南蛇藤根皮的化学成分研究

刘惠玲， 冯玉静， 陈定双， 王定勇*

（1.广东省中医院药学部，广东广州510120；2.广东药学院药科学院，广东广州 510006）

南蛇藤根皮的化学成分研究

刘惠玲1， 冯玉静2， 陈定双1， 王定勇2*

（1.广东省中医院药学部，广东广州510120；2.广东药学院药科学院，广东广州 510006）

南蛇藤；化学成分；扁蒴藤素

目的：对卫矛科南蛇藤属植物南蛇藤的根皮进行化学成分研究。方法：用乙醇冷浸提取南蛇藤根，得到的萃取物减压回收，得到的干浸膏分别用石油醚和乙酸乙酯萃取。两萃取物再采用色谱法进行分离，波谱法鉴定结构。结果：从该植物中共分离鉴定出7个化合物，从石油醚萃取物中得到5个化合物分别是12-羟基-8，11，13-松香烷三烯-7-酮（1）、扁蒴藤素（2）、β-谷甾醇（3）、雷公藤红素（4）、大子五层龙酸（5）；从乙酸乙酯萃取物得到2个化合物，分别为苯甲酸（6）、胡萝卜苷（7）。结论：化合物1、5均为首次从该植物中分离得到。

南蛇藤（Celastrus orbiculatus Thunb.），又名过山风、降龙草等，卫矛科南蛇藤属植物，为藤状灌木。该植物生于山谷溪边灌丛或林边，在我国分布广泛，除青海和新疆未见记载外，其他地区均有分布。全草均可入药，有清热、除湿、活血、消肿等功效，常用于治疗风湿性关节炎、腰腿痛、筋骨痛、牙痛、闭经、痢疾、跌打损伤、肠风痔漏、毒蛇咬伤、疮疡、痈疖等症［1］。

自1949年首次从南蛇藤叶中提取分离到黄酮苷类化合物以来，又陆续从其种子、根皮、叶及地上部分分离到多种成分，主要有β-二氢沉香呋喃倍半萜多醇酯和生物碱，此外还有三萜类、黄酮类、有机酸类、多元醇类、甾体类及鞣质［1］。为开发此种植物资源和比较不同产地南蛇藤化学成分的差异性，我们对采自广东省阳春市的南蛇藤的化学成分进行初步研究，从该植物的乙醇提取物中分离鉴定出7种化合物，分别是12-羟基-8，11，13-松香烷三烯-7-酮（1）、扁蒴藤素（2）、β-谷甾醇（3）、雷公藤红素（4）、大子五层龙酸（5）、苯甲酸（6）、胡萝卜苷（7）。化学结构式见图1，化合物1、5为首次从该植物中分离得到。

1 植物来源及仪器

图1 化合物1～7的结构

南蛇藤根皮于2007年10月采自广东阳春市，由广东药学院中药学院李书渊教授鉴定为南蛇藤（Celastrus orbiculatus Thunb.）的根皮。

X-6显微熔点测定仪（北京泰克仪器有限公司，温度未校正；红外光谱用Nicolet PROTÉGÉ460光谱仪（美国尼高力公司产品）测定，KBr压片；核磁共振用Bruker AM-500或400型核磁共振仪（瑞士布鲁克公司产品）测定，TMS为内标；ESIMS在 HP—1100 LC/MS（美国惠普公司产品）上测定。柱色谱用及薄层色谱用硅胶为青岛海洋化工厂生产。予华SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市英峪予华仪器厂）；DHW－420三用电热恒温水箱（北京国华医疗器械厂）；DHG－9145A型电热恒温鼓风干燥箱（上海一恒科技有限公司）；SB－5200超声波清洗机（上海新芝生物技术研究所）；RE－52C旋转蒸发器（巩义市英峪予华仪器厂）；AY 220 SHIMADZU（岛津托盘电子分析天平）。

2 提取与分离

取干燥的南蛇藤根皮268.5 g，分别用10、8倍量的70%乙醇冷浸提取两次，每次8 d，合并滤液并减压浓缩回收乙醇至无醇味，浓缩至约100 mL左右，加少量甲醇，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，分别得到石油醚（15 g）、乙酸乙酯（27 g）的萃取物，将各部位低温减压浓缩、回收溶剂至浸膏状。

石油醚部位（15 g），经硅胶柱层析（100～200目），用石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱，同时配合重结晶和制备薄层层析技术，分别获得化合物1～5。

