紫外分光光度法测定肿节风不同部位总黄酮的含量

2010-09-17杨荣平王宾豪张小梅

中国药业 2010年21期

励娜，杨荣平，王宾豪，张小梅

(重庆市中药研究院，重庆 400065)

肿节风 Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai又名九节茶、草珊瑚、接骨木等，是金粟兰科草珊瑚属植物，在民间广泛用于接骨祛风、消炎解毒，现代医学研究证明其具有抗菌消炎、抗癌和增强免疫功能等功效，已制成针剂、片剂、膜剂、含漱剂、口服液等多种剂型。主要用于各种常见炎症性疾病的治疗和癌症的辅助性治疗。肿节风中所含黄酮类化合物是其主要有效成分[1]。笔者根据黄酮类化合物特性，以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法对肿节风的叶、茎、根中总黄酮进行了含量测定，现报道如下。

1 仪器与试药

UV-1601型紫外可见分光光度计、AEG-45SM型电子天平(十万分之一，日本岛津);BP121-S型电子天平(万分之一，德国Sartorius公司);HH-2型恒温水浴箱、KQ-250型超声波清洗器(巩义市英峪予华仪器厂)。肿节风(重庆红池药业有限公司提供，本院生药鉴定室秦松云副研究员鉴定);芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，批号为100080-200306);所有试剂均为分析纯(重庆川东化工＜集团＞有限公司化学试剂厂)。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

精密称取芦丁对照品7.03 mg，置10 mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，置水浴上微热使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.703 g/L的对照品溶液。取肿节风药材各部位粉末(40目)约5 g，精密称定，置烧瓶中，加85%乙醇100 mL，冷浸30 min后，在水浴上加热回流提取3次，每次1 h，滤过，合并滤液，浓缩至50 mL，作为供试品溶液。

2.2 测定波长选择[2]

取对照品溶液和供试品溶液0.5 mL，分别置25 mL量瓶中，加5%NaNO21 mL，混匀，放置 6 min，加 10%Al(NO3)31 mL，摇匀，放置 6 min，加 NaOH试液 10 mL，加 85%乙醇至刻度，摇匀放置15 min后，在400～800 nm波长范围内扫描。结果二者在500 nm波长处有最大吸收，故选择500 nm为测定波长。

2.3 方法学考察

标准曲线绘制:精密量取对照品溶液 0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 mL，分别置25 mL量瓶中，加5%NaNO21 mL，混匀，放置6 min，加10%Al(NO3)31 mL，摇匀，放置 6 min，加 NaOH 试液 10 mL，加 85%乙醇至刻度，摇匀，放置15 min后，于500 nm波长处测定吸光度。以芦丁质量浓度为横坐标(X)、吸光度值为纵坐标(Y)进行线性回归，得回归方程 Y=0.496 2 X-0.026，r=0.999 9(n=5)。结果表明，芦丁质量浓度在0.351 5～3.163 5 g/L范围内与吸光度呈良好的线性关系。

精密度试验:精密吸取对照品溶液(0.703 g/L)1 mL，置25 mL量瓶中，依法操作，经放置显色后，于500 nm波长处测定吸光度。结果的 RSD为0.140%(n=6)，表明仪器精密度较好。

稳定性试验:取肿节风药材全草样品5 g，依法制备供试品溶液，经放置显色后，在不同时间测定其吸光度。结果样品总黄酮含量平均值为25.93 mg/g，RSD为1.55%(n=6)，表明供试品溶液在显色后60 min内基本稳定。

重现性试验:取肿节风药材全草样品，依法平行制备供试品溶液6份，经放置显色后，于500nm波长处测定吸光度。结果总黄酮的含量平均值为25.95mg/g，RSD为0.75%(n=6)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:精密称取已知含量的肿节风药材9份，精密称定。按样品中总黄酮含量的80%，100%，120%精密加入对照品，按供试品溶液制备方法制备溶液，依法测定吸光度。结果见表1。