替硝唑葡萄糖注射液与注射用盐酸头孢替安配伍稳定性考察

杨艳 张婉婷

替硝唑(tinidazole)属于硝基咪唑类衍生物，具有广谱抗厌氧菌作用，是继甲硝唑之后的一种疗效更高、体内分布更广、耐药性低的药物[1]。除用于抗滴虫和抗阿米巴原虫外，近年来，广泛地用于抗厌氧菌的系统与局部感染：如腹腔、妇科、手术创口以及肠道和肝阿米巴病等。头孢替安(cefotiam，CEF)系第二代头孢菌素类抗生素，抗酶性能强，对第一代头孢菌素耐药的革兰阴性菌菌株也有效；抗菌谱广，比第一代头孢菌素抗菌谱有所扩大，主要敏感菌有葡萄球菌属、链球菌属、肺炎球菌等，对奈瑟菌、部分肠杆菌属等亦均有抗菌作用,有时临床病例有厌氧菌与需氧菌引起的混合感染，临床工作者将二者结合起来用。但目前未见有二者配伍稳定性的报道。本文模拟临床用药浓度对替硝唑葡萄糖注射液与头孢替安的配伍稳定性进行考察，为临床用药安全提供参考依据。

1 材料

1.1 试剂和药品

替硝唑葡萄糖注射液(四川科伦有限公司，规格100ml：葡萄糖5g，替硝唑0.4g，批号：E090520)，注射用盐酸头孢替安(商品名：佩罗欣， 哈尔滨制药总厂，规格1g，批号B200907305)，葡萄糖标准品(中国医药上海化学仪器公司，批号：F990524；)，蒸馏水(实验室自制)。

1.2 仪器

TU-1901型双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；Sartorius BT125D电子分析天平(塞多利斯科学仪器有限公司)；SG5200HPT超声波清洗器(上海冠特超声仪器有限公司)；SartoriusPH计(塞多利斯科学仪器有限公司)；GWF微粒分析仪(天河医疗仪器有限公司)。

2 方法与结果

2.1 贮备液的配制

取佩罗欣一支(以头孢替安计)，取蒸馏水将药物粉末溶解并转移于50ml容量瓶中，蒸馏水定容即得浓度为20mg/ml的贮备液A；0.4%替硝唑葡萄糖注射液为贮备液B。

2.2 测定波长的选择

从上述配制的贮备液A中精密量取0.1ml于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至100ml得浓度为20μg/ml供试液A。精密量取0.5ml贮备液B于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容即得浓度为20μg/ml供试液B。取供试液A、B以蒸馏水为空白在200～400nm波长范围内进行扫描，结果替硝唑在317nm波长处有一稳定的最大吸收峰，与文献一致[2]。头孢替安在258nm波长处有一稳定的最大吸收峰，扫描紫外光谱图见图1。从图谱上可见，替硝唑在头孢替安的最大吸收峰处有吸收，对头孢替安的测定有影响，故采用紫外双波长等吸收消去法测定头孢替安的含量。根据紫外双波长等吸收消去法等吸收原则选择258nm为测定波长，参比波长为356.63nm。在替硝唑的最大吸收波长317nm处，头孢替安在此无吸收，对替硝唑的含量测定无影响，故选择317nm为替硝唑的测定波长。

图1 替硝唑和头孢替安紫外扫描光谱图

2.3 验证葡萄糖无干扰实验

精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖0.0718g，置于小烧杯中，加适量纯化水溶解并定容至250ml容量瓶中，摇匀即得无水葡萄糖标准溶液。精密量取无水葡萄糖标准溶液2.0ml置于25ml容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，摇匀即得浓度为22.976μg/ml的葡萄糖溶液。取此溶液于200～400nm波长范围内进行波长扫描，在此范围内无吸收。

2.4 头孢替安标准曲线绘制

取佩罗欣一支(以头孢替安计),取蒸馏水将安瓿中的药物粉末溶解并转移于1000ml容量瓶中，蒸馏水并定容至刻度。再分别精密量取此溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml置100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释并定容，摇匀即得头孢替安系列溶液，以258nm为测定波长，356.63nm为参比波长，蒸馏水为空白，测定吸收度。以吸收度差△A对浓度C回归，得回归方程为C=38.19657△A-0.79735(r=0.9999)。结果表明，在5～25μg/ml范围内，吸收度差△A与浓度C呈良好的线性关系。

2.5 替硝唑葡萄糖标准曲线绘制

表1 替硝唑葡萄糖注射液与头孢替安的回收率实验结果(n=6)