乙酸乙酯部位（27 g）经硅胶柱层析（100～200目），用石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱，分别获得化合物 6、7。

3 结构鉴定

化合物1 白色针晶（石油醚-乙酸乙酯），mp 278～280 ℃，ESI-MS（+）m/z 323［M+Na］+，623 ［2M+Na］+，1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δ 7.91（1H，s，H-14），6.70（1H，s，H-11），5.62（1H，s，-OH），3.15（1H，m，H-15），2.55 ～2.72（2H，m，H-5，6a），2.20（1H，d，J=12.4 Hz，H-6b），1.47～1.87（6H，m，H-1，2，3），1.25（3H，d，J=7.6 Hz，H-16），1.27（3H，d，J=7.6 Hz，H-17），1.21（3H，s，H-20），0.92（3H，s，H-18），0.98（3H，s，H-19）。化合物1的氢谱数据与12-羟基-8，11，13-松香烷三烯-7-酮（sugiol）基本一致［2］。

化合物2 橙红色针状结晶（石油醚-乙酸乙酯），mp 219 ～ 220 ℃，IR νmaxKBr cm－1：3 350，2 940，1 725，1 650，1 590，1 520，1 435，1 375，1 300，1 245，1 220，1 205，1 185，1 155，1 145，1 095，1 085，990，870，860，850。ESI-MS（+）：487 ［M+Na］+，465［M+H］+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：δ 7.02（1H，d，J=7.1 Hz，H-6），6.52（1H，s，H-1），6.34（1H，d，J=7.1 Hz，H-7），6.96（1H，brs，-OH），3.52（3H，s，H-31），2.23（3H，s，H-23），1.45（3H，s，H-25），1.25（3H，s，H-26），1.17（3H，s，H-30），1.08（3H，s，H-28），0.52（3H，s，H-27）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：δ 119.5（C-1），178.2（C-2），146.0（C-3），117.2（C-4），127.4（C-5），134.2（C-6），118.1（C-7），170.3（C-8），43.0（C-9），164.8（C-10），33.5（C-11），29.6（C-12），39.4（C-13），45.0（C-14），28.6（C-15），36.4（C-16），30.5（C-17），44.3（C-18），30.9（C-19），40.4（C-20），29.9（C-21），34.8（C-22），10.2（C-23），38.2（C-25），21.6（C-26），18.3（C-27），31.6（C-28），178.7（C-29），32.7（C-30），51.5（C-31）。化合物2的波谱数据与扁蒴藤素（pristimerin）的波谱数据［1，3］基本一致。

化合物3 白色晶体，mp 137～138℃，在紫外灯下（254 nm）不显色，硫酸显色为红色，多种溶剂系统TLC的Rf值与β-谷甾醇标准品一致，鉴定为β-谷甾醇。

化合物4 红色晶体，mp 200～202℃，ESI-MS（+）m/z 473［M+Na］+，451［M+H］+，1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：δ 7.06（1H，dd，J=7.0，1.0 Hz，H-6），6.49（1H，d，J=1.0 Hz，H-1），6.32（1H，d，J=7.0 Hz，H-7），2.20（3H，s，H-23），1.42（3H，s，H-25），1.27（3H，s，H-26），1.26（3H，s，H-30），1.08（3H，s，H-28），0.57（3H，s，H-27）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：120.5（C-1），178.3（C-2），120.3（C-3），127.5（C-4），147.0（C-5），135.3（C-6），118.2（C-7），165.0（C-8），39.9（C-9），172.6（C-10），28.7（C-11），29.3（C-12），39.3（C-13），43.0（C-14），29.5（C-15），32.4（C-16），45.3（C-17），44.3（C-18），33.8（C-19），31.1（C-20），34.4（C-21），36.3（C-22），10.5（C-23），38.4（C-25），21.5（C-26），18.7（C-27），31.5（C-28），182.5（C-29），30.7（C-30）。化合物4的波谱数据与雷公藤红素（celastrol）［1，4］的波谱数据基本一致。

