Sysmex KX-21血液分析系统校准周期的建立及其应用

李剑珉，颜 箫，李南华，涂永红

(1、江西寄生虫病防治研究所，江西 南昌 330046；2、江西特康科技有限公司)

校准(Calibration)是指“在规定条件下，为确定测量仪器或测量系统所指示的量值，或实物量具或参考物质所代表的量值，与对应的由标准所复现的量值之间关系的一组操作。是指建立分析物的浓度或活性与检测方法/检测系统间相应关系的过程[1]，相当于确定了用来丈量物体的尺子的长度。”因此，分析系统的校准是保证病人检测结果可靠的基础。全血细胞分析项目5项，试剂种类为溶血剂、稀释液两种。暴露在空气中的血液分析仪使用试剂，因水分蒸发造成有效组分浓缩，也会影响测定结果。卫生部临床检验中心已实施我国血细胞分析参考系统的建立[2]工作。本文就血细胞分析系统校准周期进行探讨，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

日本Sysmex公司生产的KX-21型全自动血液分析仪，具有定期自动清洗与保养功能；校准物为Sysmex SCS-1000血液校准品，批号：990662。遵循《血液分析仪校准要求》，对KX-21血液分析仪校准允许偏差符合 WBC±15%、RBC±5%、Hb±5%、Hct±5%、Plt±15%。伯乐质控品为美国Bio-Rad公司生产的LiquichekTMHematology Control中值水平血液学-21参数控制品，批号：Normal-99122。血液分析仪试剂：KX-21血液分析仪使用特康科技生产的“雪球”牌配套试剂，溶血剂、稀释液批号分别为：1001002、1002010，供全血质控品作血细胞分析系统校准周期测试试验；另取五个批次生产留样试剂稀释液/溶血剂 ：LOT-1 (0809001/0809004)、LOT-2(0902001/0905002)、LOT-3(0910005/0910005)、LOT-4(1001002/1002010)，LOT-5(1004002/1004005)分 别 对 同 一 全血质控品进行测试。

1.2 所检测的项目

仪 器 测 定 项 目 WBC、Lymph#、Mid#、Gran#、RBC、HGB、MCV(HCT)、PLT 八项指标，使用软件计算 参 数 为 ：Lymph% 、Mid% 、Gran% 、MCH、MCHC、RDW、MPV等。

1.3 方法

1.3 .1全血质控品参考值范围：伯乐中值水平质控品参考值范围：WBC、RBC、HGB、MCV、PLT 等指标分别为 10.1±0.6×109/L、4.12±0.2×1012/L、128±4.0g/L、94±6fl、273±30×109/L。

1.3 .2首次检测试验按说明书要求对血液分析仪进行保养和宝石孔清洗，更换试剂后，参照血液分析仪校准规范化的建议[3]，用全血校准品对KX-21血液分析仪进行校准[4]，，每间隔5d(120h)检测同一批质控品，重复检测3次取均值统计分析；美国CLIA’88对血细胞分析的质量要求为：WBC：靶值±15%、RBC 和 MCV 是：靶值±6%、HGB：靶值±7%、PLT：靶值±25%，以累积CV小于CLIA’88允许误差的1/3作为评价标准[5]，连续监测6个月。从校准完毕后开始计时，至累积CV大于1/3 CLIA’88允许误差时结束，此间隔时间作为该项目的校准周期。

2 结果

同批号稀释液、溶血剂在Sysmex公司生产的KX-21血液分析仪上检测结果归纳如下：

2.1 WBC、RBC、HGB、MCV、PLT 等五项测量指标监测到151d(33次测试)仍然处于允许值范围，其x、SD及CV见表1。

表1 中值水平质控品监测结果

2.2 监测到111d Mid%为1.1%首次超出允许范围，往后在允许值范围上下波动，至161d后均处于允许值范围之外。

2.3 监测到165d PLT测定值为309×109/L首次超出允许范围，往后5次测试又处于正常范围，至181d后超出允许值范围。

2.4 HGB超出允许值范围的时间是181d，WBC和RBC监测到191d才超出允许值范围，而MCV监测到191d仍然处于规定要求。

2.5 各项目判断标准及校准周期见表2。使用不同批次的稀释液、溶血剂，用同一全血质控品分别在KX-21血液分析仪上检测结果见表3。

表2 各参数判断标准及校准周期

表3 不同批次试剂检测结果

3 讨论

3.1 实验前对KX-21血液分析仪进行校准，其各项指标百分数误差均在一列范围以内[6]，外部校准系数：HGB为100.0、HCT为100.0，内部系数WBC为 98.9、RBC 为 100.0、HGB 为 99.3、PLT 为 98.0等。拥有自动清洗与定期保养功能的血液分析仪定期校准周期较长。

