HER-2表达在乳腺癌辅助化疗方案选择中的作用

戴 携，张言涛，秦 琴，张显岚

（桂林医学院附属医院普外二科，广西 桂林 541001）

HER-2表达在乳腺癌辅助化疗方案选择中的作用

戴 携，张言涛，秦 琴，张显岚⋆

（桂林医学院附属医院普外二科，广西 桂林 541001）

目的：探讨HER-2表达与乳腺癌不同方案辅助化疗疗效的关系,为患者筛选有效的化疗方案。方法：应用蒽环类和（或）紫杉类三种化疗方案对308例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者进行辅助化疗，免疫组织化学SP法检测标本中HER-2的表达，中位随访45.00（13.2～94.1）个月,分析化疗方案及病理学特征（HER-2状态，激素受体状态,病理分期）与生存率的关系。结果：总复发转移率22.07%（68/308）,平均疾病进展时间27.58个月。HER-2阳性患者中，蒽环类化疗组无病生存率（DFS）135/191,紫杉类化疗组DFS15/16（x2=3.938,P＜0.05）差异有显著性；蒽环紫杉类联合组DFS35/39与蒽环类组相比（x2=6.104,P＜0.05）差异有显著性。对激素受体阳性的患者,用蒽环类化疗组DFS（116/165）,与紫杉醇类化疗DFS（19/20）（x2=5.517,P＜0.05）差异有显著性。在腋窝淋巴结阳性的的患者中，蒽环类化疗组无病生存率（DFS）73/113,紫杉类化疗组DFS17/19（x2=4.638,P＜0.05）差异有显著性；蒽环紫杉类联合组DFS36/41与蒽环类组相比（x2=7.831,P＜0.01）差异有显著性。结论：HER-2阳性乳腺癌患者对紫杉类化疗药物更敏感；紫杉类比蒽环类药物对激素受体阳性的患者疗效更好而对激素受体阴性的患者无明显区别；蒽环紫杉联合类和紫杉类药物对淋巴结阳性者疗效比蒽环类好，蒽环类和紫杉类及联合类药物对淋巴结阴性者疗效相当。

乳腺肿瘤；辅助化疗；HER-2

1.3 免疫组化结果判定

HER-2蛋白定位于细胞膜或细胞质,可见胞膜胞浆同时染色,单独胞浆染色不计为阳性,根据染色强度按阳性细胞百分比,将阳性细胞数＜25%定为阴性（-）；阳性细胞数在25%～50%之间定为弱阳性（+）；50%～75%定为中度阳性（++）；＞75%定为强阳性（+++），见图1-4。

图1 乳腺癌组织中HER-2阴性表达

图2 乳腺癌组织中HER-2弱阳性表达

图3 乳腺癌组织中HER-2中度阳性表达

图4 乳腺癌组织中HER-2强阳性表达

1.4 统计学处理

应用SPSS 13.0软件进行统计处理,各指标相互关系用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

记录所有患者的临床病理特征和化疗方案,包括HER-2表达状态、激素受体状态、腋窝淋巴结状态。其中HER-2阳性246人、HER-2阴性62人，ER和（或）PR阳性221人、ER和PR均阴性87人。用紫杉类药物化疗者23人,用蒽环类药物化疗者237人，用紫杉联合蒽环类药物辅助化疗者48人。在接受了蒽环和（或）紫杉醇化疗的患者中,淋巴结阳性173人,淋巴结阴性135人，平均随访46.43个月,总复发转移率22.07%（68/308）,平均疾病进展时间27.58个月。HER-2阳性患者中，蒽环类化疗组无病生存率（DFS）135/191,紫杉类化疗组DFS15/16（χ2=3.938,P＜0.05）差异有显著性；蒽环紫杉类联合组DFS35/39与蒽环类组相比（χ2=6.104, P＜0.05）差异有显著性。对激素受体阳性的患者,用蒽环类化疗组DFS（116/165）,与紫杉醇类化疗组DFS（19/20）（χ2=5.517,P＜0.05）差异有显著性。在腋窝淋巴结阳性的的患者中，蒽环类化疗组无病生存率（DFS）73/113,紫杉类化疗组DFS17/19（χ2=4.638,P＜0.05）差异有显著性；蒽环紫杉类联合组DFS36/41与蒽环类组相比（χ2=7.831,P＜0.01）差异有显著性。在激素受体阴性组中，因紫杉组的样本太少（3例）视统计结果无意义。应用χ2检验分析患者在接受不同的辅助化疗方案辅助化疗后HER-2表达情况、激素受体状态、腋窝淋巴结状态与无病生存率的关系（见表1）。

