重组人干扰素α－2b对复发性生殖器疱疹患者免疫功能的影响

杨卫琴，罗利飞

(1.浙江省台州市路桥区妇幼保健所，浙江 台州 318050; 2.浙江省台州医院路桥院区检验科，浙江 台州 318050)

生殖器疱疹是主要由单纯疱疹病毒Ⅱ(HSV－Ⅱ)引起的一种性传播疾病，极易复发。近年来，复发性生殖器疱疹(recurrent genital herpes)的发病率逐年上升，能明显增加艾滋病等其他性传播疾病的感染机会，越来越受到重视。它可反复发作，难以治愈，主要与患者细胞免疫功能低下有关[1－2]。干扰素α－2b是一种基因重组干扰素，具有广谱抗病毒作用及免疫调节功能，近年来研究发现其治疗复发性生殖器疱疹的效果确切[3]。笔者观察了重组人干扰素α－2b治疗复发性生殖器疱疹的效果，并探讨其对免疫功能的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2009年1月至10月我院妇科和泌尿科的门诊复发性生殖器疱疹患者60例作为治疗组，诊断均符合2000年我国卫生部疾病控制司和全国性病、麻风病控制中心联合颁布的《生殖器疱疹诊断标准》。其中男 21例，女 39例;年龄 19～46岁，平均(30.4±7.1)岁;病程 6 个月至 10 年，平均(2.8 ±0.7)年。所有患者均抽取疱液作PCR检测，单纯疱疹病毒均呈阳性，并排除自身免疫性疾病及其他系统性疾病，半年内未接受任何免疫调节剂治疗。另选择相同年龄段、性别相仿的门诊健康体检者30例作为对照组。

1.2 治疗与观察方法

治疗组患者予重组人干扰素α－2b 300万U肌肉注射，隔日1次，共用30 d。分别于治疗前和治疗后3个月检测患者外周血T淋巴细胞亚群、自然杀伤(NK)细胞、淋巴因子活化杀伤(LAK)细胞的变化，并进行临床疗效观察。对照组在行健康体检时检测上述指标。采用流式细胞法检测外周血T淋巴细胞(CD3+，CD4+，CD8+和CD4+/CD8+值)，具体步骤按说明书进行操作。取淋巴细胞分离液，常规分离淋巴细胞，用RPMI 1640培养液洗涤3次，调整细胞密度为5×108/L～5×109/L，加入白细胞介素 －2(IL－2，调终浓度为500 mL/L)培养72 h，即可诱生出LAK细胞。参照王甫厚等[4]采用的方法，以K562细胞作为靶细胞，采用乳酸脱氢酶释放法测定NK和LAK细胞的杀伤活性。观察治疗组治疗前后3个月平均复发频率和治疗前后皮损平均愈合时间。

1.3 统计学分析

数据以均值±标准差(X ±s)表示，使用 SPSS 11.5统计软件进行分析，计量资料采用 t检验，P＜0.05表示有统计学意义。

2 结果

结果见表1和表2。

表1 两组外周血T淋巴细胞亚群及NK和LAK细胞活性变化(±s，%)

表1 两组外周血T淋巴细胞亚群及NK和LAK细胞活性变化(±s，%)

注:与对照组比较，＊P ＜0.01;与治疗前比较，△P ＜0.05，▲P ＜0.01。

检测指标CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+NK LAK治疗组(n=60)治疗前45.54 ± 9.61＊38.59 ± 7.94＊37.62 ± 8.69＊1.03 ± 0.19＊1.74 ± 0.48＊1.02 ± 0.35＊治疗后62.74 ± 11.54△46.51 ± 6.52△28.46 ± 5.82△1.63 ± 0.32▲2.76 ± 0.74△2.36 ± 0.68△对照组(n=30)74.35 ± 14.69 48.26 ± 9.97 25.34 ± 7.56 1.89 ± 0.41 3.27 ± 0.91 2.81 ± 0.82

表2 治疗组治疗前后每3月复发频率和皮损愈合时间均值(±s)

表2 治疗组治疗前后每3月复发频率和皮损愈合时间均值(±s)