化合物5 无色针晶（甲醇），mp 328～330℃，ESI-MS（+）m/z 495［M+Na］+，511［M+K］+，1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δ 1.10（3H，s）、1.04（3H，s）、0.90（3H，s）、0.89（3H，s）、0.82（3H，s），0.80（3H，d，J=4.8 Hz，H-23），12.06（1H，s，COOH）、5.61（1H，s，3-OH），3.93（1H，d，J=8.0 Hz，H-24a）、3.40（1H，d，J=8.0 Hz，H-24b）。13CNMR（100 MHz，CDCl3）：δ20.3（C-1），38.9（C-2），106.2（C-3），53.9（C-4），47.5（C-5），34.3（C-6），19.5（C-7），50.6（C-8），37.9（C-9），57.6（C-10），34.8（C-11），29.9（C-12），39.8（C-13），39.5（C-14），29.8（C-15），36.5（C-16），30.7（C-17），44.8（C-18），30.8（C-19），40.9（C-20），30.5（C-21），37.6（C-22），8.6（C-23），73.2（C-24），17.1（C-25），16.8（C-26），18.3（C-27），32.3（C-28），181.6（C-29），31.6（C-30）。化合物5的波谱数据与大子五层龙酸［5］基本一致。

化合物6 无色片状结晶，mp 122～123℃。多种溶剂系统TLC的Rf值与标准品苯甲酸一致，混合熔点不下降，因此鉴定为苯甲酸。

化合物7 白色粉末，在紫外灯下（254 nm）不显色，mp 273～275℃。多种溶剂系统TLC的Rf值与标准品胡萝卜苷一致，混合熔点不下降，因此鉴定为胡萝卜苷。

4 结果与讨论

4.1 醌甲基三萜类化合物是一类具有特征的红色或橙红色结晶的化合物，主要存在于卫矛科（Celastraceae）和希藤科（Hippocrateaceae）植物中，且具有广泛的药理活性，如抗肿瘤、抗微生物、抗氧化、细胞毒性和抗疟疾活性等［6］。本论文中分离得到的扁蒴藤素和雷公藤红素即是两种醌甲基三萜类化合物，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种活性，并且分别在2006年［7］和2008年［8］被证实可通过抑制蛋白酶体活性而发挥抗肿瘤作用，是新型的蛋白酶体抑制剂，成为目前抗肿瘤研究中的热点之一。

4.2 现代药理学实验表明，南蛇藤具有抗肿瘤、抗炎、抗AIDS、抗生育、昆虫拒食及毒杀等多种活性。本论文中分离得到的化合物也多具有多种药理活性，两个醌甲基三萜类化合物如4.2项下所讨论，其他分离得到的化合物分别具有如下活性：化合物1具有抗炎活性［9］，化合物 5 具有抗 AIDS活性［10］。另外，南蛇藤素还被证实可抑制豚鼠体外精子的受精能力，发挥抗生育作用［11］。昆虫拒食及毒杀活性主要由β-二氢沉香呋喃倍半萜类化合物体现出来，本论文中未分离得到该类化合物，可能与药材产地不同有关系。

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Chemical constituents of the bark of Celastrus orbiculatus

LIU Hui-ling1， FENG Yu-jing2， CHEN Ding-shuang1， WANG Ding-yong2*

（1.Department of Pharmacy，Guangdong Provincial Hospital of TCM，Guangzhou 510120，Guangdong，China；2.College of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，Guangdong，China）

Celastrus orbiculatus Thunb.；chemical constituents；pristimerin

AIM：To study the chemical constitutes of Celastrus orbiculatus Thunb.METHODS：Root of celastmus orbiculatus was macerated with cool ethanol to obtain the extract under the vaccum drying processing，extract obtained was extracted respectively by petroleum ester and ethyl acetate.Final extracts were purified by Silicagel column and analyzed by UV，IR，Ms and NMR to identify the chemical structural formula.RESULTS：Seven compounds were isolated from Celastrus orbiculatus Thunb，from which five constituents came from petroleum ester extract，and identified as sugiol（1），pristimerin（2），β-sitosterol（3），celastrol（4），from which two constituents came from ethyl acetate extract，salapermic acid（5），benzoic acid（6）and daucosterol（7），respectively.CONCLUSION：Compounds 1，5 were obtained from the plant for the first time.

R284.1

A

1001-1528（2010）07-1169-04

2009-10-16

刘惠玲（1978－），女，中药师，主要从事医院药学研究。Tel：13533398857 E-mail：hlingliu@163.com

*通讯作者：王定勇（1967－），男，博士，教授，主要从事天然药物研究与新药研发。Tel：13112243919 E-mail：wdingyong@163.com