测试片法在食品菌落总数检测中的应用可行性分析

杨静

摘 要：为评估测试片法在食品菌落总数检测中的应用可行性及与传统的平板计数法的一致性，选取大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌作为标准菌株，同时采集生肉、水产品、乳制品、面食和果蔬等自然污染样品，分别采用测试片法和平板计数法对上述样品进行菌落总数检测，并采用t检验分析两种方法测定结果的一致性。结果表明，两种方法对标准菌株的检测结果无显著差异（P＞0.05），对自然污染样品的检测也无显著差异（P＞0.05），其中现制面条菌落总数最多，牛肉菌落总数最少。这表明测试片法与平板计数法的检测结果具有很好的一致性。测试片法操作简便，为食品菌落总数快速检测提供了可行的技术手段，具有一定的应用前景。

关键词：测试片法；平板计数法；食品；菌落总数

Feasibility Analysis of the Application of Test Slice Method in the Detection of Total Number of Food Colonies

YANG Jing

（Shaanxi Provincial Institute of Product Quality Supervision and Inspection， Xian 710048， China）

Abstract： In order to evaluate the application feasibility of the test slice method in the detection of the total number of food colonies and the consistency with the traditional plate counting method， Escherichia coli， Bacillus subtilis and Bacillus cereus are selected as the standard strains， and natural contaminated samples such as raw meat， aquatic products， dairy products， pasta and fruits and vegetables are collected. The total number of colonies are detected by the test slice method and the plate counting method， and t - test is used to analyze the consistency of the two methods. The results show that there is no significant difference between the two methods in the detection of standard strains （P＞0.05）， and there is no significant difference in the detection of natural contaminated samples

（P＞0.05）， in which the total number of fresh noodle colonies is the highest， and the total number of beef colonies is the least. This shows that the test results of the test slice method and the plate counting method are in good agreement. The test slice method is easy to operate and provides a feasible technical means for the rapid detection of the total number of food colonies， and has a certain application prospect.

Keywords： test slice method; plate counting method; food; total colony

食品安全与人们的健康息息关系，因此食品安全问题一直备受关注。食品安全热点数据显示，微生物污染等成为食品安全的重点关注领域，因此构建快速、准确、高效的微生物检测体系对于高效开展食品安全监管工作十分必要[1]。菌落总数是判定食品被细菌污染的程度，反映食品新鲜程度和卫生状况的重要微生物指标之一[2]。传统的平板计数法是目前最常用的一种活菌计数方法，但其操作流程烦琐、检测周期长、人力成本高等，制约了其在快速检测领域的应用[3]。为此，人们相继提出了一系列简便、快捷、敏感、准确的检测新思路，测试片法是近年来不断取得进展的一种新型检测方法。该方法是以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品微生物的方法[4]。该方法操作简单、结果直观、无须人工计数等[5]。然而，由于其发展与应用时间较短，其检测结果的准确性及与传统方法的一致性有待进一步评估和验证。因此，本研究对比分析测试片法与平板计数法的检测结果，旨在评价该方法的可靠性和应用前景，为实现食品微生物快速高效检测提供理论和技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试剂与仪器

CompactDry菌落总数测试片（日本Nissui公司）、平板计数琼脂（Plate Count Agar，PCA）培养基（北京陆桥技术股份有限公司）、营养肉汤（北京陆桥技术股份有限公司）、生理盐水。SPX-150B恒温培养摇床（武汉汇诚生物科技有限公司）、恒温水浴箱（北京科伟永兴仪器有限公司）、冰箱（海尔）、分析天平（深州市博途电子科技有限公司）、均质器（法国梅里埃公司）、振荡器（金坛市城西春兰实验仪器厂）、微量移液器及无菌锥形瓶等。

1.1.2 标准样品

选取大肠埃希氏菌ATCC43888、枯草芽孢杆菌ATCC6633、蜡样芽胞杆菌CMCC63303作为标准菌株。

1.1.3 自然污染样品

于市场上随机采购易受细菌污染的生肉（猪肉、牛肉、鸡肉、鸭肉）、水产品（鱼、虾）、乳制品（生牛乳）、面食（面粉、现制面条）及果蔬（鲜果、新鲜蔬菜、新榨果汁）各20批次。