注:与治疗前比较，＊P ＜0.01。

治疗前后治疗前(n=60)治疗后3个月(n=60)皮损愈合时间(d)7.04 ± 1.82 4.94 ± 1.08＊每3月复发频率(次)3.84 ±1.37 1.76 ±0.64＊

3 讨论

初次感染HSV－Ⅱ后，只有少数患者出现典型症状，而大多数患者无明显症状，呈亚临床状态(潜伏感染状态)，HSV－Ⅱ可持续潜伏于骶神经节。当过度劳累、免疫系统疾病、全身应用免疫抑制剂等因素使机体免疫力降低时，潜伏病毒可被激活而发病。可见，机体免疫功能正常是维持潜伏感染的关键，免疫功能低下是引起潜伏病毒被激活的主要原因。免疫学研究证实，复发性生殖器疱疹患者存在明显的细胞免疫功能受抑制现象，复发性生殖器疱疹的感染和复发与细胞免疫功能有关[1]。本研究结果显示，复发性生殖器疱疹患者外周血CD3+细胞、CD4+细胞明显减少，CD8+细胞明显增加，CD4+/CD8+值明显下降，可见复发性生殖器疱疹患者确实存在细胞免疫功能紊乱，这与马黎民等[5]的报道相一致。笔者认为，CD4+细胞数明显下降，则明显减弱了其介导的对单纯疱疹病毒抗原的迟发型变态反应;另一方面，CD8+细胞数明显升高，表现出机体的免疫抑制功能增强，造成单纯疱疹病毒的繁殖和扩散。因此，CD4+细胞数下降、CD8+细胞数升高是本病反复发作的重要原因。NK细胞是机体中重要的免疫细胞，可直接杀伤被病毒感染的细胞;并可分泌IL－2和干扰素－γ等，发挥其免疫增强作用[6]。LAK细胞来源于NK细胞，其杀伤活性远高于NK细胞。马黎民等[5]研究发现，复发性生殖器疱疹患者细胞免疫功能缺陷以及NK细胞数目的下降可能是导致生殖器疱疹患者复发的原因。田中伟等[7]报道，生殖器疱疹患者的细胞免疫功能明显降低，外周血NK细胞和LAK细胞的活性降低。本研究结果发现，复发性生殖器疱疹患者外周血NK细胞和LAK细胞的活性降低，与上述报道相符[5，7]。

干扰素能增强免疫功能，作用机制在于调节机体的免疫监视、防御和稳定功能，使NK细胞、细胞毒性细胞的细胞毒杀伤作用增强，吞噬细胞的活动增强，能诱导外周血中单核细胞的2，5－寡核苷酸合成酶活性，从而增加或诱导细胞表面主要组织相容复合物抗原的表达。因此，理论上干扰素对防止潜伏病毒的再次复制和提高机体抵抗力有一定的作用。近年来研究证实，干扰素α在体外细胞培养中具有抑制HSV－Ⅰ型和HSV－Ⅱ型的作用[8]。肖光明等[9]发现，干扰素－α能使慢性乙型肝炎患者血浆CD4+细胞、CD4+/CD8+值显著提高，增加细胞免疫功能。杨根明等[3]发现，重组人干扰素α－2b治疗复发性生殖器疱疹的临床疗效确切，能明显降低复发率。本研究结果也证实了这一点，重组人干扰素α－2b治疗复发性生殖器疱疹的作用机制可能是通过提高外周血CD3+细胞、CD4+细胞、CD4+/CD8+值，提高血NK细胞和LAK细胞活性，从而增强机体的免疫功能。

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[3]杨根明.重组人干扰素α－2b治疗生殖器疱疹的疗效观察[J].山西医药杂志，2004，33(10):890 －891.

[4]王甫厚，陈绍先，郭彩云，等.LDH释放法测定NK细胞毒的方法研究[J].中国免疫学杂志，1996，6(2):115 －117.

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[6]Giron － Gonzalez JA，Moral FJ，Elvira J，et al.Consistent production of a higher Th1:Th2cytokine ratio by stimulate T cells in men compared with women[J].Eur J Endocrinol，2000，143:31.

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[9]肖光明，何凯茵，连粤湘，等.α干扰素治疗慢性乙型肝炎早期外周血T淋巴细胞亚群和血清肝纤维化指标的变化[J].实用肝脏病杂志，2005，8(2):80 － 82.