表1 三组化疗方案无病生存率（DFS）与HER2表达、激素受体、淋巴结转移状况的关系

3 讨论

大量研究报道[4.5]HER-2的过表达可提高乳腺癌细胞的转移潜能,表现出较多的侵袭性临床病理特征，将HER-2基因转染到乳腺癌细胞系中，发现激活的HER-2基因通过促进分泌细胞基底膜降解酶、改变整合素和黏合素的功能、激活丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）等途径，逃避微环境的监控，增强转移潜力。在乳腺癌发生的早期阶段,腋淋巴结阴性的乳腺癌组织里HER-2扩增或过表达的比例不高,腋淋巴结阳性或Ⅳ期乳腺癌组织中HER-2的扩增或表达更明显[6]，HER-2已作为评价乳腺癌预后的重要指标。在化疗效果的影响方面,HER-2过表达患者对含蒽环类药物的化疗方案比较敏感。多中心研究表明接受含蒽环类药物化疗（FAC）的HER-2阳性患者,与HER-2阴性患者生存无显著差异。但仍有相当一部分HER-2阳性的患者在接受了含蒽环类药物化疗后出现复发转移。近年来,越来越多的研究提示含紫杉醇类的化疗方案能进一步改善预后。越来越多的研究发现HER-2过表达乳腺癌具有特征性的临床表现,预后较差,对一些传统化疗药物及激素致瘤的有效性改变[7]且NCCN指南中也对淋巴结阴性患者不建议使用紫杉类药物化疗，对腋窝淋巴结是否转移也已不作为建议使用紫杉类药物化疗的唯一指标。BCIRG 001试验[8]在对腋淋巴结阳性乳腺癌患者辅助治疗中将蒽环类化疗方案与紫杉类联合蒽环类化疗方案两者相比较。中位随访33个月应用TAC方案组比应用CAF方案组的无病生存率提高了8%（P＜0.01）尤其对HER-2过表达组疗效更为明显（P＜0.01），但应用紫杉类药物不良反应也明显增高如脱发、神经毒性等。但Van Poznak[9]对几组应用紫杉类化疗药物治疗转移性乳腺癌的回顾性研究显示HER-2过表达不能预测肿瘤细胞对紫杉类药物敏感性。这一相反的结论可能与HER-2受体存在的复杂信号网络和配体对紫杉类耐药性或敏感性出现的不同结果以及HER-2在不同细胞和组织表达不同的生物学作用有关。由于HER-2测定方法和分析标准不同以及评价者主观偏差导致HER-2检测结果的不一致,使得HER-2化疗敏感性的结果不同。同时在不同的病例分析研究中,不同的统计学方法及病例数目的不足也造成了结果的偏差。因此深入研究HER-2与乳腺癌临床病理因素及化疗药物之间的关系，在未来研究中建立标准化的测定和分析方法，有助于评估乳腺肿瘤的生物学行为及治疗效果，尤其对淋巴结阴性但易发生远处转移的这些高危患者合理的选择术后化疗方案。

