宠物犬和猫流感病毒感染

高玉伟，朱晓文，李 林，于志君，张钊伟，刘玉秀，夏咸柱

(军事医学科学院军事兽医研究所，吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，长春 130062)

宠物犬和猫流感病毒感染

高玉伟，朱晓文，李 林，于志君，张钊伟，刘玉秀，夏咸柱

(军事医学科学院军事兽医研究所，吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，长春 130062)

近十年来犬和猫流感病毒感染报道迅速增多，不仅威胁到犬和猫的健康，也对公共卫生造成了影响。自2004年首次发生H3N8亚型流感病毒感染赛犬事件以来，犬流感一直在美国的赛犬和宠物犬中流行。在韩国和我国南方的犬群中出现了因H3N2亚型禽流感感染引起的肺炎病例。亚洲和欧洲均报道了猫H5N1亚型高致病性禽流感致死性感染病例，还通过实验研究发现H5N1亚型流感病毒可在猫与猫之间水平传播。这些现象预示着流感病毒进一步获得了感染哺乳动物的能力，其公共卫生意义需引起关注。为此，本文对犬和猫流感病毒感染的流行病学、临床症状、发病机制、诊断和防控措施进行了综述。

宠物;犬;猫;流感病毒

近年来，A型流感病毒对犬和猫的感染引起了人们广泛的关注。上世纪七十年代的研究表明猫对流感病毒易感，但未发现自然感染病例，犬的感染则极少有报道。自2004年起情况发生了变化，犬和猫感染流感病毒病例报道增多。在美国，A型H3N8亚型流感病毒由马传到赛犬，并伴随严重的临床症状，还发现该病毒已传播到宠物犬中［1，2］。在韩国，A型H3N2亚型流感引起的犬呼吸道疾病已经有报道［3，4］，我国南方也发现了 H3N2亚型流感病毒对犬的感染。更重要的是出现A型H5N1亚型高致病性禽流感病毒对犬和猫的致死性感染［5，6］。人们担心流感病毒通过在哺乳动物宿主内的适应更容易获得感染人的能力。我国约有宠物犬约1.5亿只、猫5 000万只，这些动物类接触密切。流感病毒一旦获得在犬或猫群中持续传播的能力将对犬、猫的保健，特别是人类健康产生巨大影响。

1 流行病学

已发现马源H3N8、禽源H5N1和人源H3N2亚型流感病毒对犬的感染，禽源H5N1亚型流感病毒对猫的感染。此外，还发现多种亚型流感病毒可以通过人工接种的方式感染猫。

1.1 H3N8亚型流感病毒感染

鉴于H3N8亚型流感病毒对犬的感染持续存在并在犬群中流行，美国疾病控制中心确认其为“一种新出现的犬类病原微生物”并将其命名为“犬流感”。

2004年1月，在美国佛罗里达，22只比赛用灰猎犬发生了呼吸道疾病，其中8只死亡，死亡犬在临床上呈现出血性气管炎、支气管肺炎、胸膜炎和血管炎且伴随高热。另外14只犬表现为发热、咳嗽等中度的呼吸道症状。从死亡犬的肺组织匀浆中分离到H3N8亚型流感病毒，应用免疫组化检测方法在犬的呼吸道发现H3亚型阳性抗原颗粒。康复犬血清均对H3N8亚型流感病毒呈阳性。还发现与发病接触的临床健康犬50%抗体阳性。用从发病犬肺匀浆中分离的H3N8病毒人工接种健康犬后，可在接种犬呼吸道内检测到复制病毒，感染犬无明显临床症状，但可出现血清阳转。到2004年的夏季，美国有6个州出现病例，2005年上半年有11个州出现病例，且通过血清学调查表明H3N8病毒不仅感染比赛用灰猎犬，也可感染宠物犬。至2008年，美国有25个州出现了宠物犬感染病例。截止到2009年5月美国已有30个州发现犬流感的存在，发病场所多为宠物店和犬场等。对源自灰猎犬和宠物犬的H3N8亚型毒株的基因序列进行分析表明，这些犬源H3N8亚型流感病毒与上世纪90年代在美国流行的H3N8亚型马流感病毒亲缘关系极近。Crawford等认为是病毒在赛场内由马直接传播给犬［2］。血清学回顾性调查表明，跨种传播可能发生在1998～2003年之间。对犬 H3N8病毒的 HA和NA基因序列分析发现至少有3个氨基酸是犬源病毒特异性的，推测是这些氨基酸的适应性变异导致病毒在犬群中持续存在。另一方面，与人间流行的季节性流感病毒的变化规律不同，在犬群中流行的H3N8病毒尚未出现抗原漂移。在英国，通过对有肺炎症状犬的血清学、免疫组织化学和分子生物学检测也证实了H3N8亚型流感病毒对犬的感染。2002年，英国的一群猎狐犬表现出重症呼吸道症状，对康复犬的血清学检测表明存在H3N8抗体，这些犬在发病前一周曾饲喂过生马肉和内脏。

