正交设计优化尿素软膏质量控制工艺

2010-07-30陈渝军管红珍李琳琳

中国医药导报 2010年26期

陈渝军，杨杰，梅艳，管红珍，李琳琳

(武汉市妇女儿童医疗保健中心，湖北武汉 430016)

尿素软膏作为皮肤外用药，主要适用于皮肤角化症、手足皲裂、干皮症、鱼鳞病等。其主要成分为尿素，可溶解角蛋白，增加蛋白质的水合作用，从而使角质软化和溶解。我院制剂室配制的尿素软膏是临床皮肤科常用的药物。本文采用正交试验设计法，根据中国医院制剂规范[1]收载的紫外分光光度法测定尿素的含量方法，考察提取次数、水浴温度、加10%氯化钠溶液量及提取时间的影响，确定尿素软膏中尿素质量控制的最佳提取工艺。

1 仪器与试药

UV-160A紫外分光光度计（日本岛津）；AB204十万分之一电子分析天平（瑞士梅特勒托利多）。尿素对照品（中国生物制品检定所，批号：100288-200201）；尿素（湖南省芙蓉联合制药厂，批号：20080712），甘油、羊毛脂、凡士林等辅料均为药用级，其余均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 正交试验设计

影响提取工艺的因素主要有：提取次数、水浴温度、加10%氯化钠溶液量及提取时间等因素，各取三个水平，按L9（34）设计正交试验。见表 1。

表1 正交试验因素水平Tab.1 The different factors of orthogonal test

2.2 含量测定

2.2.1 专属性试验按处方相当于尿素25 mg的量的尿素、甘油、羊毛脂、凡士林分别用10%氯化钠溶液溶解定容于100 ml量瓶中，分别于350～600 nm处扫描，见图1，在此范围均无吸收；分别按照“2.2.3”项下规定自“精密量取”到“15 min”操作并同样扫描，见图2，可见仅尿素在此范围内有吸收，且其最大吸收波长为430 nm。故本文选择430 nm为尿素含量的测定波长。

2.2.2 标准曲线的绘制精密称取尿素对照品适量，用10%氯化钠溶液溶解成0.25 g/L的溶液，备用。按照“2.2.3”项下规定自“精密量取”到“15 min”操作并在430 nm的波长处测定吸光度，以其吸收度对浓度进行线性回归，得回归方程C=220.7413A-0.4864（r=0.9999，n=7）。结果，尿素检测浓度在50～350 μg/ml范围内呈良好线性关系。

2.2.3 含量测定精密称取样品0.25 g，按表2所列条件进行提取，合并提取液，定容至100 ml作供试品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各4 ml，分别置具塞试管中，各精密加入对二甲氨基苯甲醛溶液4 ml，摇匀，暗处放置15 min，立即照紫外分光光度法，在430 nm波长处测定吸光度，按（A供×C对）/（A对×C供）×100%计算尿素百分含量，即得。方差分析见表3。

表2 正交试验结果Tab.2 The results of orthogonal test

表3 方差分析结果Tab.3 The results of variance test

从表2结果可以看出，对于提取工艺影响大小顺序为B＞A＞D＞C；由表 3可知，A、B 因素水平变化对实验结果有显著影响，C、D因素对实验影响不大。结合直观分析，拟定最佳提取工艺为A1B1C3D1，即精密称取样品0.25 g，采用提取次数4次、水浴温度60℃、每次加15 ml 10%氯化钠溶液提取15 min，合并提取液，定容至100 ml量瓶中，作供试品溶液。

2.3 提取工艺的验证试验

取样品（批号：091208）5份，按最佳工艺提取测定尿素含量，实验结果较为理想，样品编号1的尿素含量为92.45%；样品编号2的尿素含量为97.47%；编号3的尿素含量为94.59%；编号4的尿素含量为98.03%；编号5的尿素含量为95.62%，所有数据的（±s）为（95.63±2.25）。

2.4 与《中国药典》2005年版[2]方法比较

取样品（批号：091208）适量（约相当于尿素 50 mg），共5份，加乙醇20 ml，水浴加热，溶解后置冰浴中冷却30 min，过滤至100 ml量瓶中，用乙醇洗涤容器及滤器并入量瓶中，稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。另精取尿素对照品适量，用乙醇稀释成每毫升约含0.5 mg尿素，为对照品溶液。精密量取供试品与对照品溶液各3 ml，分别置25 ml量瓶中，各精密加对二甲氨基苯甲醛溶液10 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，暗处放置15 min，必要时滤过，立即照紫外分光光度法，在430 nm波长处测定吸光度，计算，即得。结果与优选最佳工艺比较，两种方法有显著性差异，见表4。