HPLC法测定小儿布洛芬口服溶液中布洛芬的含量

王友新，刘俊波，阎广华，常晓平

（河南省许昌市食品药品检验所，河南许昌 461000）

布洛芬（Ibuprofen，简称IB），是一种非甾体抗炎药。其作用机制主要通过对环氧酶的抑制而减少前列腺素的合成，从而降低神经痛觉的敏感性，同时通过下丘脑体温调节而起解热作用。小儿布洛芬口服溶液为长葛市人民医院制剂，由布洛芬、氢溴酸右美沙芬、扑尔敏、醋酸钠、蜂蜜、白糖、注射用水组成，具有镇痛、抗感染、解热等作用，用于小儿感冒引起的发热、头疼、咳嗽、鼻塞、流鼻涕、流眼泪、打喷嚏等症状。疗效确切，给药剂量容易控制，特别适合儿科使用，为了控制该制剂质量，保证临床用药安全有效，故选择该制剂中的主要成分布洛芬作为指标成分，进行含量分析研究。本文建立了小儿布洛芬口服溶液中布洛芬含量测定的方法。结果表明，该法专属性强，干扰小，并具有较好的重复性，可用于小儿布洛芬口服溶液的质量控制。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UVIKON-XL紫外-可见分光光度计；日本岛津LC-10A液相色谱仪（LC-10ATvp泵，SPD-10Avp紫外-可见检测器，CTO-10ASvp柱温箱，Chromato-Solution Light色谱工作站）；BP211D电子天平。

1.2 试药

布洛芬对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0179-9702）；小儿布洛芬口服溶液（长葛市人民医院制剂室）；缺布洛芬的阴性样品（长葛市人民医院制剂室）；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：CenturySIL ODS2（4.6 mm×200 mm，5 μm）；流动相：醋酸钠缓冲液（取醋酸钠6.13 g，加水750 ml，振摇使溶解，用冰醋酸调节 pH 值至 2.5）-乙腈（40∶60）；体积流量：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：265 nm；进样量：20 μl。 理论板数按布洛芬峰计算应不低于2 500。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取经五氧化二磷干燥器内减压干燥至恒重的布洛芬对照品25 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇适量，超声10 min，使布洛芬溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 供试品溶液的制备

精密量取本品3 ml，置100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为布洛芬测定的供试品溶液。

2.4 阴性样品溶液的制备

取缺少布洛芬的阴性样品，按“2.3”项下方法制备阴性样品溶液，即得。

2.5 干扰试验

精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液，各20 μl，进样分析，记录色谱图。在小儿布洛芬供试品溶液色谱图中，与对照品色谱图相应位置上，确认了布洛芬吸收峰（tR=8.18 min），而阴性样品色谱图无干扰，见图1。

2.6 线性关系考察

精密称取布洛芬对照品约100 mg，置50 ml量瓶中,加甲醇适量，超声10 min，使布洛芬溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀。 精密量取该溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 ml分别置于10 ml量瓶中，各加甲醇稀释至刻度，摇匀。进样20 μl，记录色谱图。以峰面积（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标绘制标准曲线，得回归方程：Y=3.586 5×104X+2.395 3×102（r=0.999 9）。结果表明，布洛芬浓度在0.2～1.4 mg/ml范围内线性关系良好。

2.7 稳定性试验

取样品溶液按“2.3”制成供试品溶液，室温放置，于0、2、4、6、8、10、12 h进样测定，计算供试品中布洛芬峰面积值的RSD为0.35%。结果表明，供试品溶液在12 h内稳定性良好。

2.8 精密度试验

精密吸取“2.2”对照品溶液 20 μl，重复进样 6 次，记录色谱图，计算布洛芬峰面积值的RSD为0.41%，结果表明该法精密度良好。

2.9 重复性试验

取样品溶液，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，进行测定，记录色谱峰，计算供试品中布洛芬含量的RSD为0.92%。结果表明该法重复性良好。

2.10 回收率试验

精密量取已知含量的样品（批号：20090615）溶液 5、3、2 ml，分别精密加入布洛芬对照品溶液（0.5 mg/ml）5 ml，按供试品溶液制备方法制备成高、中、低3种质量浓度溶液，各3份，进样测定，计算回收率，结果布洛芬平均回收率为98.1%，RSD 为 1.2%（n=9），见表1。

表1 回收率试验结果（n=9）Tab.1 Results of recovery test(n=9)

2.11 样品含量测定

精密量取样品溶液3 ml，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，进样分析，每个样品测定3次，另取“2.2”项下布洛芬对照溶液，进样分析，根据回归方程计算布洛芬的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=3)

3 讨论

本试验建立了HPLC法测定小儿布洛芬口服溶液中布洛芬含量的方法，将布洛芬对照溶液在220～320 nm的波长范围内扫描，在265 nm与273 nm波长处有最大吸收，在245 nm与271 nm波长处有最小吸收，在259 nm的波长处有肩峰，与《中国药典》2005年版二部描述一致，故选用265 nm为测定波长。按处方比例和工艺，制成不含布洛芬的阴性供试品进行测定，在与样品相同保留时间处未出现色谱峰，对测定无干扰；本法曾采用几种流动相试验，但以醋酸钠缓冲液（取醋酸钠6.13 g，加水750 ml，振摇使溶解，用冰醋酸调节pH值至2.5）-乙腈（40∶60）为流动相的分离效果和出峰时间最为理想，故选此为流动相。结果表明，本法具有回收率好，精密度高，重复性好，分析快速准确，无任何干扰的优点，可用于小儿布洛芬口服溶液制剂的质量控制。

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