1.2 H3N2亚型流感病毒感染

2007年，在韩国，Song等从表现严重呼吸道症状的犬体内分离到禽源H3N2亚型流感病毒进而通过动物实验证实了病毒对犬的致病性［4，7］。我国李守军等人自2006起也发现在南方由H3N2亚型流感病毒引起的犬肺炎较为常见(未发表数据)。

1.3 H5N1亚型流感病毒感染

2004年亚洲高致病性禽流感疫情爆发时，在泰国的狗血清中检出H5N1亚型禽流感病毒抗体的存在，被检的629只犬中，有四分之一抗体阳性。2006年泰国的一只犬在吞食了禽流感感染鸭的生肉后发病，从病犬的体内分离到H5N1亚型禽流感病毒。通过人工感染实验，人们发现H5N1亚型流感病毒对犬的致病性可能存在毒株依赖性。分别用A/cat/Germany/R606/2006和A/chicken/GxLA/1204/2004两株H5N1亚型流感病毒感染犬时发现接毒犬血清抗体转阳，但除结膜炎和接毒后2 d内出现短暂的体温升高外，没有观察到明显临床症状。鼻腔短期排毒且低滴度或者没有检到感染的病毒［8］。但与之不同的是Chen Y等［9］以A/barheadedgoose/Qinghai/3/05人工感染犬后，犬出现厌食、发烧、结膜炎、呼吸急促和咳嗽等症状，病毒在上呼吸道和下呼吸道都有复制，且有一只犬发病死亡。这些结果说明，尽管存在毒株依赖性，但H5N1亚型禽流感病毒对犬是易感的，并且可能通过鼻腔向外排毒。一旦犬可以作为流感感染［6］的中间宿主，将对人类的健康构成重大威胁。

H5N1亚型禽流感病毒对猫科类动物的感染最早发现于2004年的泰国［6］，随后因高致病性禽流感疫情在多个国家蔓延，欧洲也发现了猫感染禽流感的案例。奥地利格拉茨附近的动物避难所发现3只猫感染H5N1亚型禽流感病毒，并且血清转阳。实验进一步证实从人病例分离出来的流感病毒对猫产生高致病性，并且可以在猫与猫之间传播［6］。猫科动物感染禽流感均是在当地的禽类禽流感疫情发生的时候，推测可能是由于猫科动物通过食入感染的鸟、天鹅、鹅、鸡或鸽子而被感染。

1.4 其他亚型流感病毒感染

甲型H1N1亚型流感人间大流行期间，我国农业部新闻办发布消息称:2009年11月25日，接到中国农业大学报告，该校动物医学院临床医院从52份发病犬鼻咽拭子样品中，检出两份样品呈甲型H1N1流感病原学阳性。基因序列分析表明，该病毒与当前人群中流行的病毒同源性为99%。此次狗感染甲型H1N1流感病毒，极有可能是由养狗或者与狗有密切接触的甲型H1N1流感病人传染。另外，在美国还发现了甲型 H1N1流感病毒对猫的感染［10］。

上世纪70年代前的血清调查结果表明很少在猫体内发现流感病毒抗体。已检测的流感病毒亚型包括H1－H8，其中只有 H3亚型抗体阳性，但鉴于当时的技术条件，尚不能确定检出的是特异性抗体还是因血清中的唾液酸类似物造成的非特异性抑制。应用人 H2N2、人 H3N2、海豹 H7N7流感病毒和禽H7N3接种猫后发现这些流感病毒可在猫呼吸道内复制并导致抗体阳转，但均不能引起临床症状。