1.2 样品测定

标准样品制备时分别取大肠埃希氏菌ATCC43888、枯草芽孢杆菌ATCC6633和蜡样芽胞杆菌CMCC63303各1 mL加入10 mL营养肉汤中，于恒温培养摇床内在36 ℃条件下振荡（160 r·min-1）培养24 h，调节光密度（Optical Density，OD）至1.0，制成菌悬液，再使用生理盐水稀释菌液至10-3、10-5和10-7。测定方法参照CompactDry菌落总数测试片说明书。

自然污染样品制备和平板计数法的应用参照国家标准《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》（GB 4789.2—2016）。每种方法进行6次重复实验。

1.3 统计分析

使用Excel软件进行数据统计，使用SPSS软件进行t检验，分析两种方法的差异。

2 结果与分析

2.1 标准样品菌落总数的测定

使用测试片法和平板计数法测定标准样品的菌落总数，结果如表1所示，3种微生物在10-7、10-5和10-3 3种稀释度下的菌落总数在2.34×101～

4.27×105 CFU·mL-1；t检验结果表明，两种方法之间不存在显著差异（P＞0.05），说明采用测试片法测定标准样品的菌落总数可行。

2.2 自然污染样品菌落总数的测定

采用测试片法和平板计数法对不同类别的自然污染样品的菌落总数进行检测，结果如表2所示。每个品类下，两种检测方法得到的菌落总数相近；t检验结果均为P＞0.05，表明两种方法间的差异不显著，即可以认为这两种方法在该样本上的检测结果是等效的。相较而言，现制面条的菌落总数最多，牛肉的菌落总数最少。

3 结论与讨论

本研究采用测试片法与平板计数法对标准样品及自然污染食品样品中的菌落总数进行了测定，并运用统计学方法分析了两者的差异，以评估测试片法在食品检测中的应用可行性。结果显示，无论是在标准样品还是自然污染样品的检测中，两种方法所得结果均表现出高度的一致性，且t检验表明两者间不存在显著差异（P＞0.05）。这证明了测试片法的准确性与平板计数法相当，可作为食品微生物学检验中菌落总数测定的有效替代或补充方法。对于标准样品（大肠埃希氏菌ATCC43888、枯草芽孢杆菌ATCC6633、蜡样芽胞杆菌CMCC63303）的检测，测试片法在不同稀释度下测得的菌落总数与平板计数法测得的菌落总数接近，验证了测试片法的可靠性和稳定性。在自然污染样品的检测中，本研究涵盖了生肉、水产品、乳制品、面食及果蔬等多种易受细菌污染的食品类型，两种检测方法均能有效评估这些样品的微生物污染水平，且在所有类别中，测试片法与平板计数法所获得的菌落总数数据相似，进一步证实了测试片法的广泛适用性。不同类型食品在生产加工、贮存运输等环节存在不同的污染风险，导致产品的微生物含量差异较大。现制面条的菌落总数最高，可能与其加工环境有关，提示需要加强对即食食品加工过程的卫生

管理。

参考文献

[1]席雪琴.食品微生物检验方法和质量影响因素与控制措施[J].工业微生物，2024，54（2）：194-196.

[2]李学辉，唐巍飚，陈希尧，等.净水机水质菌落总数的不确定度评定[J].中国计量，2020（12）：110-112.

[3]周云.平板计数法测定豆浆中的大肠菌群[J].食品工业，2023，44（11）：316-318.

[4]苏晓燕，杨菲，刘万敏，等.测试片法在细菌菌落总数检测中的应用价值研究[J].人民军医，2019，62（7）：

628-631.

[5]刘贺，窦斐，费春楠，等.测试片法对医疗机构环境物体表面细菌检测效果评价[J].中国消毒学杂志，2015，32（8）：818-820.