急性冠脉综合征患者MMP-2变化及其与冠脉病变程度的关系

崔 燕,吴东垣,叶建华,祝金明

(吉林大学第二医院心血管内科,吉林长春130041)

本研究通过观察急性冠脉综合征(ACS)患者基质金属蛋白酶-2(MMP-2)变化,探讨其在ACS发生、发展中的作用及其与冠状动脉病变程度的关系。

1 材料与方法

1.1 对象 选择2007年9月至2008年2月于本院心内科住院的急性冠脉综合征患者40例,其中急性心肌梗死组(AMI)20例,平均年龄51.9±9.8岁,均伴有心电图和/或心肌酶学改变。AMI诊断标准:①典型胸痛症状持续30分钟以上;②心电图上2个或2个以上相邻导联ST段抬高≥0.1 mv(V1-3≥0.2 mv);③典型的心肌坏死生物学标记物(cTnI/cT-nT)或CK-MB的动态改变,符合其中任意两条即可诊断。不稳定型心绞痛患者20例,平均年龄58.9±13.1岁,包括初发心绞痛、恶化劳力性心绞痛。对照组为冠状动脉造影证实非冠心病患者20例,平均年龄57.2±12.8岁,收集静脉血1 ml,离心后提取血清,储存在-20℃冰箱。

1.2 方法 MMP-2测定酶谱检测(SDS-PAGE Zymography):10%Polyaerylamidc胶中含有 lg·L-1Gelatin,应用同等量血清蛋白(40 μ g)行蛋白电泳。电泳结束后,把蛋白胶放入2.5%Triton X2100清洗20分钟,然后将蛋白胶放入培养基中(50 mmol/L Tris HCl,pH7.4,10 mmol/l CaCl2,0.05%Bis Tris35),37℃水浴箱中孵育 24小时。Colloidal Brilliant BlueG2250染色60 min。MMPs在胶中显示白色区带,根据分子量判定酶原和酶。根据目的带的亮度和面积用N7Himage 1.57 Software程序自动读取并记录每条带密度的相对定量值,单位用INT·mm2表示。

1.3 冠状动脉病变程度 冠状动脉造影采用Judkin法,每支血管选择最佳多体位造影。以国际通用的直径法,由2名有经验的医师对造影结果进行分析完成。具体方法为:冠状动脉造影示腔径狭窄≥50%的病变,若左前降支、回旋支或右冠状动脉中1支狭窄者为单支病变组;2支有病变者为双支病变组;3支均有病变者为3支病变组。对于左主干病变者,无论左前降支或回旋支有无病变,均为双支病变组;若同时合并右冠状动脉病变则为3支病变组。冠状动脉狭窄程度以直径法百分数表示,若同时累及多支血管或1支血管多处病变,选择狭窄最严重的1支血管。冠状动脉病变程度评分采用Gensini评分系统[1],其中由两部分组成:①根据冠状动脉狭窄程度确定基本评分:冠状动脉狭窄25%、50%、75%、90%、99%、100%的评分分别是 1、2、4、8、16、32分;②根据冠状动脉病变部位确定评分系数:左冠状动脉主干病变的系数为5;前降支近段病变的系数为2.5,中段病变的系数为1.5,第一对角支病变的系数为1.0,第二对角支病变的系数为0.5;回旋支近段病变系数为2.5,钝缘支病变系数为1.0,远段病变系数为1.0,后降支病变系数为1.0;右冠状动脉近段、中段、远段均为1.0,左心室后降支病变系数为0.5。进行定量评分时,根据每处冠脉狭窄程度所获得的基本得分值乘以该病变部位的系数即为该处病变的积分。1例患者如有多处病变则各病变处的积分累计总和为该患者冠状动脉病变严重程度的总积分。

2 结果

2.1 不同冠状动脉病变支数组MMP-2升高水平比较见表1。

表1 不同冠状动脉病变支数组MMP-2水平比较(±s)

表1 不同冠状动脉病变支数组MMP-2水平比较(±s)

*与对照组比较,P＜0.05

分组 n MMP-2正常对照组 20 1.462±1.316单支病变组 12 13.693±9.715*双支病变组 12 8.722±5.941*三支病变组 16 12.227±5.901*

2.2 各组基质金属蛋白酶-2水平比较见表2。

表2 各组MMP-2水平比较

2.3 急性冠脉综合征患者血清基质金属蛋白酶-2与Gensini Score无明显相关性(r=0.001 9,P=0.990 7)。

3 讨论

MMPs是一类依赖于Ca2+、Zn2+的蛋白酶,能由免疫细胞、成纤维细胞、肿瘤细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞及泡沫细胞等分泌,其能分解Ⅳ型胶原,促进中膜平滑肌细胞向内膜下迁移[2],加速动脉粥样硬化的进程并导致不稳定型斑块的形成[3]。本研究发现,AMI组、UA组的MMP-2水平均显著高于非冠心病对照组,且有统计学意义。AMI组MMP-2水平虽高于UA组,但无统计学意义,说明MMP-2可作为粥样硬化斑块形成及形态发生改变的血清学指标,用于评估斑块的稳定性,但不一定能作为斑块破裂的血清学指标以评价患者是否发生AMI。其主要原因为斑块破裂的危险因素除了其不稳定性外,还有斑块承受的机械应力[4]。因此,MMP-2水平将有可能作为不稳定型心绞痛发展为急性心肌梗死的高危因素。本研究结果发现,单支病变组、双支病变组、三支病变组组间MMP-2水平无统计学差异,说明MMP-2与冠状动脉病变支数无明显关系。此外,本研究还发现MMP-2水平,与Gensini Score无明显相关性。急性冠脉综合征组与正常对照组相比,MMP-2水平明显升高且具有统计学意义,而急性冠脉综合征是不稳定斑块破裂所致,故MMP-2是动脉粥样硬化斑块稳定性指标,与斑块大小、斑块数量无关。因此,检测到血清中MMP-2水平变化有助于估价斑块的稳定性,早期识别高危病人,及时治疗,对减少心脏事件发生具有重大意义。

[1]Godis ZS,Muszynski M,Sukhova Gk,et al.Cytokine-stimalated human vascular smooth muscle cells synthesize a complement of enzymes required for extrecellular matrixdigestion[J].Circ kes,1994,75:181.

[2]UzuiH,Lee JD,Shimizu H,et al.The role of protein tyrosine phosphorylation and gelatinase production in the migration and proliferation of smooth muscle cells[J].Atheroscleresis,2000,149(1):51.

[3]Newby AC zaltsman AB.Molecular mechanisms in intimal hyperplasia[J].J pathol,2000,190(3):300.

[4]Moreno PR,Falk E,palacios IF.Mucrophage infiltration in acute coronary syndromes[J].Circulation,1994,90:775.