2 临床症状

H3N8亚型流感病毒感染犬的临床特征与副流感病毒感染犬引起的“犬窝咳”极为相似。犬在感染后2～3 d出现临床症状，包括精神沉郁、食欲减退和流鼻涕。随着病程的发展，鼻涕由清亮逐渐转为粘液状。多数感染犬体温会升高，但呈低烧。持续性咳嗽是本病的一个最主要的特点，病犬的干咳可持续数周。大多数病犬会表现出肺炎或支气管肺炎并伴有异常肺音。值得注意的是约有1/4的犬感染病毒后不表现临床症状，但这些犬可向外界排毒。因此对有散发病例出现的犬群需要加强监测。

H5N1亚型流感病毒感染猫的潜伏期约为2～3 d，临床表现主要为发热、昏睡，第三眼睑突出，结膜炎以及呼吸困难，也可见到鼻涕增多。症状严重的猫可能在症状出现后突然死亡，部分猫表现出惊厥和共济失调等神经症状，也有部分猫呈现亚临床感染现象。H5N1感染犬的潜伏期与猫类似，也为2～3 d，可表现出发热、结膜炎，呼吸急促和咳嗽。

3 发病机制

H3N8亚型流感病毒感染犬主要是通过呼吸道传播，可迅速在犬群中扩散。感染犬表现出血性气管炎、支气管肺炎、胸膜炎和血管炎，肺部呈暗红色乃至黑色，触感坚硬，胸腔纵膈常有出血并且在胸膜腔内有浆液性渗出。病理观察可见因水肿和炎性细胞浸润引起的肺泡壁变薄。肺泡腔内可见细胞碎片的聚集、嗜中性粒细胞和巨噬细胞的浸润。少数感染犬呈现出血性肺炎。

H5N1亚型流感病毒对猫感染的有效途径还不确定［12］。猫可通过呼吸道感染流感病毒，也可通过口服感染，因此除呼吸道感染外，也不能完全排除消化道感染。鼻咽部，气管和肺是病毒复制的主要场所，肠道内容物、尿液和粪便也可分离到流感病毒，因此推测流感病毒在感染猫后同时在上呼吸道和消化道内复制。经呼吸道感染的猫在感染肺泡壁的Ⅱ型肺泡细胞后，流感病毒便在猫的下呼吸道内复制。流感病毒在肺中的复制会引发肺泡损伤性病灶。病毒最后到达肝脏、心脏、脑、肾小球和肾上腺，有时还会在脾脏和胰腺中复制。病毒在初始感染器官和二次感染器官中大量复制，导致动物出现临床症状。临床上感染流感病毒的猫从感染后第3天开始排毒，直到感染后第7天或更长时间。除了呼吸器官损伤之外，通过口服途径感染的猫还具有扁桃体以及头部与颈部的淋巴结出血点。在肺部可检测到病毒抗原，并且和肺的病理损害有关。在呼吸器官之外的脑、肝、肾和心也可以检测到病毒。实验接种猫在接种3 d后排出低滴度的病毒并且持续排毒直到研究结束后的第7天。并且发现病毒可以在猫与猫之间水平传播。

4 诊断

4.1 临床诊断

由H3N8亚型流感病毒感染犬引的犬流感的临床症状与支气管败血波氏杆菌及副流感病毒引起的“窝咳”引发的咳嗽、喷嚏、流鼻涕等症状相似，并无典型症状，无法依据临床症状确诊。

猫感染H5N1亚型流感病毒的临床症状应与由猫疱疹病毒和杯状病毒引起的上呼吸道疾病综合征，或是由猫衣原体、支原体感染引起的细菌性肺炎相区别。应将猫的临床症状与当地鸟类感染H5N1亚型高致病性禽流感病毒的流行病学情况联系在一起来诊断病情。

4.2 实验室诊断

4.2.1 病原学诊断:病毒分离是诊断流感的金标准。取发病动物的鼻、咽拭子或鼻洗液咽部拭子，经处理后接种于人胚肾、猴肾或鸡胚羊膜囊中，一般3～5 d即可获得阳性结果。但应注意需要在有相应生物安全资质的实验室中进行。

4.2.2 血清学诊断:血清学诊断可取急性期病中和病后3～4周的双份血清，采用血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验、补体结合试验等方法测定抗流感病毒抗体，如滴度有4倍以上增长则有诊断意义。阳性率一般可达60%～80%。由于所需时间太长。此项试验对急性期疾病的诊断和治疗帮助有限。

