ＭＤＭ－２和ｂｃｌ－２在子宫颈癌中的表达及其意义

张　巍

宫颈癌是全球妇女恶性肿瘤中仅次于乳腺癌的第2个最常见恶性肿瘤。每年全世界新增病例大约500000例。在发展中国家妇女中发病率居第1位［1］。子宫颈癌的早期诊断是子宫颈癌防治的重要策略之一。子宫颈癌的发生涉及多因素、多基因、多环节。本研究采用免疫组化法，检测了MDM-2和bcl-2在宫颈癌中的表达，旨在探讨MDM-2和bcl-2在宫颈癌的发生、发展过程中的相互关系。

1 资料与方法

1.1 材料 选取子宫颈标本59例，其中子宫颈癌标本31例，自贡经非典型性增生标本13例，正常子宫颈标本15例，标本取自河南省焦作市第二人民医院病理科2002-2005年存档蜡块，所有病例术前均未行放化疗和免疫治疗。

1.2 方法 标本经10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，4 μm后连续切片，进行HE染色和免疫组化染色(SP法)，以PBS代替第一抗体作为阳性对照。根据FIGO1995进行子宫颈癌分性，根据方案进行临床分期。

1.3 结果判定 MDM-2定位于细胞核，bcl-2定位于细胞浆。在切片中显示细胞和或细胞浆为黄色或黄棕色者为阳性细胞标志。根据细胞中着色癌细胞占同类病变细胞数的10%以上为阳性表达，小于10%为阴性表达。阳性细胞必须具备：①细胞结构清晰；②阳性颗粒定位准确，必须定位于细胞膜/浆或细胞核；③细胞膜/浆或细胞核的着色明显高于背景。

1.4 统计学方法 计数资料采用χ²检验和确切概率方法。

2 结果

2.1 一般资料 子宫颈癌标本31例，患者最大年龄69岁，最小27岁，平均48岁；子宫颈癌组织类型中鳞癌29例，腺癌2例。分化程度分为高分华(G1)3例，中分化(G2)16例，低分化(G3)12例，原位癌3例，其余全部为浸润性癌。临床分期为0期3例，Ⅰ期5例，Ⅱ期14例，Ⅲ期9例，Ⅳ期0例。对照组为因子宫颈非典型性增生性子宫颈切除术的宫颈非典型性增生组织13例，患者平均年龄45.60岁;因子宫体良性病变而宫颈无明显增生病变行子宫切除的正常宫颈组织15例，患者平均年龄46.92岁。

2.2 MDM-2和bcl-2在宫颈癌中阳性表达与临床病理特征的关系 子宫颈癌种MDM-2阳性11例,bcl-2阳性13例，阳性表达率分别为35.49%、41.93%，子宫颈非典型性增生阳性表达MDM-2 1例,bcl-2 1例，正常子宫颈阳性表达MDM-2 1例，bcl-2 1例，所以子宫颈癌组织与子宫颈非典型性增生和正常子宫颈组织相比差异有统计学意义(P<0.05)。子宫颈非典型性增生和正常子宫颈相比差异无统计学意义 (P>0.05)。见表1。

经确切概率法统计，31例子宫颈癌中，不同大体类型中具有不同的表达程度，MDM-2阳性率在子宫颈肥大组最高(χ²=3.91，P<0.05),bcl-2阳性率在子宫颈肿块组最高(χ²=3.99，P<0.05),见表2。

从癌组织分化程度来看，低分化癌MDM-2、bcl-2染色阳性率高于中-高分化癌，经统计学检验，均有统计学意义，见表3。

2.3 MDM-2和bcl-2染色的关系 在31例子宫颈癌组织中MDM-2和bcl-2共同阳性9例(29.03%)经配对资料χ²检验，P<0.01，子宫颈癌中MDM-2与bcl-2阳性表达率存在正相关关系。

3 讨论

子宫颈癌的发生是一个非常复杂的问题，从已有的研究来看涉及面很广，以证明癌基因、抑癌基因及凋亡相关基因均与子宫颈癌的发生有关［2］。

MDM-2基因作为癌基因，涉及细胞分裂和凋亡的调解，其过度表达可知细胞生长转化［3］。笔者研究比较MDM-2的阳性表达与子宫颈癌临床特征、病理类型的关系发现：子宫颈癌患者MDM-2的表达与肿瘤的病理分级呈正相关，肿瘤的分化程度越低，MDM-2的表达越强，其他类型的肿瘤也有类似报道［4］，MDM-2阳性的肿瘤具有更强的分裂增殖活性，测定肿瘤细胞中MDM-2的表达可作为预测患者预后的一个指标。

bcl-2对程序性细胞死亡或凋亡的调控起重要作用［5-7］，研究结果显示：bcl-2蛋白在子宫颈癌的表达率明显高于正常对照组、子宫颈非典型增生组(P<0.05)，而bcl-2蛋白在子宫颈非典型性增生中的表达与在子宫颈癌间无统计学意义(P>0.05)，检测子宫颈癌细胞中bcl-2蛋白可作为早期诊断子宫颈癌变的重要参考指标之一。

MDM-2和bcl-2免疫组化染色阳性程度可反映子宫颈癌的临床进程，阳性较高者分化程度低，细胞增殖快，更容易扩散进展。联合检测MDM-2和bcl-2在子宫颈癌中的表达，显示二者具有明显相关性，提示子宫颈癌的发生、发展与多种基因改变相关，MDM-2和bcl-2共同阳性表达率随着病变程度加重而增高，对预测子宫颈癌的治疗效果和预后具有重要的参考价值。

参考文献

［1］ Schoell WM,Janicek M,Mirhashemi R,et al.Epidemiolog and biology of cervical Cancer.Sem in Surg Oncol，1999,16(3):203-211.

［2］ 王晓丽，李明众，尚菊战，等.P53和bcl-2在子宫颈上皮内瘤样变及子宫颈癌中的表达.中国肿瘤临床与康复，2002，9(2)：38-40.

［3］ Momand J,Zambetti GP.MDM-2:“Big brother”ofP53.J Cell Biochem,1997,64:343-352.

［4］ Bulz K,Shababeddin L,Geisen C,et al.Functional P53 protein in human papillomavirus-positove cancer cells.Oncogene,1995,10:927-936.

［5］ Liang XH,Mungal S,Ayscue A,et al.bcl-2 protooncogene expression in cervical carcinoma cell lines containing inactive P53.J Cell Biochem,1995,57(3):509-521.

［6］ Hockenberg D，Nunez G,Milliman C,et al.Bcl-2 is an inner mitochondrialmembrane protein that blocks programmed cell death.Nature,1990：348-334.

［7］ Graninger WB,SetoM,Boutain B,et al.Expression of Bcl-2 Ig fusion transxriptscripts in nomal and neoplastic cell.Clinic Inwers,1987,80:1512.