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中药复明片治疗大鼠白内障的实验研究

2010-11-27宋念艺刘连生长江大学临床医学院湖北荆州434023

长江大学学报(自科版) 2010年9期
关键词:老年性晶状体酸钠

宋念艺,刘连生 (长江大学临床医学院, 湖北 荆州 434023)

中药复明片治疗大鼠白内障的实验研究

宋念艺,刘连生
(长江大学临床医学院, 湖北 荆州 434023)

目的:研究复明片对硒性白内障的治疗作用。方法:给Wistar大鼠幼鼠注射亚硒酸钠复制白内障模型。实验分为模型组、治疗组Ⅰ和治疗组Ⅱ,未注射亚硒酸钠的同龄幼鼠作为空白对照组。定期观察各组动物晶状体混浊情况,实验结束时检测各组大鼠晶状体超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:治疗组Ⅰ和治疗组Ⅱ大鼠晶状体混浊程度均低于模型组,且晶状体SOD活性均明显高于模型组(P<0.05),而MDA含量则明显低于模型组(P<0.05)。结论:复明片对硒性白内障有较好的治疗作用。

白内障;亚硒酸钠;大鼠;超氧化物歧化酶;丙二醛;复明片

白内障是我国首要的致盲原因,目前其唯一而有效的治疗方法是手术。但白内障手术可能会出现一些严重的并发症,这既会增加患者的痛苦,也会增加患者的经济负担。因此,早期用药物预防或治疗白内障就显得十分重要。由于多数白内障的发展缓慢,需长期用药,而中草药系纯天然药物,副作用小,适宜长期使用,因此对中草药有效方剂的开发已成为近年来抗白内障药物研究的热点之一。本课题试图以大鼠硒性白内障为动物模型,选用不同浓度的复明片灌胃,研究复明片对硒性白内障的治疗作用。现将我们所采用的方法和取得的结果报道如下。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1 实验动物 健康纯系Wistar大鼠乳鼠40只,雌雄兼用,鼠龄均为10d,体质量14~19g(长江大学医学院动物饲养室提供)。

1.1.2试剂与药品 亚硒酸钠结晶体(华中科技大学化学系提供);复明片(西安碑林药业生产,批号:Z61021134);超氧化物歧化酶试剂盒、丙二醛试剂盒及考马斯亮蓝试剂盒(南京建成生物工程研究所生产)。

1.1.3仪器 YZ-5CSI型裂隙灯显微镜(苏州医疗器械厂生产);756MC型紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司生产);DS-200型控温多用高速组织捣碎机(江苏江阴市科研器械厂生产)。

1.2方法

1.2.1 实验分组与模型制备 。对照组大鼠不做任何处理。末次给药后第3天用裂隙灯显微镜观察大鼠晶状体变化,晶状体混浊为造模成功。

1.2.2 混悬液的配制及给药 将复明片捻碎后用蒸馏水配成混悬液。配制不同质量浓度,分别装于玻璃瓶中,密封,置入4℃冰箱保存备用。给治疗组Ⅰ和治疗组Ⅱ大鼠分别灌胃30mg/ml和60mg/ml的复明片。灌胃量均为2ml/100g体质量,1次/d,持续30d。对照组与模型组大鼠不用任何药物。

1.2.3 晶状体检查与分级 的标准分级:“-”示无混浊,即晶状体透明;“+”示核混浊,即晶状体核发生混浊,但皮质部仍清亮;“*”示全混浊,即晶状体核及皮质均出现混浊。

1.2.4 晶状体SOD活性与MDA含量测定 实验结束时,用不锈钢眼科剪处死各组实验大鼠,立即取出双侧眼球。将眼球用0~4℃生理盐水冲洗3次后,剥离晶状体,用滤纸吸干,放在电子天平上称重,并记录。将双侧晶状体放入5ml匀浆杯内,按比例加入8.6g/l冰生理盐水,用控温多用高速组织捣碎机以10000r/min捣碎1.5min,制成3.5%晶状体匀浆。再将匀浆以2000r/min低速离心8min后,取出上清液。用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,用硫代巴比妥酸法测定MDA含量,用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。具体步骤按南京建成生物工程研究所生产的试剂盒说明书进行。

