芪芎健肾颗粒对大鼠系膜增生性肾小球肾炎的疗效研究

霍淑杰，赵 刃

（1.华北煤炭医学院研究生，唐山 063000；2.唐山市中医医院肾内科，唐山 063000）

芪芎健肾颗粒是临床治疗系膜增生性肾小球肾炎的经验方，由黄芪、川芎、山药、山茱萸、泽泻、茯苓、益智仁、牛膝等组成，具有益肾健脾、活血消肿的功效。为了验证其抑制炎症，保护肾脏的作用，笔者做了芪芎健肾颗粒对系膜增生性肾小球肾炎（MSPGN）的实验，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验药物 1）治疗组：芪芎健肾颗粒，由唐山市中医医院制剂室制作，（制剂批准文号：冀药制字Z20050835）。2）对照组：肾炎康复片，由天津同仁堂集团股份有限公司提供，（国药准字z10940034）。3）模型组：生理盐水，由唐山市中医医院提供。

1.2 实验动物 选用Wistar大鼠50只，雄性，体质量150～160 g，由北京维通利华实验动物有限公司提供，动物许可证编号为SCXK（京）2005—0013，在本院的动物实验中心的屏障实验室饲养。

1.3 实验试剂 完全弗式佐剂，由Sigma公司生产。不完全弗式佐剂，由Sigma公司生产。葡萄球菌肠毒素（SEB），由解放军军事科学院生产。牛血清白蛋白（BSA），由Sigma公司生产。

1.4 观察指标 大鼠24 h尿蛋白定量（日立7150全自动生化分析仪）、肾功能（TGL-16型冷冻低温离心机）和肾脏病理形态学的改变（超薄切片机、奥林巴斯显微镜）。

1.5 实验方法 实验动物适应性喂养1周后,按随机数字表随机分为5组，空白组、模型组、肾炎康复片组、芪芎健肾颗粒低剂量组(简称芪低组)、芪芎健肾颗粒高剂量组（简称芪高组），每组10只。除正常对照组外，其余各组参照刘震[1]的报道制备MsPGN模型以牛血清白蛋白20 mg配成水溶液隔日灌胃1次，到12周末。实验第1天经皮下分点注射完全弗式佐剂0.2 mL（其中含BSA 2 mg），第8天注射不完全弗式佐剂0.2 mL（其中含BSA 2 mg），实验的第8天和第15天分别从尾静脉注射葡萄球菌肠毒素（SEB）0.4 mg/kg体质量配成的水溶液各1次。

1.6 给药方法 从第5周开始，芪芎健肾颗粒低剂量治疗组、芪芎健肾颗粒高剂量治疗组按药理学实验动物给药方法[2]计算，均以成人剂量（kg体质量）的10倍和15倍灌胃给药。肾炎康复片组也以成人剂量（kg体质量）的10倍方法给药，模型组给予相同剂量的生理盐水。芪芎健肾颗粒低剂量治疗组0.5 g/d、芪芎健肾颗粒高剂量治疗组0.75 g/d、肾炎康复片组0.24 g/d，在此过程中，根据大鼠的体质量调整剂量。

1.7 统计方法 统计分析使用SPSS 13.0统计软件处理。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用单因素方差分析方差齐时组间两两比较用LSD法，方差不齐时组间两两比较用Dunett’s T3法以P<0.05为有统计学意义。

2 实验结果

2.1 芪芎健肾颗粒对大鼠系膜增生性肾小球肾炎的尿蛋白治疗结果 正常对照组与其他各组比较均有显著差异（P＜0.05），说明造模成功。其余各组比较无明显差异，提示造模大鼠病损基本一致，存在可比性。造模后第12周：芪芎健肾颗粒低剂量组、芪芎健肾颗粒高剂量组与模型组相比，大鼠24 h尿蛋白定量显著少于模型组（P<0.05），有统计学意义；芪芎健肾颗粒高剂量组与肾炎康复片组相比，大鼠24 h蛋白定量有显著性差异（P＜0.05），有统计学意义。见表1。

表1 24 h尿蛋白定量的改变的比较(±s)Tab.1 Comparison of changes of urine protein in 24 hours(±s)mg/24 h

表1 24 h尿蛋白定量的改变的比较(±s)Tab.1 Comparison of changes of urine protein in 24 hours(±s)mg/24 h

注：与正常组相比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型组相比较，*P<0.05，**P<0.01；与肾炎康复片组比较，＃P<0.05，＃＃P>0.05。

组别空白组模型组芪低组芪高组肾炎康复片组n 1010101010第4周1.1383±0.70484.8454±2.9424△5.0198±2.0646△4.3772±1.6374△4.9172±2.5132△第8周1.6517±1.29625.2165±3.1135△3.1742±2.47992.7716±1.1208△4.6422±2.9826△第12周1.4452±1.46996.3683±1.86003.0650±1.0572*2.1878±1.0428*﹟4.4040±1.7865*

2.2 芪芎健肾颗粒对大鼠系膜增生性肾小球肾炎的肾功能治疗结果

2.2.1 尿素氮（BUN）的变化 表2中可以看出，造模后12周，空白组与模型组、治疗组及对照组比较BUN均有显著差异（P<0.05），提示大鼠在造模12周后出现了肾功能损害。芪芎健肾颗粒低剂量组、芪芎健肾颗粒高剂量组、肾炎康复片组与模型组比较，BUN均明显降低（P<0.05），提示芪芎健肾颗粒低剂量组、芪芎健肾颗粒高剂量组与肾炎康复片组对大鼠肾功能均有一定的保护作用。芪芎健肾颗粒低剂量组、芪芎健肾颗粒高剂量组中BUN含量稍高于肾炎康复片组，但3组比较无明显差异（P>0.05），无统计学意义。