4.2.3 分子生物学诊断:PCR技术和实时定量PCR技术可直接从分泌物中检出流感病毒基因，比病毒培养法敏感、快速;但应注意其出现假阳性的问题。M基因和NP基因可区别流感病毒的属特异性。针对流感病毒不同亚型特异性的实时定量PCR技术正在发展中。

5 免疫预防

针对犬流感(H3N8)的防控，根据美国疾病控制中心的建议，应用广谱抗菌药物治疗，可缩短症状持续时间，针对较为严重的犬可进行抗病毒和支持疗法，同时补充能量，发热犬应及时退烧。对发病早期的犬或暴露在感染环境的高危犬给予抗病毒药物可获得良好的效果。美国农业部(USDA)已批准一种灭活疫苗［13］，用于犬流感的免疫预防，可有效降低犬群的整体发病率、发病病程和引起的肺部损伤，但尚不能提供100%保护。

猫H5N1亚型流感病毒感染尚没有得到批准的疫苗。以金丝雀痘病毒［14］和腺病毒［15］为载体的疫苗可诱导良好免疫反应。灭活疫苗对猫的安全性和免疫原性还需进一步研究。

6 展望

在上个世纪，很少发现流感病毒对食肉目动物的感染，然而在2002年之后，流感病毒感染食肉目动物的种类开始增加，2002年发现了流感病毒对虎的感染，2004年发现了H5N1亚型流感病毒对猫的感染。同年出现了H3N8亚型流感病毒对犬的感染。在过去的10年时间里，H5N1亚型高致病性禽流感病毒的感染已蔓延至食肉目的7个种，包括圈养虎和美洲豹、家猫狸猫、犬、石貂、美洲貂和貉［11］。特别是人们发现该病毒还能够在猫与猫之间水平传播。这一现象说明流感病毒已进一步获得了感染哺乳动物的能力，其公共卫生学意义应引起关注。对于研究人员而言，可以以犬科和猫科动物为模型分析流感病毒对哺乳动物的感染力增强原因，进而阐明流感病毒感染哺乳动物的分子机制。

另一方面，H3N8亚型流感病毒已被确认为“一种新出现的犬类病原微生物”在美国的犬群中持续存在。我国目前尚无犬流感(H3N8)的报道，但在韩国发生的H3N2亚型流感病毒感染犬的现象已在我国南方出现。当前需要建立相关检测技术，加强犬、猫流感的监测与调查，开展疫苗研究工作。更为重要的是，在亚洲、欧洲和美洲几乎同时发生H3亚型流感病毒(H3N8和H3N2)在犬群中的传播，人类可能通过与犬的密切接触而增加被该病毒感染的机会。这两种H3亚型流感病毒与季节性H3亚型流感病毒的抗原性并不相同，一旦获得感染人的能力，不排除会引起类似甲型H1N1流感大流行的可能。

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Influenza Virus Infection in Dogs and Cats

GAO Yu-wei，ZHU Xiao-wen，LI Lin，YU Zhi-jun，ZHANG Zhao-wei，LIU Yu-xiu，XIA Xian-zhu
(Institute of Military Veterinary Medicine，Academy of Military Medical Sciences，Key laboratory of Jilin Province for Zoonosis Prevention and Control，Changchun 130062，China)

During the last decade，the reports of dog and cat infection with influenza virus are rapidly increasing.The epidemic of influenza in dogs and cats not only threatened the health of these pets，but also had an impact on public health.Since the first outbreak of H3N8 influenza A virus infection in racing dogs in 2004，canine influenza was keeping on circulating in dogs in the United States.In South Korea and southern China，the dog pneumonia cases due to H3N2 avian influenza A virus infection were repeatedly reported.Lethal infections in cats caused by H5N1 virus were found in Asia and Europe.Surprisingly，the transmission of H5N1 virus from cat to cat was observed in experimental infection study.These phenomena indicated that influenza virus has further acquired the ability to infect mammals and we should pay much attention to the public sanitation significance of influenza in dogs and cats.In this article the epidemiology，clinical signs，pathogenesis，diagnosis and preventive measures for influenza in dogs and cats were reviewed.

Pet;Dog;Cat;Influenza virus

R33;R184

A

1671-7856(2010)11、12-0029-04

10.3969/j.issn.1671.7856.2010.11、12.008

2010-08-20

国家重点基础研究发展计划 (2011CB505002)。

高玉伟(1973－)，男，副研究员，博士，主要从事动物病毒学研究。E-mail:gywtext@yahoo.com.cn。