深Ⅱ度兔子烫伤模型的建立

蔡 斌，范尚坦，张 勇，康设旺

(南京军区福州总医院药学科，福州 350025)

深Ⅱ度兔子烫伤模型的建立

蔡 斌，范尚坦，张 勇，康设旺

(南京军区福州总医院药学科，福州 350025)

目的 建立深Ⅱ度家兔烫伤模型。方法 采用自行设计的简易高温烫伤装置建立新西兰兔烫伤模型，通过温度和时间两个因素控制烫伤的深度，进行病理切片做组织学检查，判定烫伤的深度。结果 当烫伤温度为180℃，烫伤时间10 s，可以建立比较标准的深Ⅱ度家兔烫伤模型。结论 使用本方法建立模型方法简单，结果稳定，重现性好。

新西兰兔;烫伤;烧伤;组织学诊断;模型，动物

实验性烧烫伤动物模型的建立，是关系到烧伤药物研究成败与否的关键。建立烧伤面积恒定，烧伤程度深浅一致的符合烧伤药效学研究的烧烫伤动物模型比较困难，尽管文献中报道的造模方法很多，如燃 烧法［1］，直接热水烫伤法［2］，蒸汽烫伤法［3］，但这些方法都不同程度存在着难以控制致伤面积和致伤程度深浅不一的问题。通过不断摸索，我们自行设计了简易的高温烫伤装置，使用该装置能够建立烫伤面积恒定，烫伤程度一致的动物模型，而且结果稳定，重现性好。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验对象:新西兰兔48只［上海市松江区松联实验动物场，SCXK(泸)2007-0011］，雌雄不计，体重 2.0±0.2 kg。

1.1.2 烫伤装置:自制圆柱形铁筒，底部直径5cm，高16cm，重量1.2 kg，内部为空心，上方有一小孔，由此小孔倒入蓖麻油，放入温度计用于控制温度(图1)。

1.2 实验方法

1.2.1 烫伤模型的制备:在兔子背部涂上10%硫化钠脱毛剂，然后用生理盐水洗净脱毛区，使背部脱毛面积约10cm×10cm。脱毛后24 h，以25 g/100mL的乌拉坦按4mL/kg麻醉［4］。将装有蓖麻油简易高温烫伤装置放在电炉上加热后，利用装置自重将装置底部置于烫伤区域造成烫伤。致伤条件包括致伤温度及致伤时间，致伤温度分别为100℃，120℃ ，150℃，180℃四个点，每个点再按致伤时间划分5 s，8 s和10 s两个点。将48只兔子分为12组，每一致伤点烫伤4只兔子，于烫伤后24 h取材，组织块用病理固定液固定，做组织检查，按组织学诊断标准进行检查筛选出导致深Ⅱ度烫伤的时间点。

图1 简易高温烫伤装置Fig.1 Simple device for high-temperature scald

1.2.2 组织学诊断标准［5］:Ⅰ度烧伤伤及表皮浅层，基底细胞层健在。浅Ⅱ度烧伤伤及整个表皮和部分真皮乳头层，创面愈合靠残存的生发层和汗腺、毛囊等皮肤附件的上皮增殖，如无继发感染，可治愈，一般不留疤痕。深II度烧伤达真皮乳头层以下，但残留部份网状层及皮肤附件。如无继发感染，伤后3周创面依皮肤附件上皮增殖而治愈，常留疤痕。Ⅲ度烧伤系全层皮肤烧伤，可伤及皮下、肌肉、骨骼、和脏器。因丧失上皮再生来源，创面修复靠自体皮移植或周围健康上皮长入。

2 结果

烫伤后24 h病理切片观察，100℃和120℃(5 s，8 s，10 s)者均为浅Ⅱ度烫伤(图2，见彩插 2)，150℃(5 s，8 s)者烫伤程度浅Ⅱ度和深Ⅱ度之间。150℃(10s)，180℃(5 s，8 s，10 s)为深Ⅱ度。

3 讨论

在烧伤药物的研究中，为了能客观的评判和比较药物的疗效，动物模型烧烫伤程度的选择，也是至关重要的环节。我们的体会是:Ⅰ度和浅Ⅱ度烧伤或烫伤，药物组和阳性对照组甚至空白组的动物，只要治疗过程中无继发感染，创面的愈合时间最后的愈合过程都相差不显著，这是因为Ⅰ度和浅Ⅱ度烧伤或烫伤，其创伤程度较轻，仅伤及表皮和真皮层，如无继发感染，其愈合过程以自然愈合为主。因此，在烧烫伤药物的药效学研究中，以上两种深度的损伤难以比较出所研究药物与阳性对照药治疗烧伤疗效的差别。而Ⅲ度烧烫伤由于创伤严重，动物全身反应大，容易死亡，还存在治疗周期长，影响因素多等原因，也不适合做烧伤药物研究的动物模型。比较理想的是选用深Ⅱ度的烧烫伤动物模型，创伤程度适中，伤达真皮乳头层，损伤部分网状层及皮肤附件，愈合周期在20 d左右，能明显区分各组药物的疗效。

