从葛根素的异常毒性实验看药用辅料的重要性

周永标，潘卫松

（广州市药品检验所，广东广州 510160）

传统上认为辅料应是非活性的，所以出现药物不良反应时，人们往往归之于活性成分。事实上，辅料并非惰性，药用辅料所引发的药物不良反应屡见报道[1]。葛根素是一有效的β-肾上腺受体阻滞剂。临床验证有肯定的抗急性心肌梗死，抗高肾素型高血压、抗心律失常疗效。葛根素注射液临床使用较为广泛，主要用于辅助治疗冠心病、心绞痛、心肌梗死、视网膜动、静脉阻塞、突发性耳聋及缺血性脑血管病、小儿病毒性心肌炎、糖尿病等。传统医学认为葛根无毒。已有报道小鼠的静脉注射葛根素的LD50为738.1 mg/kg，95%的可信限为604.0～901.8 mg/kg[2-3]。

目前国内生产的葛根素注射液在生产工艺中通常系以50%丙二醇作为增溶剂。丙二醇（1,2-二羟丙烷，propylene glycol，1,2-dihydroxy propan）广泛用于制药、食品和化妆品工业中，在药品中常用作增溶剂、润湿剂、保湿剂、防腐剂等。人体对于丙二醇的安全范围并无明确界定，丙二醇对小鼠静脉注射的LD50为66 301 mg/kg[4]。笔者在进行注射剂标准提高的研究中，发现葛根素注射剂的毒性反应与丙二醇的含量存在相关性。为了证实丙二醇的含量影响葛根素注射剂的毒性反应，特进行了如下实验研究。

1 仪器与试药

1，2-丙二醇[批号：20060901-1，分析纯，密度（g/ml，20℃）：1.036~1.039，广州化学试剂厂]；灭菌注射用水（批号：0701090202，广东神州制药有限公司）；氯化钠注射液（批号：D061224，湖南科伦制药有限公司）；葛根素注射液（规格：2 ml∶100 mg，内含 50%丙二醇）；注射用葛根素（规格：0.2 g/瓶，冻干粉针，辅料主要是甘露醇、碳酸氢钠）；葛根素氯化钠注射液（规格：250 ml，内含葛根素0.4 g与氯化钠 2.25 g）；葛根素葡萄糖注射液（规格：250 ml，内含葛根素0.3 g与葡萄糖12.5 g）；SPF 级 KM 小鼠（体重：18～20 g，雌雄兼用，广东省医学实验动物中心，实验动物许可证号：2007A012）。

2 方法与结果

2.1 方法

2.1.1 葛根素注射制剂的异常毒性

参照《中国药典》2005年版附录Ⅺ C异常毒性检查法，按照尾静脉注射给药法试验。葛根素注射液分别用氯化钠注射液配制成50.0、40.0、20.0 mg/ml的系列溶液，分别给药；注射用葛根素分别用氯化钠注射液配制成55.6、50.0、40.0 mg/ml的系列溶液，分别给药；葛根素氯化钠注射液和葛根素葡萄糖注射液分别以制剂原液（50.0 mg/ml）给药。

2.1.2 丙二醇的异常毒性

2.1.2.1 50%丙二醇溶液的配制 取50 ml丙二醇加灭菌注射用水到100 ml，置200 ml三角烧瓶中，摇匀，121℃加压30 min后，放凉，备用。

2.1.2.2 20%丙二醇溶液的配制 取上述50%丙二醇溶液2.0 ml，加氯化钠注射液到5.0 ml，置5 ml量瓶中，摇匀，121℃加压30 min后，放凉，备用。

2.1.2.3 异常毒性检查 取上述两种溶液参照《中国药典》2005年版，附录ⅪC异常毒性检查法，分别给药，给药容量分别为1.00、0.50、0.30、0.25、0.20 ml。 同时将葛根素注射液分别以氯化钠注射液配制成为50 mg/ml和20 mg/ml的溶液作为对照试验组，进行平行给药试验。

2.2 结果

本次试验分别对国内9个厂家两种剂型3种规格共17批样品进行考察，结果见表1、2。

由表1、2可知，不同剂型的葛根素制剂毒性反应情况为葛根素注射液＞注射用葛根素＞葛根素氯化钠注射液和葛根素葡萄糖注射液；50%丙二醇＞20%丙二醇。而动物毒性反应表现与丙二醇毒性反应基本相同。当稀释药物浓度即降低药物中丙二醇的含量时，药物的毒性反应随之减轻，而无加丙二醇作助溶剂的其中3种剂型动物异常毒性无反应或较轻。以上结果表明葛根素注射液的毒性反应与其中丙二醇的含量呈正相关。

表1 葛根素注射剂不同剂型的异常毒性试验结果

表2 葛根素注射液和不同浓度丙二醇溶液异常毒性试验结果

3 讨论

有文献报道，WHO根据代谢和毒理试验数据，将丙二醇的日摄取量定为每千克体重25 mg；丙二醇大量摄取会引起中枢神经不良反应[4-6]。因此，注射剂的异常毒性和加入辅料的量有相当密切的关系，临床使用中根据实际情况选用不同的剂型进行治疗，这也是一种减少临床出现不良反应的手段之一。

注射剂的毒性和辅料的关系很大。药用辅料是药品的一个重要组分，其质量优劣直接影响到药品的质量及使用。亮菌甲素的二甘醇事件，国家食品药品监督管理局认定聚山梨酯-80为导致临床鱼腥草注射液发生过敏反应的致敏原，临床上静脉注射含吐温-80的注射液，如依托泊苷注射液和多西紫杉醇注射液，常发生急性超敏反应。这些事件都提示注射剂中一部分的不良反应是由辅料所导致的。我国专家已经越来越意识到辅料对于保障临床用药安全有效的重要性[7-12]。

美国目前药剂辅料已达1 000种以上，共分40多类。其中《美国药典》1980年收载的法定药剂辅料为260种；1988年版则增加为330种；1900年版再增加为345种。我国目前药用辅料标准数量少，标准项目不齐全，许多常用辅料没有药用标准，严重影响了辅料的管理和使用。我国己经制订并公布的药用辅料标准占所使用的药用辅料总数的比例还不到30%，远远不能满足实际需求。

目前，世界制剂辅料发展更为迅速，新辅料不断问世。近十年来，开发的新辅料已达300多种，其中新剂型、新系统及其他制剂用辅料就达100多种。不但品种大幅度增加，而且型号多、规格全。如丙烯酸树脂有数十个不同规格、型号的产品，卡波姆有5个产品，聚乙二醇有23个不同规格和型号。因此对辅料要进行风险评估、辅料和活性成分的相互作用的评估，建立药用辅料的标准，关注辅料可能的不良反应，已经成为保障临床用药安全有效的重要部分。

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