3.2 从表 1可以看出，Mid%不稳定，CV值21.48%，其余指标重复测试结果稳定性好；表2结果显示，血液分析仪校准周期较长，白细胞分类校准周期最短，RBC、MCV校准周期较长，大于191d。从表3结果表明，更换不同批次的试剂其检测结果未发现超出规定范围。值得提醒的是：由于试剂的批间差，可能会导致相关指标出现偏离质控范围，溶血剂影响HGB、白细胞及其分类，稀释液影响MCV或HCT。所以，在确立检测系统的校准周期时，一定要分析各种影响校准周期的因素，选择合适的校准时机。

3.3 影响血细胞分析系统校准周期的因素有：

3.3 .1不同批次的试剂：溶血剂与稀释液有效组分浓度改变，如溶血表面活性剂、与HGB相结合的成分、渗透压等会导致白细胞分类、HGB、MCV等指标的变化；试剂pH明显改变也会引起白细胞分类、HGB、MCV等指标不同程度的变化。

3.3 .2仪器保养与维护的频次：一般而言血液分析仪均具备自动清洗与定期保养功能，Sysmex公司生产的KX-21血液分析仪开机时将自动进行清洗，关机时用浓缩清洗液自动清洗与保养，起到清洗计数池、宝石孔与管道的效果，防止赌孔发生，起到延长校准周期的作用。

3.3.3比色光源的使用寿命：使用540±2nm波长的发光二极管其实际寿命一般为50000h，供电电压不稳定有一定影响，受温度影响较小。

3.3 .4 关键部件的更换或维修：如光源、宝石孔、分血阀、吸样针、真空泵、试剂或样品管道等部件的更换或维修需要重新校准。

3.3 .5仪器本身的漂移或寿命：仪器机械部件的磨损，电子元器件与管道系统的老化，直接影响仪器的使用寿命或性能指标的漂移，一般血液分析仪使用寿命为5~8年，其使用寿命又受使用频率和样本量的影响。

3.3 .6校准周期受仪器性能的影响：血液分析仪即使满足YY/T0653-2008血液分析仪标准，不同档次的仪器也有一定差异，尤其是PLT重复性指标小于8.0%，接近CLIA’88的1/3，所以，本次实验监测到PLT156d超出范围后，又回复到正常。意味着到了校准时期。

3.4 本次监测MCV较为稳定，直到191d仍然处于允许值范围，可能是由于质控品红细胞进行适当处理的原因，其形态相对稳定。

3.5 由于KX-21血液分析仪白细胞分群采用浮动界标，从表3可以看出Mid%106d就出现异常，往后又回复正常，至111d再次出现异常，表明浮动界标存在分类的不确定性。在实验监测过程中有时会出现不分类的现象；即使某项分类结果超出质控范围，也不主张轻易调整分类界标或改变白细胞增益。

3.6 如果采用低值或高值质控品，其校准周期可能前移或滞后，理由是根据CLIA’88允许误差，参考值越大允许值范围随之放大，检测值越不易超出规定范围，故选择中值质控品确立校准周期较为合适。至于低值或高值质控品确立校准周期实验有待进一步验证。

总之，血细胞分析系统校准周期受诸多因素影响，临床实验室有3个月、6个月甚至更长的校准时间；无例外的情况下，至少半年校准一次。确立血细胞分析系统校准周期既能节省检验工作的时间和成本，避免不必要的校准，又可保证检测结果的准确性。科学地建立校准周期、对检测系统进行定期校准，是保证血细胞分析结果可靠性的基本要求。必须指出的是：①血细胞分析系统监测到异常后，又可能回复正常；②不能忽视校准品或及质控品的质量对校准周期的影响；③当室内或室间质控信息出现异常的趋势或偏移，超出实验室质控规定的接受限，应分析原因，采取相应的预防纠正措施后，仍不能识别问题和纠正问题时，需重新进行校准[7]。因此，在做好“定期校准监测”工作的基础上，确立适宜、有效的校准周期，才不致于失控。

[1]黄亨建,宋昊岚,李 萍.检测系统的线性分析与校正验证[J].中华检验医学杂志,2006,29(6):562-564.

[2]彭明婷,谷小林,陆 红,等.我国血细胞分析参考系统的建立[J].中华检验医学杂志,2006,29(3):196-198.

[3]丛玉隆.血液学体液学检验与临床解疑[M].北京:人民军医出版社,2004:294-298.

[4]吴志勇,刘丙秀,崔 彬.Kx-21血球仪的校准[J].实用医技杂志,2003,10(5):20-21.

[5]冯仁丰.临床检验质量管理技术基础(第2版).上海:上海科学技术文献出版社,2007:81.

[6]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M](第3版).南京:东南大学出版社,2006:141.

[7]申子瑜.我国临床实验室质量管理的基本要求[J].中华检验医学杂志,2003,26(11):700-701.