乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测的临床应用

陈惠文 刘壬通 罗宜招 贺勇锋

1 广东省惠东县妇幼保健院（516300）

2 广东省惠东县人民医院（516300）

乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）感染是全球健康性问题，其中慢性HBV感染者约占世界的1/3[1]。临床应用上主要以肝功能是否得到改善，HBeAg和HBV DNA是否转阴作为乙型肝炎病毒复制与抗病毒疗效的监测的指标，在不具备实验室条件时，对HBV感染者的评估存在一定的局限。我们对147例患者同时进行ELISA方法检测乙型肝炎病毒外膜大蛋白（hepatitis B Virus Large Surface Protein，LHBs）、实时荧光法检测HBV DNA ，对结果进行统计学分析，探讨慢性乙型肝炎患者血清中LHBs与HBVDNA的关系。探讨LHBs检测作为反映乙型肝炎患者体内病毒的复制情况的评估指标。

表1 不同乙型肝炎标志物模式LHBs、HBV DNA阳性率比较

1 材料与方法

1.1 对象

147例乙型肝炎患者血清HBsAg均阳性，年龄14～55岁，病程2～5年。诊断均符合第十次全国病毒性肝炎及肝病学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》[2]，排除了其他类型的肝炎、失代偿期肝硬化、糖尿病、结核病等慢性疾病。

1.2 仪器与试剂

HBV DNA用实时荧光定量分析法进行检测，HBV DNA＜1.0×103copy/L为阴性，仪器用杭州博日BIORE line-gene，试剂由中山大学达安基因生物公司生产。LHBs用ELISA方法检测，试剂购自北京热景生物技术有限公司。

2 结 果

2.1 LHBs与HBV DNA结果表明，在相同乙型肝炎模式中，LHBs与HBV DNA结果阳性率经χ2检验差异无显著性（均P＞0.05），见表1。

2.2 HBeAg阳性和阴性血清LHBs、HBV DNA的检出情况比较 在HBeAg阳性血清中LHBs和HBV DNA的阳性率明显高于HBeAg阴性组，经χ2检验有显著性差异（P＜0.05），见表2。

3 讨 论

讨论LHBs是HBV的包膜蛋白，包括HBsAg与前S蛋白（PreS1 蛋白和PreS2蛋白）。近年研究表明，LHBs与病毒侵入、组装和复制等密切相关，能反映患者机体内HBV复制情况。研究鸭乙型肝炎动物模型发现含有嗜肝病毒血清的感染性不仅依赖于具有感染性的Danc颗粒的多少，还依赖缺乏叶酸的亚病毒颗粒的数量[3]。国内外研究表明，LHBs是导致肝细胞病变及凋亡的主要原因[4]。这个结果表明，LHBs可用于观察临床疗效和估计预后。本研究结果发现，对147例慢性乙型肝炎患者中血清LHBs与HBV DNA检测，LHBs阳性结果与HBV DNA阳性结果无显着性差异（P＞0.05），LHBs在一定程度上可作为HBV复制的指标。表2结果中有7例HBV DNA阴性的标本LHBs检测为阳性，可能是新的HBV突变株引起，导致PCR引物存在漏检，或者存在HBV DNA检测的方法学与灵敏度缺陷，导致低水平的HBV DNA漏检。结果表明，乙型肝炎患者HBV DNA结果阴性而LHBs结果阳性，可能是肝内病毒继续复制或抗病毒治疗不彻底的现象。同时，血清LHBs与HBV DNA阳性率也具有一致性，LHBs可作为HBV病毒复制及疗效监测的指标。

表2 HbeAg阳性和阴性血清LHBs、HBV DNA的检出情况比较 [例（%）]

过去临床认为，HBeAg阴转是HBV复制减弱、传染性降低和预后好转的表现，习惯认为乙型肝炎两对半模式中的HBeAg抗原和HBV DNA作为评估HBV病毒复制的指标，大量实验证明，因HBV的变异，HBV基因前C区或CP区的变异[5]，导致HBeAg合成障碍，HBeAg转阴后仍有患者存在病毒复制的现象，因此，HBeAg作为评估HBV病毒复制指标受到一定的限制。HBV DNA定量PCR检测是评估HBV复制最直接和可靠的指标，许多基层医疗单位因受实验室条件限制不能开展HBV-DNA定量检测，不能广泛应用临床。

目前有专家提倡，HBV DNA转阴、HBeAg血清转阴已不能作为抗病毒治疗的终点。本研究结果表明，LHBs和HBV DNA的结果有较好的一致性，能够反映乙型肝炎患者体内病毒的复制情况，尤其对

HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者的应用价值更大，LHBs可单独或联合其他检测方法评估HBV复制状况的指标。

[1] 梁晓峰,陈园生,王晓军等.中国3岁以上人群乙型肝炎血清流行病学研究[J].中华流行病学杂志,2005,26(9):655-658.

[2] 中华医学会传染病与寄生虫学会,肝病分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华传染病杂志,2001,19(1):56-62.

[3] Hidt E,Saher G,Bruss V,et al.The hepaititis B virus large surface protein LHBs is a transcriptional activator[J].Virology,1996,225(1):235-239.

[4] Roingeard P,Sureau C.Ultrastructural analysis of hepatitis B virus in HepG2-transfected cells with special emphasis on sub viral filament morphogenesis[J].Hepatology,1998,28(4):1128-1133.

[5] Hamasaki K,Nakata K,Nagayama Y,et al.Change in prevalence of HbeAg negative mutant hepatitis B virus during the course of chronic hepatitis B[J].Hepatology,1994,20(1 Pt 1) :8-14.