表2 芪芎健肾颗粒对各组大鼠肾功能检验结果的比较(±s)Tab.2 Results of renal function in rats of each group(±s)

表2 芪芎健肾颗粒对各组大鼠肾功能检验结果的比较(±s)Tab.2 Results of renal function in rats of each group(±s)

注：与正常组相比较，△P<0.05，△△P<0.01；与模型组相比较，*P<0.05，**P<0.01；与肾炎康复片组比较，＃P<0.05。

组别空白组模型组芪低组芪高组肾炎康复片组n 1010101010 BUN（mmol/L）5.548±0.78467.351±1.0951△6.093±0.9255△*6.070±0.5758△*6.038±0.4258△*CR（μmol/L）43.7±6.7590.6±4.595△57.8±1.989△*51.6±3.204△*63.0±2.357△*

2.2.2 血肌酐（CR）的变化 在CR方面,造模后12周，空白组与模型组、治疗组及对照组比较均有显著差异（P＜0.05），提示大鼠在造模 12 周后出现了肾功能损害。芪低组、芪高组、肾炎康复片组与模型组相比，有显著性差异（P＜0.05），有统计学意义，说明芪芎健肾颗粒有改善肾功能的作用。芪芎健肾颗粒低剂量组、芪芎健肾颗粒高剂量组与肾炎康复片组比较，虽无明显差异（P＞0.05），但芪芎健肾颗粒低剂量组、芪芎健肾颗粒高剂量组含量均稍低于肾炎康复片组，尤其是芪芎健肾颗粒高剂量组最少。说明芪芎健肾颗粒对改善肾功能的作用优于肾炎康复片。见表2。

2.3 肾脏组织病理学观察结果 空白组大鼠肾小球及肾小管均正常；模型组系膜细胞弥漫增生，每个系膜区细胞数平均4～7个，系膜基质增多，系膜区的宽度大于毛细血管直径，肾小球毛细血管官腔有的受压变窄或闭塞，有的出现结构破坏，血管消失，肾小管无变形，肾间质无水肿。

芪芎健肾颗粒高剂量组：大鼠肾脏病理得到明显改善，组织中可见肾小球系膜细胞增多不明显，每个系膜区系膜细胞大约2～3个，基质增生不明显，系膜区宽度小于毛细血管直径，毛细血管通畅，肾小球毛细血管基底膜无异常，肾小管未见变形，肾间质无水肿。

肾炎康复片组：与模型组相比，肾脏病理明显减轻，与正常组相比，可见部分肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生，系膜区细胞比模型组减少，每个系膜区系膜细胞大约3～4个，系膜区宽度小于毛细血管直径，肾小球毛细血管管腔受压不明显，毛细血管基底膜无明显改变，肾小管无变形，肾间质无水肿。

3 讨论

目前对系膜增生性肾小球肾炎的药物治疗临床上西医对轻症患者采用对症治疗，重症以糖皮质激素、细胞毒药物等及对症治疗方法，存在一定的毒性和不良反应如糖皮质激素易造成血糖及血压升高，久服后易出现股骨头坏死；细胞毒药物易造成肝功能异常、白细胞减少等，因此，人们把目光转向中药。中药毒副作用低，能提高机体免疫力，不易产生耐药性，为近年来研究的热点。

系膜增生性肾小球肾炎，中医辨证多属“水肿”、“腰痛”等范畴，本病起病缓慢，反复发作，日久迁延不愈，导致脾肾气虚。脾、肾脏腑功能失调，脾虚运化水湿功能失调，则水湿泛滥、溢于肌肤发为水肿；肾主水，肾气虚气化不利，则水无以制而发为水肿。肾气虚，肾失封藏，精微不能固涩而下流则小溲泡沫增多（蛋白尿）。气虚无力推动血行，加之久病入络，造成瘀血内阻肾络，腰失所养则出现腰痛。治疗以健脾益肾，活血消肿为主，以扶正祛邪。黄芪补益脾肾，益气升阳。《内经》有云“阳虚则寒”、“久病成瘀”，故用川芎行气化瘀，活血通络，黄芪与川芎共为君药。山茱萸补肝固精，山药健脾养胃，补肺益肾且泻利湿，泽泻利尿补阴益气，清湿热，可治由肾阳虚，下元温煦气化失职的水肿。茯苓既可渗湿利水，增泽泻之效，又可健脾宁心助山药黄芪之功。益智仁暖肾固精缩尿，又可温脾止泻摄唾。故可治疗气虚肾失封藏、精微不能固涩而下流的泡沫。牛膝具有活血通经补肝肾、强筋骨、利尿通淋引血下行作用。各药合用，使之滋补而不留邪，降浊而不伤正，补中有泄，寓泄于补中，相辅相成。笔者通过大鼠模型观察芪芎健肾颗粒对系膜增生性肾小球肾炎的疗效，并与全国公认的治疗慢性肾炎的中成药肾炎康复片进行对照，由实验结果发现，高、低剂量组芪芎健肾颗粒可以显著降低蛋白尿，血肌酐、尿素氮的含量，改善肾脏病理组织，说明芪芎健肾颗粒可以降低蛋白尿，抑制系膜细胞增生和基质的增多，提高人体免疫力，保护肾功能。

[1] 刘 震,周树录,谭建三，等.大鼠系膜增殖型肾小球肾炎模型的改[J].华西医科大学学报,1996,27(2):182-183.

[2] 徐叔云.药理实验方法学 [M].北京：人民卫生出版社，1991：1535-1536.