本研究从HER-2、激素受体、淋巴结转移三方面对三种化疗方案的无病生存率进行了对比。我们在研究中通过统计分析观察到HER-2阳性的乳腺癌患者接受紫杉类比接受含蒽环类药物化疗获得的无病生存率更高。在进一步分层分析中,我们还发现紫杉类比蒽环类药物对激素受体阳性的患者疗效更好而对激素受体阴性的患者无明显区别，提示化疗与激素受体阳性状态密切相关。化疗方案对HER-2阳性患者的疗效,提示含紫杉醇类化疗能提高HER-2阳性肿瘤患者的无病生存期。在HER-2参与的乳腺癌信号传导通路中,HER-2能增加氨酸激酶活性,增强癌细胞恶性表型的表达,降低肿瘤细胞化疗敏感性，紫杉类疗效优于蒽环类药物可能与这一机制有关有待进一步研究。紫杉类化疗方案与蒽环类化疗方案的疗效在淋巴结是否转移上没有明显优势，这与多数研究报道不相符，通过加大样本量可能会更具说服力。同时，我们的研究中发现仍有一部分患者在应

book=28,ebook=16function in animals[J].PACE,2002,25：484.

用了紫杉类或紫杉联合蒽环类药物后疾病复发转移。HER-2的表达产物是一种酪氨酸激酶,对HER-2阳性尤其是过表达的患者通过酪氨酸激酶抑制剂可以阻断HER-2信号传导通路。因此，HER-2指标对乳腺癌的特异性治疗如分子靶向治疗、多肽及DNA疫苗的免疫治疗等具有重要意义，在临床治疗中也有广阔应用空间。

本研究是回顾性分析，为更好的研究HER-2与乳腺癌化疗方案的关系尚有待通过前瞻性研究来解决选择的偏移问题。

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The Role of HER-2 Expression in The Program Selection for Breast Cancer Ad juvant Chemotherapy

DAI Xie,ZHANG Yan-Tao,QIN Qin ZHANG Xian-Lan
（General Surgery Two,Affiliated Hospital of Guilin Medical College,Guilin 541001,China）

Objective To explore the relationship between HER-2 expression and the efficacy of different breast cancer adjuvant chemotherapy for screening of effective chemotherapy.M ethods 308 cases ofⅠ-Ⅲbreast cancer patients were adjuvant chemotherapyed with three kinds of programs of anthracycline and （or）taxane, HER-2 expression was detected by immunohistochemistry SP samples,the median follow-up 45.00 （13.2～94.1）months,and analysis the relationship among chemotherapy and pathological features （HER-2 status,hormone receptor status,pathological stage）and the survival rate.Results Overall recurrence rate 22.07% （68/308）,the average time to progression 27.58 months.In HER-2 positive patients,disease-free survival in anthracycline chemotherapy groupis DFS （135/191）,in taxane group chemotherapyis DFS （15/16）,and the difference was significant（x2=3.938,P＜0.05）；the difference between DFS（35/39）in Anthracycline-taxane combination group and that in anthracycline chemotherapy group was significant（x2=6.104,P＜0.05）.In hormone receptor-positive patients,the difference between DFS（116/165）in anthracycline-chemotherapy group and DFS （19/20）in taxol

原癌基因HER-2也称为c-erbB-2或HER-2/neu,HER-2基因定位于人类染色体17q21-22,编码具有酪氨酸激酶活性的细胞膜糖蛋白,分胞外结构域、跨膜结构域和细胞内结构域三部分[1]，HER-2分子在细胞表面以单体形式存在，此时基本无活性,当其与细胞外功能区的配体结合形成稳定的受体二聚体后才能产生活化信号，HER-2异质二聚体能明显减弱EGFR（上皮生长因子受体）与cab1的偶联,减少EGFR在细胞代谢过程中的降解,从而加快EGFR回到细胞膜上的循环,促使EGFR在细胞膜过表达,从而参与对细胞生长、繁殖和分裂的调控以及控制肿瘤的生长[2]。研究表明[3]HER-2可作为乳腺癌的预后评价指标，临床上HER-2阳性尤其是过表达的乳腺癌患者往往表现为生存率低、肿瘤恶性程度高、病情进展迅速、易发生淋巴结转移、化疗缓解期缩短。本研究应用蒽环类和（或）紫杉类三类化疗方案对310例局部进展期乳腺癌进行辅助化疗,探讨HER-2表达状态与乳腺癌不同方案辅助化疗疗效的关系,为患者筛选有效的化疗方案。

