3种车前草穗中总黄酮含量的测定

2010-04-03，，

长春中医药大学学报 2010年3期

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(1.滨州医学院，山东烟台 264003；2.中国农业大学烟台研究院，山东烟台 264003)

车前草是车前科车前属植物，又称车前菜、牛舌草、车轮菜、猪耳草等。车前全身是宝，嫩可食用，成可入药。车前作为一味常用中药，始载于《神农本草经》，列为上品，被国家卫生部列入可用于保健品生产的原料名单。车前味甘、寒，无毒，具有清热解毒、祛痰、止咳、利尿等作用，主气癃止痛，利水通小便，除湿痹，久服轻身耐老。现代药理研究表明，车前全草中主要有效成分为乌苏酸、车前苷、环烯醚苷类、黄酮类成分[1-4]。其中黄酮类化合物为镇咳主要成分，车前草中的黄酮及其苷类对呼吸系统有着明显的作用[5]。车前苷作用于呼吸中枢,具有明显的镇咳作用，通过兴奋分泌神经可促进气管、支气管液及消化液的分泌，且无溶血作用。苯乙酰咖啡酰糖酯类化合物能够抑制环腺苷酸磷酸二酯酶与5-脂氧合酶,说明总黄酮类物质是车前镇咳抗炎活性的主要物质基础[6-9]。车前科植物有3属约260种。而我国仅有车前属1属,13种[10]。目前开发用于药用的主要是车前(plantagoasiaticalL.)、平车前(PlantagodepresaaWilld.)和大车前(PlantagomajorL.)[11]。但是在不同植物体内，总黄酮的含量可能不同，这对于药材的采集及中药有效成分的提取都具有至关重要的关系[12]。因此本文选取车前、平车前和大车前为供试材料,通过对3种车前穗中总黄酮含量的比较研究，为中药有效成分提取及车前草的开发利用提供基础理论依据。

1 材料与仪器

722型分光光度计(上海分析仪器厂),试剂标准品芦丁为国药集团化学试剂有限公司生产。所用试剂均为分析纯，所用水为蒸馏水。所用车前，7月采集于本地，自然晾干,待用。

2 方法与结果

2.1 总黄酮的提取[13]分别精密称取大车前、车前和平车前穗各1 g于索氏提取器中，加入70%的乙醇100 mL及少许CaCO3，提取8 h，提取液减压浓缩蒸去乙醇。浓缩液于分液漏斗中用相同体积的乙醚洗2～3次，以除叶绿素及腊质等，然后用70%的乙醇定容至100 mL，待测。

2.2 绘制标准曲线[13]精密称取芦丁10 mg，用70%的乙醇溶解并定容至100 mL，使其浓度为100 μg/mL。将芦丁溶液用70%的乙醇稀释成0，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100 μg/mL，各取1 mL于试管中，加70%的乙醇1 mL，加入300 μL 5%的NaNO2，6 min后加入300 μL 10%的Al(NO3)3溶液，6 min后再加入2 mL 4% NaOH，10 min后于分光光度计波长510 nm处测定A值。绘制浓度CA标准曲线。

2.3 总黄酮含量的测定[13]取经稀释过的样品溶液各1 mL，按上述同样的步骤和方法测定得A值，从标准曲线查得样品中总黄酮的含量(μg/mL),计算每克干物质中总黄酮含量(μg/g)，测得大车前、车前和平车前干穗中总黄酮含量分别为65 415.4，9 913.6，1 145.3 μg/g。

2.4 精密度试验精密吸取芦丁对照品溶液2.0 mL，按2.2项下方法连续测定6次，测定其吸收度后RSD=0.32 %(n=6)。表明仪器精密度良好。