HER-2/neu蛋白在胃癌中的表达及意义

郭建波

(大连市友谊医院 肿瘤内科，辽宁 大连 116001)

TNM分期是胃癌最重要的预后因素，然而，处于同一临床分期的不同病人的预后并不一致。因此，寻找TNM分期因子以外的具有独立预后意义的分子生物学指标是当前胃癌研究的一个重要任务。Park 等[1]研究证实，HER-2是胃癌的独立预后因素。但也有研究显示，HER-2与胃癌临床病理学参数间不具有相关性[2]。本研究采用免疫组织化学技术，检测67例胃癌组织中HER-2蛋白的表达情况，探讨其与胃癌临床病理学参数的关系。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取大连市友谊医院2004年1月～2010年1月行胃癌手术切除标本，并经病理确诊为胃腺癌的179例患者进行随访，以有随访结果并标本资料完整的67例为研究对象。男47例，女20例，年龄34～86岁，平均56.8岁。按Lauren分类法分为肠型35例，弥漫型27例，混合型5例。无淋巴结转移者28例，有淋巴结转移者39例。临床分期采用1997年国际抗癌联盟(UICC)制定的TNM分期标准，Ⅰ期10例，Ⅱ期32例，Ⅲ期17例，Ⅳ期8例。对照选用20例癌旁黏膜。标本经10%中性福尔马林液固定，石蜡包埋，常规4 μm厚切片。所有患者术前均未经放疗和化疗。

1.2 免疫组织化学方法

免疫组织化学技术采用EliVisionTM二步法。EliVisionTM试剂盒和兔抗人单克隆抗体c-erbB-2 (SP3，HER-2/neu)均购自福州迈新生物技术公司，c-erbB-2为即用型。以已知阳性切片作为阳性对照，以PBS代替一抗作空白对照。

1.3 阳性结果判定标准

至今尚无统一的胃癌HER-2免疫组化阳性判定标准。本文参照大多数学者认可的Hofmann判定标准[3]。IHC阴性(0)：整张切片不着色，或<10%的细胞膜着色；IHC阴性(+)：>10%的细胞膜着色浅，或仅有部分膜着色；IHC可疑阳性(++)：>10%的细胞膜轻-中度着色；IHC阳性(+++)：>10%的细胞膜中-高度着色。

1.4 统计学方法

运用SPSS 14.0统计软件，采用χ2检验和Fisher′s精确概率法，生存分析采用Life-tables法和Logrank检验。随访68.2月，对随访结果采用COX比例风险模型进行多因素分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HER-2/neu在胃癌中的表达

HER-2/neu主要表达于细胞膜，部分细胞浆内也有弱的着色，部分胃癌组织(高分化)HER-2/neu分布有极向，腺腔面细胞膜不着色，因此着色呈U型(图1)。67例胃癌组织中，HER-2阳性表达率为22.4%(15/67)。癌旁黏膜组织(20例)均为阴性。

2.2 HER-2/neu表达与临床病理学参数间的关系

HER-2/neu在肠型胃癌中阳性率为34.3%，弥漫型胃癌中阳性表达率为7.4%，混合型胃癌中阳性表达率为27.8%，肠型胃癌与弥漫型胃癌二者差异有显著性意义(χ2= 6.299,P=0.012)；肠型胃癌与混合型胃癌二者差异无显著性意义(χ2=0.407,P=0.469)；弥漫型胃癌与混合型胃癌二者差异无显著性意义(χ2=0.787,P=0.410)。HER-2/neu阳性表达在淋巴结转移阳性组高于阴性组，临床分期 Ⅰ和 Ⅱ期组低于Ⅲ和 Ⅳ期组，均具有显著性意义(P<0.05)。HER-2/neu表达与患者性别、年龄、分化程度均不相关(P>0.05)，见表1。

