骨髓细胞染色体核型分析在恶性血液病中的应用研究

吴敏华 容伯芬 陈妙婵

恶性血液病是造血干细胞的克隆性疾病，染色体畸变则是恶性血液病的克隆标记。越来越多的研究表明，骨髓染色体核型分析对恶性血液病的治疗选择、预后估计以及发病机制的探讨都有很大的价值，笔者对我院63例恶性血液病患者进行骨髓细胞染色体核型分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 病例资料 2008年10月～2009年12月来我院就诊的恶性血液病患者共63例，其中男36例，女27例，年龄17～61岁。

1.2 方法 抽取血液病患者骨髓，骨髓抽取量应视外周血白细胞计数而定。采用短期培养法将骨髓经有核细胞计数按一定的细胞密度[(1～3)×106/ml]接种到培养基内，经过24h培养后收获细胞制片。制片后进行热处理姬姆萨R显带，再用Giemse液染色。分析20～25中期分裂相。先用低倍镜寻找合适的分裂相，再换用油镜进行观察。油镜下观察一个分裂相时，先计数染色体数目，确定数目有无异常，然后逐条审视其核型，以检出结构异常。核型分析参照《人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN)(1995)》的有关规定进行核型分析[1]。

2 结果

63例恶性血液病中骨髓染色体核型结果异常有29例，阳性率为46%。其中11例慢性粒细胞白血病(CML)患者有10例核型带有费城染色体(PH)。在急性粒细胞白血病(AML)中原粒细胞白血病部份分化型(M2)核型异常有8例，早幼粒细胞白血病(M3)有7例异常。慢性淋巴细胞白血病(CLL)1例异常。其他恶性血液病中异常的有：骨髓异常增生综合征(MDS)2例，骨髓纤维化(MF)1例。核型结构异常分析结果见表1。

表1 骨髓染色体核型异常分析结果

3 讨论

虽然多数CML患者有较为典型的临床及血液学表现，但最终确诊还是依赖于发现特征性Ph染色体。Ph染色体作为CML的细胞遗传学特征性标记具有特殊意义。Ph+CML患者出现新的额外异常染色体，病情多难以控制，Ph+CML额外染色体的出现预示着预后不良[2]。在急性粒细胞白血病中，90%的M2B型白血病细胞可发现特异的染色体易位t(8:21)(q22:q22)，这种白血病细胞有一定的分化能力，对化疗反应较好。约85%的AML-M3包括多颗粒和微颗粒型均可检出t(15;17)，因而成为该型白血病高度特异性的细胞遗传学标志[3]。临床上凡具有t(15;17)易位对维甲酸和坤剂治疗有效，反之则无效[4]。MDS作为恶性克隆性疾病，染色体改变在疾病的发生、发展中发挥着重要作用。大约40%～70%的MDS有克隆性染色体畸变[5]，研究发现，随着克隆性染色体异常核型的出现和数量的增多，MDS患者出现白血病转化率增高、白血病转化时间缩短、病死率增高、生存时间缩短的趋势[6]。CLL患者核型很少发生演变，一旦发生则往往提示预后不良。骨髓纤维化核型异常演变意味着向白血病转化。

总之，血液系统中染色体核型改变具有独特的诊断意义，可作为监测急性白血病缓解、复发和CML急变的指标，同时有助于发现预后差的克隆性异常，能及时提醒临床医生寻找更有效的化疗方案，进行骨髓移植或免疫治疗。

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