酶阳性率为76.67% (46/60)，胃炎组织中为20.83% (5/24), 两者相比差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中PCNA阳性表达率为73.30% (44/60),胃炎组织中为25.00 % (6/24), 两者差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2端粒酶、PCNA表达与胃癌临床病理参数的关系见表1。由表1可知端粒酶、PCNA表达与胃癌的分化程度、病理分期、淋巴结转移无关(P>0.05)。

表1 端粒酶、PCNA表达与胃癌临床病理参数的关系

2.3胃癌组织中端粒酶、PCNA表达的关系在胃癌60例中，端粒酶、PCNA均呈阳性表达者18例，均阴性表达6例，两者的表达无明显相关性。

3 讨 论

端粒是真核细胞线形染色体末端的重复DNA序列，其功能是防止染色体DNA的降解及末端融合，具有防止染色体末端丢失和决定细胞寿命的作用[2]。正常细胞端粒序列会随着细胞有丝分裂而逐渐缩短，最终导致细胞失去复制能力而衰老死亡。端粒酶是一种核糖核蛋白复合体，其本质是RNA指导的DNA聚合酶，能以自身RNA成分为模板，以端粒3’端突出的单链为引物，由催化亚单位催化，逆转录合成端粒DNA重复序列并添加到染色体末端，从而维持端粒长度及染色体的稳定性，细胞因此可逃脱衰老和死亡过程，获得无限增殖的能力，成为永生化的细胞[3]，而“永生化”正是细胞恶变的特征。自20世纪80年代末Morin等在人宫颈癌细胞中发现端粒酶以来，针对端粒酶的研究成了肿瘤研究的热点。本研究显示,胃癌中端粒酶、PCNA阳性表达率分别为76.67%、73.30%,而胃炎组织中两者阳性率仅为20.83%、25.00%。在胃炎组织中端粒酶、PCNA表达的可能机制有以下几点：①研究表明化生是调控分化的基因重新编程,在转型分化的基础上细胞在形态和功能上即已发生改变,此时肠化生的上皮对致癌物的吸收增强,在某些致癌因素作用下,易发生染色体突变,出现端粒危机,端粒酶激活,若细胞得以生存,则增殖癌变。②胃黏膜的非典型增生表现为腺上皮细胞的异型、极向紊乱、层次增多。研究证实此阶段可有癌基因激活和抑癌基因的失活。可见端粒酶活化、PCNA表达发生在胃黏膜癌变之前,一旦癌变即表达升高。为此应对端粒酶、PCNA阳性的癌前病变患者进行监测,以便早期发现胃癌。同时研究显示胃癌伴淋巴结转移者PCNA表达虽高于无淋巴结转移者,进展期胃癌中PCNA表达较早期胃癌有增高趋势,但无统计学意义。不过也提示PCNA阳性的癌细胞增殖旺盛,侵袭能力强易发生转移,应加强对这部分患者的化疗及综合治疗,以提高手术治疗效果。

[1]邹雄.我们能在2020年前控制肿瘤吗[J]? 国外医学：临床生物化学与检验学分册，2003，24(4)：187-188.

[2]Shay JW, Wright WE.H allmarks of telomeres in ageing research[J].J Pathol,2007,211：114-123.

[3]朱芮,熊永炎,熊小红,等.胃癌端粒酶表达的预后研究[J].中国临床医学, 2001, 8(5): 86-88.

[编辑] 一 凡

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2010.03.010

R735.2；R573.3

A

1673-1409(2010)03-R023-02