采收期和加工方法对杭白芍中芍药苷含量的影响

胡敏伶，任江剑，王志安*

质量标准

*王志安，Tel：(0571)85229946，E-mail：wangshou@mail.hz.zj.cn

采收期和加工方法对杭白芍中芍药苷含量的影响

胡敏伶1，2，任江剑2，王志安2*

(1.浙江中医药大学药学院，浙江 杭州 310053；2.浙江省中药研究所，浙江 杭州 310023)

目的通过比较不同采收期和不同加工方法对杭白芍中芍药苷含量的影响，确定合理的采收期和加工方法。方法以芍药苷含量为指标，采用HPLC法，测定不同采收期和不同加工方法杭白芍药材中芍药苷的含量。结果以8月10日采收的杭白芍中芍药苷含量为最高，达到3.43%；加工方法以先去皮后水煮(5min)含量为最高，达到3.43%。结论以芍药苷含量为主要评价指标，杭白芍在8月10日左右采收比较合理，加工方法采用去皮水煮(5min)后生晒比较合理。

杭白芍；芍药苷；采收期；加工方法

白芍是毛茛科植物芍药PaeonialactifloraPall.的干燥根，主产于浙江东阳、磐安(杭白芍)及安徽亳县(亳白芍)，具有平肝止痛，养血调经，敛阴止汗的功能，用于头痛眩晕，胁痛，腹痛，四肢挛痛，血虚萎黄，月经不调，自汗，盗汗[1]。芍药苷为白芍的主要有效成分之一，具吸湿性，有镇静、解痉、抗炎、抗应激性溃疡等多方面的作用[2]。杭白芍是著名的“浙八味”之一，杭白芍药材种植中，采收时间和加工方法对杭白芍药材中芍药苷含量的影响比较大。根据文献[3]报道，不同炮制方法对芍药苷含量有较大影响；不同采收期也会影响白芍中芍药苷含量[4]。本文主要研究了杭白芍处于采收期时不同采收时间和不同加工方法对芍药苷含量的影响，为杭白芍GAP生产过程中提高和控制药材质量提供依据。

1 仪器与试药

Agilent1100系列高效液相色谱仪及agilent化学工作站，DAD检测仪器。KQ-100DB型数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司，功率100W，频率40kHz)。

芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110736-200423)。杭白芍药材(浙江东阳三联杭白芍种植协会提供)，经浙江省中药研究所俞旭平高级工程师鉴定为芍药PaeonialactifloraPall.的根。甲醇、乙腈为色谱纯，乙醇、磷酸为分析纯，水为重蒸馏去离子水。

2 方法

2.1不同采收期及不同加工方法

2.1.1不同采收期试验 在同一种植地块分别于2008年7月10日、7月30日、8月10日和8月30日4个时期采收，每次采收5穴，采收后采用先去皮后沸水煮(5min)生晒的方法进行加工。

2.1.2不同加工方法试验 分为先沸水煮(5min)后去皮生晒、先去皮后沸水煮(5min)生晒、先去皮后蒸制(7min)生晒和生晒4种方法。采用同一品种、同一采收时间及直径在1.5cm左右的鲜采芍药进行加工炮制。

2.1.2.1先沸水煮后去皮 采收新鲜杭白芍后，洗净，置沸水中煮至透心(大约5min)，取出，放入装有沙子的蛇皮袋中蹭去表皮。

2.1.2.2先去皮后水煮 取新鲜杭白芍，按上述方法蹭去表皮后再置沸水中煮至透心(大约5min)。

2.1.2.3去皮后空蒸 取新鲜杭白芍，按上述方法去皮，然后蒸至透心(大约7min)。

2.1.2.4生晒 取新鲜杭白芍，洗净，晒干即可。

2.2色谱条件

色谱柱：钻石C18(250mm×4.6mm，5μm)，迪马公司生产；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(18∶82)；流速：1.0mL·min-1；检测波长：230nm，柱温：25℃；进样量：10μL，理论塔板数按芍药苷计算不低于2000。

2.3对照品溶液制备

精密称取干燥至恒重的芍药苷对照品16.40mg，置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。再于50mL容量瓶中精密吸取2mL芍药苷溶液，置10mL容量瓶中，加甲醇溶液稀释至刻度，摇匀。制成1mL含0.0656mg芍药苷的溶液，作为对照品溶液。

2.4供试品溶液的制备

取样品粉末约0.1g，精密称定，置50mL容量瓶中，加稀乙醇35mL，超声处理30min，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。

