防治家蚕细菌病药物的筛选

张安启 王瑞松 房启祥 陈春平 何在启 陈日林 刘发余

（①山东省莒县畜牧兽医局 276500 ②山东省莒县蚕药厂）

为筛选出防治家蚕细菌病的理想药物，依据正在使用、相对较新、杀菌广普、适用于口服、价格相对低廉、与传统防治药物有一定的衍生关系等原则，从人用药和兽用药品种中定性选择出了盐酸环丙沙星、诺氟沙星、红霉素、氟苯尼考等药物。在此基础上，进行了目的药物的筛选试验。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供试蚕种 9202×鲁七，青州蚕种场生产。

1.1.2 供试病原 山东农业大学蚕病室继代培养，主要种类是黑胸败血菌和灵杆败血菌。

1.1.3 供试药物 盐酸环丙水洗星、诺氟沙星、恩诺沙星、红霉素均为市售原粉。

1.1.4 培养基成分 牛肉膏3g、蛋白冻10g、NaCI5g、琼脂15g、定容1L、pH=7.5。

1.2 试验方法

1.2.1 浓度设置 药敏试验药剂浓度为3%的原液，药效试验药剂浓度均为180mg/L。

1.2.2 试验设区 每个处理设3个重复，每个重复均为20头蚕。

1.2.3 体外抑菌试验方法（1）细菌准备：将培养好的细菌每管倒入20ml无菌水，将菌膜充分刮起后倒入三角瓶中，然后充分搅拌。（2）培养基的准备：将制好的培养基放入沸水中溶化，备用。（3）接种：在无菌条件下，吸取菌液分别放入已消毒的培养皿中，每个培养皿放入2ml菌液，然后将冷却后的培养基倒入培养皿中，用量以盖过培养皿底为佳，适当摇匀后，将直径6mm滤纸片放入已配好的药液中，滤纸片被药液浸透后，再放入相应浓度编号的培养皿中间，30℃下培养48h，观察抑菌圈大小。

1.2.4 药效试验方法（1）病菌接种：在无菌条件下用接种环刮取细菌，用昆虫针蘸取，从节间膜处穿刺，将病原接种于蚕体。（2）药物添食法：从4龄起蚕开始各处理每天添食1次相应的药物，到5龄第3天蚕儿接种细菌，后继续进行药物添食，直到毒对照蚕儿发病止，调查发病率。（3）发病调查方法：待毒对照蚕儿明显表现出病症时，用肉眼观察法调查各区蚕的发病情况。

2 药物的初选结果与分析

2.1 体外药敏试验（结果见表1）

从表1中可以看出，试验药剂对黑胸败血杆菌，灵杆菌均有抑制作用。在所有的药剂中氟苯尼考对黑胸杆菌和灵杆败血菌的抑制作用最好，抑菌圈直径分别是48.5mm、32.6mm。其抑菌效果明显好于其它药物，特别是对灵杆菌效果更明显。其次是盐酸环丙沙星，抑菌圈直径分别是42.7mm、7.6mm。

表1 治疗细菌药物筛选体外药敏试验(抑菌圈直径) (mm)

2.2 不同药剂药效对比试验（结果见表2）

从表2可以看出，3种药剂对黑胸败血病治疗效果均较好，但氟苯尼考效果最佳，发病率为0。比盐酸环丙沙星低12%，比氯霉素低9%。3种药剂对灵杆菌败血病治疗效果差别较大，氟苯尼考效果最佳，发病率为26%，而盐酸环丙沙星、氯霉素的治疗效果均较差、发病率分别为88%和64%，比氟苯尼考分别高62%和38%。

表2 治疗细菌病药物筛选药效试验(发病率) (%)

2.3 小结

经体外药敏试验和药效对比试验，氟苯尼考对黑胸败血病和灵菌败血病的治疗效果均比盐酸环丙沙星和氯霉素好，尤其对灵菌败血病的治疗效果最突出。

3 讨论

（1）长期以来，家蚕细菌病一直是影响蚕业生产的一重要因素。传统的做法是通过消毒和使用普通药物氯霉素。而消毒具有局限性，传统药物由于长期使用已产生抗药性，选择有效的抗菌药物已是蚕业生产的重要任务。

（2）最近几年，人用药和兽用药的发展速度很快，从人用药和兽用药中选择有效的抗菌药物，而且使之与传统防治药物有一定的衍生关系，这是治疗家蚕细菌性疾病行之有效的办法。

（3）科学试验的结果表明，氟苯尼考是治疗家蚕黑胸杆菌和灵杆败血菌病的有效药物。同时更加经济、更加安全地使用新的抗菌药物，也是今后研究的方向。