HPLC法测定复方雷尼替丁胶囊中盐酸雷尼替丁的含量

姜锋卫，陈玉璞

（河南省焦作市食品药品检验所，河南焦作 454000）

复方雷尼替丁胶囊为组胺H2受体阻滞药，主要用于胃溃疡及十二指肠溃疡、幽门螺杆菌感染的治疗。现行国家药品标准中，测定复方雷尼替丁胶囊中盐酸雷尼替丁含量的方法为紫外分光光度法。本实验欲用高效液相色谱法测定其中盐酸雷尼替丁的含量，作为复方雷尼替丁胶囊质量控制指标之一，为控制该药品质量，提供一种简单、灵敏、快速、准确的检测方法。

1 仪器与试药

UVIKONXL型紫外分光光度计；AE-240双量程电子天平 （梅特勒公司），岛津高效液相色谱仪 （LC-10ADVP泵、SPD-10AVP紫外检测器、CS-Light Potrun Analysis数据处理系统）；盐酸雷尼替丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100163-200405，供含量测定用）；复方雷尼替丁胶囊（天津药业焦作有限公司，批号：10041131、10041206、10041312）；水为纯净水，甲醇为色谱纯，醋酸铵为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Shim-Paok CLC ODS 柱（6.0 mm×200 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.77%醋酸铵溶液（80∶20）；流速：1.0 ml/min；检测波长：315 nm；柱温：30℃；进样量：20 μl。

2.2 检测波长的选择

对照品适量，加水制成含量约为30 μg/ml的溶液，在200～400nm的波长范围内进行扫描，结果对照品溶液在315nm波长处有最大吸收，故选用315 nm为本法的检测波长。

2.3 对照品溶液的制备

精取盐酸雷尼替丁对照品38.6 mg，置200 ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得盐酸雷尼替丁对照品贮备液（193 μg/ml）。

2.4 供试品溶液的制备

取供试品，按《中国药典》方法求出平均装量，将内容物混匀，研细，精密称取细粉适量（约相当于盐酸雷尼替丁150mg），置100 ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液2 ml，置100 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.5 阴性对照品溶液的制备

按复方雷尼替丁胶囊的处方工艺，不加盐酸雷尼替丁，制成阴性对照样品，照“2.4”项下方法制得阴性对照溶液。

2.6 干扰试验

分别取供试品溶液、阴性对照溶液和“2.2”项下的对照品溶液各20 μl进样，在保留时间4.1 min处，供试品和对照品溶液中均出现雷尼替丁色谱峰，而阴性对照溶液未见此色谱峰，表明在本实验条件下，盐酸雷尼替丁的测定不受其他杂质峰的干扰。见色谱图1。

2.7 线性关系考察

精密量取盐酸雷尼替丁对照品贮备液（193 μg/ml）适量，分别制成浓度为 3.86、7.72、19.3、38.6、77.2 μg/ml的对照品溶液。按“2.1”项下色谱条件进样，记录色谱图。以盐酸雷尼替丁浓度（μg/ml）为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，线性方程：Y=37 518X+181 0（r=0.999 9）。 结果表明，盐酸雷尼替丁的进样浓度在3.86～77.2 μg/ml范围内，与峰面积呈良好的线性关系。

2.8 精密度试验

取浓度为38.6 μg/ml的对照品溶液，重复进样6次，分别测定峰面积，结果RSD=0.43%（n=6），结果表明本法精密度良好。

2.9 稳定性试验

取“2.8”项下的对照品溶液分别于 0、2、6、8 和 12 h 测定峰面积，结果盐酸雷尼替丁的RSD＝0.53%。结果表明样品至少在12 h内稳定。

2.10 重复性试验

取样品（批号：10041131）适量，照“2.4”项下方法制备供试品溶液，平行测定6次，结果RSD=0.57%。结果表明本法重现性较好。

2.11 加样回收率试验

取样品（批号：10041131）适量，按《中国药典》方法求出平均装量，将内容物混匀，研细，分别精取0.26 g，共6份，分置50 ml量瓶中，另取盐酸雷尼替丁对照品适量，加流动相制成每毫升含盐酸雷尼替丁20.0 mg的溶液100 ml，分别精密量取该对照品溶液10 ml加入6份样品中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1 ml，置100 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。按“2.1”色谱条件测定，结果见表1。

表1 回收率试验（n=6）Tab.1 Results of recovery test(n=6)

2.11 样品含量测定

取3批样品，各20粒，求出平均装量，将内容物混匀，研细，精密称取细粉适量（约相当于盐酸雷尼替丁150 mg），置100 ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1 ml，置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；另取盐酸雷尼替丁对照品30.0 mg，置100 ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 ml，置100 ml量瓶中，加流动相至刻度，作为对照品溶液。按“2.1”项下色谱条件测定，结果见表2。

表2 样品含量测定结果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=3)

3 讨论

笔者查阅了许多文献，发现许多流动相中含有乙腈。笔者认为，乙腈价格较贵且有毒，故弃用。笔者通过多次试验，发现选用甲醇-0.77%醋酸铵溶液（80∶20）为流动相，在检测波长315 nm处，杂质和辅料对盐酸雷尼替丁的含量测定几乎无影响，且色谱峰形好，阴性对照无干扰；试验结果理想，方法简便，灵敏，准确，可用于复方雷尼替丁胶囊中盐酸雷尼替丁的含量测定。

[1]国家药典委员会.中国药典[S].二部.北京:化学工业出版社,2005:附录ⅤD,28-30584-585.

[2]美国药典委员会.美国药典[S].27版.NewYork:UnitedStatesPharmacopeial Convention,2004:918.

[3]美国药典委员会.国家药品标准:新药转正标准[S].36册.北京:化学工业出版社,2004:189-190,

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[5]王艳芝.HPLC法测定雷公藤片中雷公藤甲素的含量[J].中国医药导报,2010,7(30):44-45.

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