恶性肿瘤组织标本的采集与保存

王晓蔚,沈 康,吴银芳

随着恶性肿瘤对人类的影响和危害性的增加,如何保护、保存并充分利用人类肿瘤遗传资源,提高我国肿瘤防治水平,已成为当务之急。作为恶性肿瘤研究材料的肿瘤组织标本在促进肿瘤研究进展过程中扮演了重要的角色,成为肿瘤研究工作的基础[1]。我院是一所具有30余年历史的肿瘤诊断治疗与教学科研为一体的专科性医院,在苏北地区创建最早、规模最大,拥有得天独厚的标本资源。现将人体肿瘤组织标本的采集、保存、管理体会介绍如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 由医院科研所牵头负责,联合病理科、各手术科室、手术室、腔镜室、检验科等,由手术室配备 1名资深护士执行具体操作。

1.2 方法

1.2.1 物品准备 照相机、直尺、取材车、无菌手术器械盒(内有刀柄、刀片、组织镊、血管钳等)、手套、不同颜色的冻存管、登记本、标记笔、标签纸、液氮罐及便携式标本贮藏罐;-86℃深低温冰柜;电动组织匀浆器;低温高速离心机等。

1.2.2 知情同意 所有组织标本的取材均需事先向病人及/或家属详细解释,征得病人及/或家属的同意后签署《知情同意书》并进行相关信息登记,内容包括姓名、性别、年龄、民族、职业、联系方式、住院号、临床诊断、拟施手术名称、术前病理诊断等。同时,标本采集一般在手术室、腔镜室进行,必须得到相关管理人员的许可,争取得到相关人员的积极配合以保证标本的及时获得。

1.2.3 采集方法

1.2.3.1 标本选择 选取直径大于3 cm的实体瘤进行组织标本采集,小于3 cm一般不采集,以免影响病人的术后组织学诊断。同时在同一标本的瘤旁和切缘部位选取癌旁组织和正常组织若干。

1.2.3.2 标本切取的方法与时机 在标本离体后的最短时间内(一般小于15 min),先对大体标本进行观察、拍照、测量,确认肿瘤的部位、范围,注意与周围组织及坏死组织相鉴别。然后分别将癌肿、癌旁组织和正常组织切取成多块(3块～5块)直径为0.2 cm～0.5 cm的组织块,装入已编号的灭菌冻存管中,迅速放入液氮转移罐并旋紧盖子。同时,抽取病人外周血10 mL,经低温高速离心机离心后取血清分成10份,一并置于液氮转移罐中。

1.2.3.3 标本的存放与登记 同一病人的所有标本(包括组织标本和血清标本)存放于同一个标本盒内,2 h之内由液氮罐转移至标本库-86℃深低温冰箱中长期保存。取材护士再将临时登记内容逐一全部录入计算机,采用统一设计的信息管理系统进行管理。内容包括:病人一般资料、标本资料(入库编号、入库时间、病变部位、标本描述、附上相片等);病理报告发出后的病理资料(肿瘤体积、组织类型、分级、浸润深度、切缘情况、免疫表型等);存放位置资料(入库编号、存放位置、标本数量、存放坐标等);标本使用(出库编号、出库时间、使用单位、使用人、审批单位、审批人等);标本质控信息(入库编号、实验内容、实验结果、实验人、实验日期等);标本废除信息(废除序号、入库编号、标本原始位置、废除日期、废除原因、经手人等)[2]。

1.2.3.4 药物敏感试验标本的采集 在病人知情同意的前提下,在相对无菌的条件下,取刚离体的恶性肿瘤组织0.5 cm3～1.0 cm3,置于检测人员配制好的培养液中或含生理盐水的抗生素瓶中送检。7 d～11 d可发出检测药物谱的敏感程度报告。

2 结果

目前我院在首先保证病理学诊断的基础上,已经成功收集和保存了包括肺、食管、大肠、乳腺、肝、胆管、胃、胰腺、甲状腺、肾等脏器肿瘤病人的新鲜组织标本,包括其血液或血液成分,能满足本院有一定学术和科研能力的研究者的需要,并且和上级研究机构有良好的协作关系。同时,借助丰富的标本资源,和医学院校成功合作开展了医学病理硕士教育。

3 小结

新鲜组织标本的采集技术要求高,需严格控制组织血流阻断至组织放入液氮中冻存所耗的时间和血液标本离体至冻存所耗的时间,且对人体结构和组织解剖要熟练掌握,因此收集者应当具备一定的专业知识,富有责任心。通过研究,决定由1位手术室资深护士承担此任,在工作开展前必须经过病理科医生的取材培训。另外,取材器械在同一标本的不同部位和不同标本之间均不能重复使用,以防止肿瘤细胞交叉污染,使用后需经过严格的清洗消毒[3]。要定期检查液氮和低温冰箱的性能和工作状态,冰箱最好是专线专用。

[1]李莉华,魏福祥,王丰,等.肿瘤库(用于分子生物学研究)的建立及管理[J].肿瘤,2004,24(6):578-580.

[2]党裔武.肿瘤组织标本库的创建及意义[J].实用医技杂志,2008,15(12):1499-1502.

[3]蓝素文,胡创英,陈秀杰.恶性肿瘤病人抗凝标本易凝血原因分析和对策[J].家庭护士,2008,6(7B):1829.

[4]凌颖瑜,郑三女,刘蔚晴.病理标本管理存在问题分析及对策[J].家庭护士,2008,6(9C):2509.