精密量取0.4%的替硝唑葡萄糖注射液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml置100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释并定容，摇匀即得替硝唑葡萄糖系列溶液，以317nm为测定波长，蒸馏水为空白，测定吸收度。以吸收度A对浓度C回归，得回归方程为C=26.25457A-0.0523(r=0.9996，n=5)。从回归方程结果可知，替硝唑葡萄糖在4～20μg/ml范围内，吸收度A与浓度C呈良好的线性关系。

表2 配伍液外观及PH值(n=3)

表3 8h内替硝唑葡萄糖注射液和头孢替安配伍后的微粒变化(n=3)

2.6 回收率实验

精密量取替0.4%硝唑葡萄糖贮备液B和头孢替安贮备液A，用蒸馏水配制成含替硝唑8、12、16μg/ml和头孢替安10、15、20μg/ml的混合溶液，照标准曲线下的方法分别测定吸收度A，所得数据代入回归方程，计算回收率。结果见表1。

2.7 配伍实验

模拟临床用药浓度，取佩罗欣(以头孢替安计)，加入0.4%替硝唑葡萄糖注射液定容至刻度，摇匀即得配伍溶液。室温下0，1，2，4，6，8h时间点观察配伍溶液的外观变化、测定PH值、微粒粒径、替硝唑与头孢替安各自的含量。

配伍溶液在室温下0～8h内，无沉淀及汽泡产生，均为淡黄色澄明液体。配伍液的PH值无明显改变。详见表2

2.8 不溶性微粒测定

室温下，于各时间点取配伍液对其微粒(≥10um，≥25um)进行测定。结果显示不溶性微粒无明显变化且符合2005版《中国药典》[3]规定，详见表3。

2.9 观察吸收曲线形状变化及测定含量室温下，各时间点取配伍溶液稀释至一定浓度，在选定的测定波长处测定替硝唑和头孢替安的吸收度，代入回归方程，以0h的含量为100%，计算出各自的百分含量。结果，配伍后替硝唑和头孢替安各自含量无明显变化，详见表4。在测定吸收度的同时在200～400nm波长范围内进行扫描，结果溶液的吸收曲线形状未改变，亦未发现新的吸收曲线，最大吸收峰也未发生移动。

3 讨论

在200～400nm波长范围内对头孢替安和替硝唑葡萄糖注射液进行扫描，头孢替安的最大吸收波长在258nm处，替硝唑葡萄糖注射液的最大吸收波长在317nm处，但替硝唑在头孢替安的最大吸收波长258nm处有吸收对头孢替安的含量测定有影响，为了消除此影响本实验采用了紫外双波长分光光度法测定头孢替安的含量。实验结果表明紫外双波长分光光度法操作简单、方便，可用于对头孢替安的含量测定。但在选择测定波长时，根据紫外双波长分光光度法等吸收原则，尽可能使共有组分的△A趋于零[4]，否则会影响测定结果。

表4 配伍液8h内的含量变化(%，n=3)

替硝唑葡萄糖注射液的溶媒是葡萄糖，为了考证葡萄糖对配伍液的含量测定有无影响，需用葡萄糖标准溶液在200～400nm范围内扫描，扫描结果表明葡萄糖在此波长范围内根本无吸收，对配伍液的含量测定无影响。

实验结果表明，在0～8h内替硝唑葡萄糖注射液与头孢替安配伍后溶液外观均为淡黄色澄明，无沉淀及汽泡产生，替硝唑葡萄糖注射液与头孢替安的含量基本无变化。紫外图谱发现吸收曲线形状未改变，最大吸收峰无位置改变，亦无新的吸收峰出现，说明替硝唑葡萄糖注射液与头孢替安配伍化学性质稳定，未有新的物质出现；配伍液的PH值无明显变化，且符合注射液的pH要求(4～9)[5]；不溶性微粒检查亦符合2005版《中国药典》规定。故认为临床上二者配伍后在8h内可以使用。

[1]陈新谦,金有豫,汤光.新编药物学[M].16版.北京:人民卫生出版社,2007:69-77.

[2]刘伟,张晓梅,王晓霞.替硝唑葡萄糖注射液中配伍止血芳酸的稳定性[J].中国医院药学杂志,2002,22(3):187-188.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2005:附录ⅨC.

[4]孙毓庆.分析化学[M].3版.北京:人民卫生出版社,1996:32-46.

[5]崔福德.药剂学[M].6版.北京:人民卫生出版社,2007:67-75.