图1 HER-2/neu在胃腺癌中的表达(EliVision法×100)主要为膜着色，呈U型
Fig 1 Positive HER-2/neu expression in the gastric adenocarcinoma (original magnification: ×100，Mainly for the cell membrane,u-shaped staining)

2.3 HER-2表达与生存时间的关系

HER-2/neu阳性表达患者的中位生存期为30.0个月，显著低于阴性患者50.0个月的中位生存期(P<0.05，见图2)。随访截止时间2010年6月，随访率100%，全组患者的5年生存率为32.8%，HER-2/neu阳性者为13.3%，HER-2/neu阴性者为38.5%。

图2 生存曲线图Fig 2 Relationship between the expression of HER-2/neu and survival time of patients

表1 HER-2/neu蛋白表达与临床病理学参数间的关系Tab 1 Relationship between the expression of HER-2/neu and clinicopathologic features of gastric cancer

2.4 胃癌多因素生存分析

对表1的各项临床病理参数进行COX比例风险模型多因素分析，提示临床分期和HER-2/neu影响预后，均与生存期呈负相关。

3 讨 论

癌基因HER-2/neu又称c-erB-2基因，定位于人染色体17q21，与表皮生长因子(EGFR)、HER-3、HER-4同属于Ⅰ型受体酪氨酸激酶(RTK)超家族。HER-2/neu在正常情况下处于非激活状态，与其特异性配体结合后可调节细胞的分裂、分化和增殖。当HER-2/neu受到某些致癌因素的作用后，其结构或表达失控而被激活，转而具有肿瘤转化活性，可促使细胞发生恶性转化。HER-2/neu在胃癌中过表达最早报道于1986年，之后国内外有大量文献关于胃癌HER-2/neu高表达的研究。文献报道胃癌中HER-2/neu蛋白的表达率为8.2%～45%[4-6]。

HER-2/neu在本实验组67例胃癌中的表达率为22.4%，在文献报道范围内。在胃癌旁正常组织中均未见HER-2/neu的表达，提示HER-2/neu表达是胃黏膜上皮细胞发生恶变的标志，可作为胃癌诊断和预后的参考标志。本组研究结果与Oya[7]等研究结果相一致。

本研究结果显示HER-2/neu蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度无关(P>0.05),而与临床分期、淋巴结转移和Lauren分类有关(P<0.05)。临床分期 Ⅲ期和 Ⅳ期胃癌的HER-2/neu阳性表达率高于Ⅰ期和Ⅱ期胃癌(P=0.011)；伴有淋巴结转移的胃癌中HER-2/neu阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05)，表明HER-2/neu基因在淋巴结转移过程中被激活并参与淋巴结转移机制，加速了疾病的进展。国内外研究结果亦有不同意见。有研究表明，HER-2/neu蛋白高表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移等无关，但与患者的预后有关[8-10]。

Lordick等[11]对1527例胃癌进行了研究，他们发现HER-2阳性表达率在肠型胃癌为34%，弥漫型胃癌和混合型胃癌为6%和20%，肠型明显高于弥漫型和混合型。Tanner[12]等的研究也有相同结果。本组研究HER-2/neu在肠型胃癌中的表达率明显高于浸润性胃癌(P<0.05)，提示HER-2/neu高表达可能与肠型胃癌特定细胞亚群的生长发育相关。

有研究显示，HER-2过表达往往提示肿瘤恶性度高，进展迅速，化疗缓解期短，对标准放化疗和内分泌治疗易产生耐药，从而使患者的无病生存期和总生存期缩短[13]。作者通过对本实验组67例胃癌患者随访，结果发现，HER-2/neu阳性患者的中位生存期为30.0个月，明显低于阴性患者50.0个月的中位生存期。全组患者的5年生存率为32.8%，HER-2/neu阳性者为13.3%，HER-2/neu阴性者为38.5%。本研究结果与多数研究者的报道相一致[14]。

本研究进一步利用多因素COX风险模型分析，提示临床分期和HER-2/neu为胃癌的独立预后因素。

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