1 资料与方法

1.1 临床资料

本组308例取2002年至2008年我院行根治性手术或保乳手术加根治性放疗的Ⅰ～Ⅲ期女性患者,均经病理学确诊为浸润性乳腺癌,排除原位癌和特殊癌。全组平均年龄48.67±10.46（23～79）岁,中位年龄48.0岁。所有标本均有DCC法检测的雌激素受体（ER）值,阳性标准＞10pmol/mg。手术时有同侧腋窝淋巴结转移158例,无淋巴结转移者135例。根据2008年NCCN标准,Ⅰ期患者105例,Ⅱ期161例,Ⅲ期42例。将308例患者分蒽环类化疗方案（CTX,CEF,CAF,AC）,含紫杉醇类化疗方案（TC,T），蒽环联合紫杉类（TTC,TEC,TAC,TA,TE）三组化疗，标准化疗六个疗程。T1、T2期和（或）腋淋巴结＜4个的患者（低危组）以蒽环类方案为主,T3、T4期和（或）腋淋巴结≥4个的患者（高危组）以紫杉类和（或）蒽环类药物为主。随访截止日期为2009年12月30日,随访期（46.43±20.98）个月,中位随访45.00（13.2～94.1）个月。在随访期间有68例（22.07%）出现复发转移或死于乳腺癌,随访期间死于其他原因、失访或研究截止者,均计为删失数据。

1.2 试剂和方法

采用MaxVisionTM快捷免疫组化法,根据聚合物技术把过氧化物酶与抗兔IgG分子结合在多聚物上形成多聚物分子。石蜡切片用柠檬酸缓冲液高温高压进行抗原修复。免疫组化方法所用试剂抗HER-2单克隆抗体购自福州迈新生物技术开发公司,工作浓度为1∶100；快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒为福州迈新生物技术开发公司产品，检测程序按说明书进行,显色剂为DAB，阴性对照用TBS代替一抗。具体步骤为：1石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS（pH7.4）液冲洗三次，每次3分钟。2用柠檬酸缓冲液高温高压进行抗原修复。3.对内源性过氧化物酶含量高的组织，每张切片加一滴13%过氧化氢，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗三次，每次三分钟除去PBS液4.每张切片加一滴第一抗体，室温下孵育60分钟。5. PBS冲洗三次，每次3～5分钟。除去PBS液，每张切片加一滴即用型MaxVisionTM试剂，室温下孵育10～15分钟。PBS冲洗三次，每次3分钟。6.除去PBS液，每张切片加2滴新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察3～5分钟。7.自来水冲洗，苏木素染色，PBS冲洗返蓝。切片经过梯度酒精脱水干燥，二甲chemotherapy was significant（x2=5.517,P＜0.05）.In the axillary lymph node-positive patients,the difference of the disease-free survival between DFS （73/113）in anthracycline chemotherapy group and DFS17/19 in taxane chemotherapy was significant（x2=4.638,P＜0.05）；the difference between DFS（36/41）in anthracycline-taxane combination group and that in anthracycline was significant （x2=7.831,P＜0.01）.Conclusion Breast cancer patients of HER-2 positive were more sensitive to taxane chemotherapy drug,The efficacy of taxane on the hormone receptor-positive patients is better than that of anthracycline,and the efficacy of taxane and anthracycline on the hormone receptor-negative patients was not significantly different.The efficacy of anthracycline-taxane combined and taxane on lymph node-positive is better than that in anthracycline,and the efficacy of anthracycline and taxane and the combined drugs on lymph node-negative is rather.

Breast cancer；Adjuvant chemotherapy；HER-2苯透明，中性树胶封固。

R737.9

A

1673-016x（2010）01-0022-04

2009-12-26

广西省科研课题（Z2009062）

戴携（1982-），男，湖南长沙人，在读硕士生，主要从事外科临床工作，E-mail：66687712@99.com

＊通讯作者：张显岚，男，副主任医师，E-mail：xianlan-zhang@tom.com