2 结 果

表1 各组实验大鼠晶状体混浊情况

注: “-”示晶状体透明;“+”示晶状体核混浊,但皮质仍清亮;“*”示晶状体核及皮质均出现混浊。

2.1实验大鼠的观察及晶状体混浊分级情况模型组、治疗组Ⅰ和治疗组Ⅱ大鼠在注射亚硒酸钠3次后的第3天,肉眼及裂隙灯显微镜观察发现这些大鼠双眼晶状体均出现了不同程度的灰白色混浊,表明注射亚硒酸钠后的大鼠100%形成了不同程度的白内障,而对照组大鼠则无1例出现晶状体混浊。于杀鼠的当天,用裂隙灯显微镜检查各组实验大鼠晶状体混浊情况,结果见表1。

2.2实验大鼠晶状体SOD活性和MDA含量的影响模型组大鼠晶状体SOD活性明显低于对照组,而MDA含量显著高于对照组,其差异均具有显著性意义。复明片2个剂量组的SOD活性均高于模型组,而MDA含量均低于模型组,其差异均有统计学意义,表明复明片能提高白内障大鼠的抗氧化能力。见表2。

表2 各组实验大鼠晶状体SOD活性和MDA含量的比较

注:﹡﹡与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);▲与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

白内障是一种常见眼病,是全球性的主要致盲原因。我国目前盲人中约有半数是白内障引起的,其中以老年性白内障为多见。手术是目前白内障最有效的治疗手段,估计我国积存的急需手术治疗的白内障盲人有300多万,我国每年新增白内障盲人约为40万。随着人口增加和老龄化,这一数字还会增加,因此白内障盲是我国防盲治盲最优先考虑的眼病[2]。

中医学认为老年性白内障乃肾阴亏损与肝脾两虚所致,董斌、阳湘文等[3]通过临床观察证实,复明片根据中医辨证施治原则,方中取熟地、山药、人参、枸杞、山茱萸、女贞子等滋补肝肾、益精明目;生地、羚羊角、泽泻、茯苓、槟榔等清热滋阴,健脾利水;谷精草、夏枯草、石决明等有清肝明目、祛风退翳的功效,对肝肾两亏、精血不足或脾虚失运及肝经郁热等引起的老年性白内障切中病机,复明片能加速眼前段血液循环和营养代谢,改善晶状体囊的通透性,恢复其生理屏障效应,促进晶状体蛋白质代谢,增强可溶性蛋白的功能,有效控制晶状体混浊,并能促进混浊吸收。故他们认为复明片是一种治疗早中期老年性白内障较好的药物,对治疗白内障,延缓白内障的发展及改善患者视力有明显作用。

复明片2个治疗组大鼠晶状体混浊程度降低,且晶状体SOD活性明显升高,而MDA含量明显降低,提示复明片治疗硒性白内障的作用可能是通过提高晶状体抗氧化能力,降低脂质过氧化来实现的,但由于中药复明片的成分复杂,且为复方制剂,其作用机理究竟是怎样的,尚有待进一步研究。

[1]宋念艺,高秋华.补锌对白内障大鼠血液及晶状体中LDH和CuZn-SOD的影响[J].眼科研究,2005,23(1):40-42.

[2]赵堪兴,杨培增.眼科学[M].北京:人民卫生出版社,2008:312-318.

[3]董斌,阳湘文.复明片治疗初中期老年性白内障的临床观察[J].国际医药卫生导报,2006,12(6):94-95.

[4]郝智慧,张炳仁,赵厚德.障复明治疗大鼠硒性白内障的实验研究[J].实验药物与临床,2007,10(1):1-3.

[编辑] 何 勇

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2010.03.005

R776.1

A

1673-1409(2010)03-R010-02

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