咽喉消炎喷雾剂的制备工艺优选及质量标准研究＊

张 霞，陈迎平

（江苏省盐城市第一人民医院，江苏 盐城 224002）

我院制剂室根据中医药基础理论，以清热利咽、滋阴润燥为治则，采用纯中药制成咽喉消炎喷雾剂，将药物直接喷雾于咽部而在局部发挥作用，对慢性咽炎的临床疗效较好。现将其工艺条件优选和质量控制标准的研究报道如下。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪（美国Beckman公司），包括126双流泵，167可变紫外检测器；IBM AT电脑；1/100 000电子分析天平（美国Denvor）。甲醇为色谱纯，重蒸馏水，其他试剂（分析纯）；哈巴俄苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为11730－200501），其他药材（盐城市中药饮片厂）。

2 方法与结果

2.1 处方

生地150 g，玄参150 g，紫菀100 g，木蝴蝶15 g，知母150 g，射干50 g，生甘草50 g，薄荷300 g，冰片5 g。

2.2 制备工艺优选

2.2.1 因素水平选择

该制剂是先将药材（冰片、薄荷油除外）采用水煎醇沉工艺，得浓缩液，再与冰片、薄荷油混匀，加水而成。从影响方中玄参的哈巴俄苷含量因素考虑，将提取工艺归纳为提取时间（因素A）、加水倍数（因素B）、第2次加醇量（因素C）、放置条件（因素D）4个因素，设计3个水平，见表1。

表1 因素水平表

2.2.2 正交试验设计及结果

哈巴俄苷是方中主药之一玄参的重要药效成分，故以玄参中哈巴俄苷的含量为考察指标进行评价。选用L9（3）4正交法进行试验。正交试验结果及方差分析见表2及表3。

2.2.3 正交试验结果分析

从表2数据直观分析，不同因素水平综合评分A3＞A2＞A1，B1＞B2＞B3，C1＞C2＞C3，D2＞D3＞D1，根据因素极差大小排列出因素影响的主次顺序为C，D，A，B，故最佳制备工艺为A3B1C1D2。方差分析结果提示，因素C和因素D对哈巴俄苷含量有高度显著性影响，因素A对哈巴俄苷含量有一定的显著性影响，综合考虑，最佳提取工艺为A3B1C1D2，与直观分析结果一致。

2.2.4 最佳制备工艺确定

结合生产实际，优选出咽喉消炎喷雾剂的最佳制备工艺：即取玄参等药材（冰片除外），置多功能提取罐中加水（10倍量）浸过液面，浸泡1h，煎煮3次（1.5h，1h，40min），第2次、第3次煎煮加水5倍量，收集薄荷蒸馏液另放，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩至约含生药1 g/mL，冷却，加3倍量95％乙醇，放置过夜，吸取上清液回收乙醇并浓缩到含生药2 g/mL，冷置过夜。上清液再加3倍量95％乙醇，放置过夜，上清液回收乙醇并浓缩到含生药4 g/mL，与薄荷蒸馏液合并，过滤，滤液中添加研溶后的冰片、苯甲酸钠及蒸馏水至全量，即得含生药2 g/mL。灌装，即得。

表2 正交试验设计结果

表3 试验结果方差分析表

2.3 质量标准研究

2.3.1 薄层色谱鉴别

玄参：取本品10mL，加甲醇20mL，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL，使溶解，过滤，滤液作为供试品溶液。另取玄参对照药材4 g，加水70 mL，煎煮30min，滤过，滤液浓缩至10mL后，同法制成对照药材溶液。硅胶G自制板，厚度约200～300μm。吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μL，以乙酸乙酯－乙醇（无水）－水（4∶1∶0.6）为展开剂，预平衡30min，展开，喷以1％香草醛乙醇溶液与3％高氯酸水溶液的混合溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同的暗紫色斑点。

冰片[1]：取本品2mL，置蒸发皿中，上盖玻璃表面皿，在水浴上加热后，玻璃表面皿上附有少许的升华物，用1mL乙醇溶解，作为供试品溶液。另取冰片对照品，加乙醇制成3 g/L的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60→90）－醋酸乙酯（8∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛的硫酸乙醇溶液，105℃烘烤至斑点清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的两个斑点。

生地：取样品10mL，加甲醇20mL，置水浴回流加热1h，放冷滤过，滤液回收乙醇至5mL，作为供试品溶液。另取生地药材2 g，同法制成对照药材溶液。分别吸取上述2种溶液，点于同一硅胶G板上，以氯仿－甲醇－水（14∶6∶1）为展开剂，展距12 cm，取出，晾干，喷以茴香醛试剂，105℃烘约5min，日光下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同的黄色斑点。

2.3.2 检查

相对密度应不低于1.08。pH应为3.5～5.5。

2.3.3 含量测定（高效液相色谱法）

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇－1％冰醋酸（60∶40）为流动相，检测波长为278 nm。理论板数按哈巴俄苷峰计算应不低于6 000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

溶液制备：精密称取于40℃减压干燥12h的哈巴俄苷对照品适量，用30％甲醇溶液，制成每1mL含0.03mg的溶液，即得对照品溶液。精密量取装量项下的本品5 mL，置25mL量瓶中，用30％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

样品含量测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪进行测定。结果批号为040511，040712， 040813，040922，041010的5批咽喉消炎喷雾剂（每瓶60mL）中含玄参以哈巴俄苷（C24H30011）计的含量分别为11.50，12.60，10.80，12.00，11.80mg/瓶。根据含量测定结果，结合生产实际，规定咽喉消炎喷雾剂（每瓶60mL）中含玄参以哈巴俄苷（C24H30011）计，每瓶不得少于9mg。

3 讨论

慢性咽炎相当于中医的虚火喉痹、阴虚痰凝型。咽喉消炎喷雾剂针对咽喉临床证候，采用生地、知母、玄参、甘草清热解毒、滋阴降火、生津、活血、利咽，再以射干、紫菀消肿化痰，木蝴蝶疏肝理气、消肺开音，配以中药冰片、薄荷，故具有清热止痛、消肿消炎、防腐生肌、清咽润喉之功效；采用喷雾法，将药液直接喷于咽喉部口腔溃疡处，能快速发挥药效，改善病症。玄参是方中君药，其中含量较高的哈巴俄苷具有抗慢性炎症、降压、镇痛、解痉、抗乙型肝炎病毒以及免疫促进作用，最近又发现其与滋阴功效密切相关[2]。因此认为，哈巴俄苷是玄参的特征性有效成分，可确定其为本制备工艺的指标成分。

[1]孟宪纾，陈发圭.中成药分析[M].北京：人民卫生出版社，1990：488.

[2]王建华，谢丽华，刘洪宇，等.玄参不同加工品中哈巴俄苷与肉桂酸的HPLC含量测定[J].中国药学杂志，2000，35（6）：375－378.