复方芪麝片中青藤碱及黄芪总苷的含量测定

2010-07-25谢瑞芳梁倩倩王拥军

中成药 2010年7期

周昕，谢瑞芳，梁倩倩，王拥军

(1.上海中医药大学附属龙华医院药剂科，上海200032;2.上海中医药大学附属龙华医院脊柱病研究所，上海200032)

复方芪麝片是由青风藤、黄芪等中药组成的中药复方制剂，具有益气化瘀、利湿通络、消肿止痛的功能，临床主要用于治疗气虚血瘀兼痰湿阻络型颈椎病。其中青风藤具有苦、辛、平，归肝脾经，具有祛风湿，通经络，利小便作用，为本复方的主药，含有青藤碱，具有抗炎和镇痛作用，因此本试验以青藤碱及黄芪总苷为指标成分对复方芪麝片进行含量测定的研究。

1 材料

1.1 试剂

青藤碱(0774-200206)为中国药品生物制品检定所;复方芪麝片(031201，040910)为上海现代中医药技术发展有限公司;甲醇(Merck)，二乙胺，碳酸氢钠、正丁醇(070817)等均为分析纯，水为双蒸水。

1.2 仪器

Agilent，TGL-16G台式高速离心机，SB2200超声仪，XW-80A型漩涡混合器。

2 青藤碱测定方法与结果

2.1 色谱条件

流动相:甲醇-0.05%二乙胺水(39∶61)，流速:1 mL/min，检测波长:262 nm，检测温度:25 ℃，进样量:5 μL。在此条件下，出峰时间为25.80 min，色谱峰与其它杂质峰能达到基线分离(图1，2)。

2.2 对照品溶液的配制

精密称取青藤碱对照品适量，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，得到浓度为0.32 mg/mL的对照品溶液。

2.3 样品溶液的制备

将复方芪麝片研碎，精密称取0.5 g左右，置10 mL的量瓶中，加甲醇接近刻度，摇匀，超声30 min，冷却，加甲醇至刻度，静置过夜。取上清液，10000 r/min离心10 min，用0.25 μm的微孔滤膜过滤，取续滤液备用。

2.4 标准曲线的绘制

将上述配制好的对照品溶液，稀释至不同浓度(0.32～0.64 mg/mL)，进样。以浓度为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，得到标准曲线为 Y=4.25×103X-0.403(r=0.999)。

图1 青藤碱色谱图

图2 复方芪麝片色谱图

2.5 精密度

吸取上述配制的对照品溶液，连续进样6次，测峰面积。结果显示RSD=1.4%，精密度良好。

2.6 重复性

图3 复方芪麝片阴性样品色谱图

精密称取研碎的复方芪麝片粉末6份，置10mL量瓶中，按照2.2项样品溶液的制备方法操作，测定。结果显示RSD=3.5%，重现性良好。

2.7 回收率

精密称取9份复方芪麝片粉末各约0.16 g，分3组，按照样品含量的80%、100%、120%分别加入对照品溶液2，2.4，2.9(mL)，置 5 mL 量瓶中，加甲醇接近刻度，按照 2.3项样品溶液的制备方法操作，得到的样品溶液，进样，测峰面积。结果见表1，回收率良好。

2.8 样品含量

分别精密称取复方芪麝片粉末(031201，040910)各3份，至10 mL量瓶中，按上述样品溶液的制备方法操作，得到的样品溶液进行含量测定。结果显示，两批之间没有显著性差异。见表2。

表1 回收率考察

表2 复方芪麝片中青藤碱的含量测定结果(n=3)

3 黄芪总皂苷测定方法与结果

3.1 对照品溶液的配制

精密称取黄芪甲苷对照品适量，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，得到浓度为0.34 mg/mL的对照品溶液，备用。

3.2 样品溶液的制备

称取复方芪麝片样品粉末0.7 g左右，置10 mL量瓶中，加水接近刻度，摇匀，超声30 min，过滤，得到的滤液用正丁醇萃取3次，每次10 mL，合并正丁醇液，用5%NaHCO3洗2次，每次30 mL，合并正丁醇液，在用纯化水30 mL洗1次，得到的正丁醇液，水浴蒸干，用2 mL的甲醇溶解，10000 r/min离心10 min，上清液用0.22 μm的微孔滤膜过滤，得到续滤液，备用。