建立烧烫伤模型的成败主要取决于烧伤面积是否恒定，烧伤深度是否一致。燃烧法常因燃料涂布不均匀及未能达到一次同时灭火而致烧伤创面深浅不一致，从复制烧/烫伤模型的角度看，烫伤模型对致伤的时间和温度容易控制，所造模型创面深度均匀一致，一般比烧伤模型稳定准确。而建立烫伤模型的方法很多，但多数方法的热力作用依赖于水产生，温度只能在100℃以内调节，要造成深Ⅱ度烫伤所需的时间较长，另外某些烫伤方法如直接热水烫伤法和热蒸汽烫伤法需要在特制的防护装置的保护下保证烫伤面积的恒定，操作起来比较复杂且常出现防护不严的问题。所以虽然文献中报道的造模方法很多，但都不同层次反应出以下缺陷:(1)深度不易控制;(2)面积不易恒定;(3)方法复杂;(4)重现性不好。这些问题长期影响烧烫伤研究的结果。而本方法借助装置自重，压力恒定，且致伤的温度和时间均可控制，故所得模型创面深度一致，重现性好。本方法采用油产生热力，温度可远高于水，有效地缩短了造模的时间。烫伤的面积取决于装置底部面积的大小，接触烧伤区的面积是恒定的故烫伤面积恒定，无需使用防护装置，操作简单，为建立动物烫伤模型提供了一个较为满意的方法。

烧烫伤的程度还取决于烧烫伤组织的情况和动物的机体反应性［6］，动物烧烫伤模型的建立应在麻醉状态下进行，如在非麻醉状态下操作下，动物因疼痛挣扎导致烫伤部位受力不均造成创面深浅不一，疼痛挣扎导致的体位改变可能会造成创伤面积不能恒定等问题。为了保证烫伤深度的一致还应尽可能地减短被毛，脱毛剂10%硫化钠，使用时用棉花蘸取脱毛剂浸湿脱毛区，然后立即用温生理盐水清洗，用此种方法脱毛可以将毛脱净且对脱毛区皮肤损伤较轻。

烧伤和烫伤的标准要明确一致，一般以病理检验的组织学改变作为划分标准。烫伤后，由于热力对皮肤组织的损伤是一个动态变化的过程［7］，烧伤创面的组织可能会因为热力的进一步作用，从而表现出创面深度的加深，因此我们认为制作烫伤模型判定烫伤深度应以伤后24 h后的结果为准。

使用本方法复制烫伤模型具有方法简单，模型稳定，重现性好等优点。但本方法缺少对烧伤面积的调节和控制，烧伤后的严重程度取决于烧伤创面的深度和面积，烧伤面积是按体表面积确定的，而不是绝对面积，所以本方法只适用于烧伤创面的观察，不适合重度烧伤(大面积烧伤)严重程度判断，此为本方法的不足之处。

［1］王大鹏，孙笑非，徐华彪，等.烧伤合并人工海水浸泡后对实验兔肾脏病理形态学的影响［J］.中国比较医学杂志，2006，16(9):533－536.

［2］王友臣，宋淑君，刑利和，等.磷烧伤对大鼠肝脏及线粒体的损伤［J］.中国比较医学杂志，2005，15(5):295－297.

［3］叶建勋，叶伟宏，蔡立民，等.创面灵治疗烧烫伤的药效学研究［J］.中国实验方剂学杂志，2001，7(1):38－39.

［4］陈奇.中药药理研究方法学(第2版)［M］.北京:人民卫生出版社，2006:1180.

［5］中华人民共和国国家职业卫生标准［S］.GBZ103－2007，2007.

［6］刘毅，陈璧，贾赤宇.不同深度小鼠蒸汽烫伤模型的建立［J］.第四军医大学学报，1997，17:94－96.

［7］孙家玲，王晓红，葛绳德，等.烧伤创面早期深度变化病理学研究［J］.第二军医大学学报，1996，17(增刊):77.

Establishment of the Second-degree Scalded Model in Rabbit

CAI Bin，FAN Shang-tan，ZHANG Yong，KANG She-wang
(Department of Pharmacy，Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Region，Fuzhou 350025，China)

Objective To establish deep second-degree scalded model in rabbit.Methods The scalded model with NewZealand rabbit was replicated by simple high-temperature device which was self-designed.The degree of scald was controlled through temperature and time，and determined by the histological examination of the pathological section.Results A quite standard deep second-degree scalded model with rabbit was established when scalded with the temperature of 180℃continuing 10 seconds.Conclusion The established method is simple，stable and reproductive.

NewZealand rabbit;Scald;Burn;Histological diagnosis;Model，animal

R332

A

1671-7856(2010)07-0010-03

2010-03-29

图2 家兔背部皮肤深Ⅱ度烫伤 （HEx100）
Fig.2 Deep second-degree scald on the back of rabbit（HEx100）

蔡斌(1985－)，男，药师，研究方向:药物制剂学。E-mail:muncb6313@yahoo.com.cn