2.5线性关系考察

精密吸取上述对照品溶液4，8，12，16，20μL，分别注入液相色谱仪。以峰面积为纵坐标，以对照品进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=11672.16X+77.87，r=0.9961。结果表明芍药苷在0.0262～0.1312μg呈良好的线性关系。

2.6精密度试验

精密吸取上述对照品溶液10μL，重复进样6次，结果平均峰面积为871.4，RSD=0.47%(n=6)，表明仪器具有良好的精密度。

2.7稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液，依上述色谱条件，分别于0，2，4，6，8h各进样10μL注入液相色谱仪，结果平均峰面积为737.0，RSD=0.22%(n=6)，表明供试品溶液在8h内稳定。

2.8重复性试验

分别取同一批的杭白芍粉末样品6份，每份约0.1g，精密称定，按供试品溶液的制备方法制备，照上述色谱条件各进样10μL测定，结果杭白芍药材中芍药苷平均含量为2.54%，RSD=0.72%(n=6)。

2.9加样回收率试验

取6份已知含量的供试品约50mg，精密称定，分别添加芍药苷对照品(浓度为0.328mg·mL-1)4mL，按拟定的方法制成供试品溶液，依供试品测定方法进行测定，结果见表1。

表1 杭白芍药材中芍药苷回收率试验

3 结果和讨论

3.1不同采收期对芍药苷含量的影响

不同采收期芍药苷含量测定结果见表2。

表2 不同采收时间杭白芍药材中芍药苷含量比较

由表2可见，7月10日，杭白芍叶片开始发黄，芍药苷含量也逐步提高，到7月30日，部分杭白芍叶片由黄色变为黑色，少量叶片开始枯死，到8月10日，50%左右叶片变为黑色，并且20%左右叶片已经枯死，这时芍药苷含量达到最高，为3.43%，到8月30日左右，有50%左右叶片已经枯死，芍药苷含量开始下降。

而黄明远等[4]研究表明，5月10日夏季开花时采收芍药苷含量比较高，8月5日芍药苷含量降低，与本文研究结果有一定的差异，这可能与摘除花蕾有关。在浙江东阳，5月初摘除花蕾，减少了生殖生长养分的消耗，使更多的养分集中于地下部分的生长，所以8月10日左右芍药苷含量达到最高，具体原因还将继续研究。

3.2不同加工方法对芍药苷含量的影响

不同加工方法芍药苷含量测定结果见表3。

表3 不同加工方法杭白芍药材中芍药苷含量比较

由表3可见，先去皮后沸水煮(5min)加工的杭白芍中芍药苷含量为最高，达到3.43%，先水煮(5min)后去皮生晒杭白芍中芍药苷含量次之，先去皮后蒸制(7min)杭白芍中芍药苷含量为第三，直接生晒杭白芍中芍药苷含量为最低。先去皮后水煮为产区传统加工方法，试验结果表明传统加工方法有一定的合理性。直接生晒可能由于酶还具有活性，生晒过程中可能会导致芍药苷含量的下降。

[1] 国家药典委员会.中国药典(一部)[J].北京：化学工业出版社，2005：68.

[2] 吴菡子，熊南山.白芍的药理研究与临床应用[J].中国医院药学杂志，1998，18(4)：172-173.

[3] 薛建海．肖统海，王晓华，等.白芍不同炮制方法对芍药苷含量的影响(简报)[J].中国中药杂志，1990，15(8)：27.

[4] 黄明远，伍照万，张兴国.采收期与栽培年限对中江产白芍质量的影响[J].中药材，2000,23(8)：435-436.

InfluenceofCollectingPeriodandProcessingMethodsontheContentofPaeonifloriinRadixPaeoniaeAlb

Hu Minling1,2, Ren Jingjian2, Wang Zhian2

(1.ZhejiangChineseMedicalUniversity,HangzhouZhejiang310053,China; 2.ZhengjiangResearchInstituteofTraditionalChineseMedicine,HangzhouZhejiang310023,China)

Objective: By comparing the content of paeoniflori in Radix Paeoniae alb with different collecting periods and different processing methods, the optimum collecting period and processing method was obtained.MethodsFocused on the content of paeoniflori as key value, HPLC was employed to determine the target value, content of paeoniflori, in different Radix Paeoniae alb.ResultsThe highest level (3.43%) of paeoniflori was observed in the Radix Paeoniae alb collected on August 10th,with traditional processing method(first decorticating then boiling).ConclusionTake the content of paeoniflori as key value, the quality of Radix Paeoniae alb is better collected around August 10th, with traditional processing method (first decorticating then boiling).

Radix Paeoniae alb; Paeoniflori; Collecting period; Processing methods

2009-09-11)