犬C-反应蛋白的研究进展

张海霞,夏兆飞

(中国农业大学动物医学院,北京海淀100193)

C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是犬的一种主要的急性期反应蛋白(acute phase protein,APP)。在机体受到炎症、感染和组织损伤等刺激时,促炎细胞因子IL-1、IL-6和 TNF-α会诱导肝脏合成CRP,其在24～48 h内可升高100～1 000倍[1],升高程度与组织的损伤程度有关。国外已经对犬CRP进行了大量的研究,国内还无相关报道。

1 CRP的生物化学特性

1.1 CRP的发现 1930年,Tillet和Francis发现一些急性期肺炎病人的血清能与肺炎链球菌的荚膜C-多糖发生沉淀反应,后来证实血清中引起沉淀反应的是一种蛋白质,即称为C-反应蛋白。1966年,Dillman&Coles首次发现了犬的CRP;1972年,Riley&Zontine分离出了犬的CRP[2]。

1.2 犬CRP的结构 CRP是一种环状正五聚蛋白,它是首个被发现的急性期反应蛋白。犬CRP的分子量约为100 kD,由5个亚单位组成,每个亚单位的分子量为20 kD,其中的2个亚单位是糖基化的[2-3]。

1.3 犬CRP的测定方法及影响因素 常用的测定犬CRP的方法有ELISA法、比浊免疫分析法、乳胶凝集法等,ELISA法的应用最为广泛。研究表明,一种以免疫色谱法为原理的快速测定法及以导磁率为基础的诊断方法,也可用于犬CRP水平的评估;时间分辨免疫荧光测定法也可用于测定全血、唾液、渗出液中的CRP水平[3]。

Mdas Kjelgaard-Hansen等研究发现,用于测定人CRP水平的商品化的比浊免疫分析法(2003)和反向乳胶凝集法(2008)可用于犬CRP的测定,但是,其他研究指出,犬的CRP与抗人的CRP抗体没有交叉反应性或反应性极弱,测定人CRP的方法不能用于测定犬CRP。

溶血、脂血和高胆红素血症都会影响CRP的测定结果,但是,升高的程度不会对结果的判读造成显著的影响[4]。

2 不同生理状况对犬CRP水平的影响

2.1 年龄、性别和品种 CRP的水平不受年龄和性别的影响。但是,年龄较大的犬在炎症状况下CRP水平的升高要更显著,在一个注射松节油或金黄色葡萄球菌的试验性研究中,3月龄和18月龄犬的CRP峰值要显著高于1月龄犬[3]。

灰猎犬的白细胞参考值比其他品种低,但其CRP水平与其他品种相比,却没有显著差异[5]。

2.2 妊娠和发情周期 犬在妊娠期的CRP水平显著升高,可能与胚胎植入、胎盘生长所引起的炎症反应及激素水平的改变有关。而犬的CRP水平与发情周期没有相关性,不能用于判断发情阶段[6]。

2.3 昼夜节律和日变化 成年健康犬的CRP水平不受昼夜节律和日变化的影响。某试验研究显示,在24 h内不同时间点采集血样,测定犬的CRP水平,没有发现显著的变化;在4周内的不同天采集血样,测定其CRP水平,也未发现显著的变化[3]。

2.4 肥胖和糖皮质激素 肥胖犬的CRP水平则比正常犬低,且CRP水平与胰岛素/葡萄糖比率和胆固醇水平呈负相关,由此结果可推断,在肥胖和胰岛素抵抗的犬,CRP的产生会受到抑制[7]。

糖皮质激素会引起正常犬白细胞象的变化,但不会影响CRP的水平。抗炎剂量和免疫抑制剂量的外源性糖皮质激素,均未引起CRP显著变化[8];肾上腺皮质机能亢进患犬的CRP水平没有显著改变,且肾上腺皮质机能亢进并发败血症患犬的CRP水平比单纯的败血症患犬的CRP水平低。以上结果说明,CRP不受糖皮质激素的影响,可以作为指示炎症的有效指标[9]。

3 不同疾病状况下犬CRP水平的变化

白细胞象的检测已成为兽医临床的常规检测项目。与白细胞象一样,CRP的特异性低,但其敏感性要比白细胞高的多,且反应速度比白细胞快。目前,已报道的可引起CRP水平升高的疾病有感染、炎症、手术创、免疫性疾病、肿瘤、胃肠道疾病等。

3.1 CRP与感染 试验诱导性或天然感染埃利希体、钩端螺旋体、利什曼体、支气管败血性博德特氏菌、细小病毒、锥虫等病原,均能引起CRP水平不同程度的升高,巴贝斯虫感染未引起CRP显著变化。

3.2 CRP与炎症 子宫蓄脓、急性胰腺炎、骨关节炎及试验诱导性炎症等炎性疾病均能引起CRP水平的变化。CRP水平还可用于辅助判断患子宫蓄脓的犬是否出现了全身性炎症反应综合征。

3.3 CRP与手术 切除病变组织的外科手术或常规生理手术(如绝育术、去势术),都会引起CRP水平升高,其升高程度与组织损伤程度有关。例如,与常规生理手术相比,矫形外科手术引起CRP升高的程度更为明显。另外,CRP水平还可用于监测是否出现并发症。无术后并发症,CRP水平在拆线时明显降低;而伴有术后并发症,CRP水平则不会降低,还会随着感染程度的加重而进一步升高。因此,CRP可作为监测术后并发症的有效指标。

3.4 CRP与免疫性疾病 自体免疫性溶血性贫血可引起CRP的显著变化,且治疗有效,CRP水平也会恢复正常。

3.5 CRP与肿瘤 在乳腺肿瘤,CRP不能用于判断肿瘤是良性的还是恶性的。具有转移性、肿瘤体直径较大(P＞5 cm)、溃烂或伴有炎症的肿瘤会引起CRP的显著升高[10]。淋巴肿瘤,包括多中心性淋巴瘤、急性成淋巴细胞性白血病、慢性成淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤均会引起CRP升高,多中心性淋巴瘤和急性成淋巴细胞性白血病对CRP的影响较为显著。因此,CRP升高时,应对淋巴肿瘤进行鉴别诊断。CRP是否能作为淋巴肿瘤的预后指标,还有待进一步研究[11]。

3.6 CRP与胃肠道疾病 试验诱导性的胃黏膜损伤会引起CRP的显著变化,CRP与胃窥镜可共同用于胃损伤的诊断和监测。炎性肠病可引起CRP的中度升高,CRP可用于判断疗效,其变化与临床症状的变化也有一定的相关性。其他肠道疾病,如细菌性肠炎、肠梗阻均可引起CRP变化。

4 展望

综上所述,CRP的测定方法限制了其在兽医临床的应用,ELISA法虽广泛用于各种相关研究中,但并不适用于临床。与白细胞相比,CRP的反应性更高,且受生理状况的影响更小,可用于辅助临床疾病的诊断,并可用于监控术后并发症、判断预后及监测治疗效果。目前,虽然已经做了大量的关于CRP研究,但是由于其特异性差,因此其与某些疾病(如内分泌疾病、心血管疾病、败血症、胰腺炎等)的诊断及预后的关系还有待进一步研究。

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