气相色谱法测定西葫芦中百菌清残留量的不确定度评定

2024-05-26李盼盼史晓华李嘉业张慧敏

中国标准化 2024年6期

李盼盼史晓华李嘉业张慧敏

摘要：参照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》，通过建立数学模型，对气相色谱法测定西葫芦中百菌清残留量的不确定度进行评定。分析量化了样品称样量、提取溶液体积、标准溶液配置、回收率、测量重复性、气相色谱仪6个不确定度分量，计算出合成标准不确定度和扩展不确定度。结果表明，西葫芦中百菌清添加量为0.1 mg/kg时，其测定结果为0.1069 mg/kg，扩展不确定度为0.0050 mg/kg。影响不确定度的主要因素是标准溶液配置、回收率、测量重复性和气相色谱仪。

关键词：西葫芦，百菌清，不确定度，气相色谱法

DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2024.06.031

0 引言

百菌清（chlorothalonil）是一种广谱保护性杀菌剂，对多种作物的真菌病害具有预防作用，由于其良好的体表黏着性，不易被水冲刷，因此药效稳定，残效期长，世界卫生组织国际癌症研究机构将百菌清列为2B类致癌物[1]。

近年来，随着人们健康意识的逐步提高，对食用性农产品质量安全问题的关注度也越来越高[2]。食品检验作为保障食品质量安全的重要手段，对其检验检测数据的准确性也提出了更高的要求[3]。但实验过程中的诸多不确定因素，使测量值一定程度上偏离真实值，而不确定度是表征合理地赋予被测量的量值分散程度，与测量结果相联系的参数，因此进行不确定度评定，对测量不确定度引起的误判风险进行合理预估，可以定量评价检测结果的准确度，反映检测过程中各因素对结果不确定度的影响程度，使检测结果更具可信性和可比性[4-8]。尤其是当检测值与最大残留限量值接近时[9]，通过不确定度评定可以更科学地对检测值进行判定，最大限度地减少合规判定中可能存在的争议，提升可食性农产品检验质量的管控力度和管理水平，为确保食品安全助力[8，10-12]。

不确定度评定分为A类评定和B类评定[13]。A类评定是对在规定测量条件下测得的量值用统计分析的方法进行测量不确定度分量的评定，评定方法有贝塞尔公式法和极差法两种。陈凌峰[14]研究发现，使用贝塞尔公式估计的总体方差总是无偏的，不会给测量结果的合成标准不确定度带来原理性误差；而用极差法估计的总体标准差虽是无偏的，但估计的总体方差偏大，导致最终测量结果的合成标准不确定度偏大。因此在此选择贝塞尔公式法进行A类评定。B类评定是根据基于经验或其他信息获得的概率密度函数对测量不确定度分量进行的评定[15]。

依据JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》[13]，参考农业行业标准NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》[16]，对西葫芦中百菌清残留量的不确定度进行评定，以期为西葫芦中百菌清农药残留的检测提供质量控制的科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

西葫芦购自当地农贸市场。百菌清标准溶液（1000 μg/mL，坛墨质检科技股份有限公司），乙腈（分析纯，天津市永大化学试剂有限公司）、正己烷（色谱纯、色谱纯，西陇科学股份有限公司）、丙酮（色谱纯、分析纯，国药集团化学试剂有限公司），氯化钠（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。

1.2 仪器与设备

7 8 9 0 B 气相色谱仪（配 E C D 检测器，美国 Agilent公司），色谱柱：HP-5毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.25 mm，美国Agilent公司），电子天平（福州科迪电子技术有限公司），四联自动清洗匀浆机（美国海斯特仪器公司），氮吹仪（美国Organomation 公司），10 mL单标线吸量管（天津玻璃仪器厂），5 mL单标线吸量管（天津玻璃仪器厂），50 mL容量瓶（天津玻璃仪器厂），1000 μL可调移液器（赛默飞世尔科技有限公司），可调瓶口分液器（德国普兰德有限公司），弗罗里矽固相萃取小柱（规格，美国 Agilent公司），滤膜（规格0.22 μm，天津博纳艾杰尔科技有限公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 样品前处理

参考农业行业标准NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》[16]，结合实验室实际条件适当调整，进行样品前处理。

提取：准确称取25.00 g西葫芦样品于广口瓶中，用可调瓶口分液器加入50.0 mL乙腈，匀浆机高速匀浆2 min后，过滤至装有7 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，盖上塞子，剧烈震荡1 min，在室温下静置30 min，使乙腈和水相分层。用A级10 mL单标线移液管移从100 mL具塞量筒中准确吸取10.00 mL乙腈相溶液于15 mL刻度离心管中，80 ℃氮吹至近干，加入2.0 mL正己烷复溶，待净化。

净化：将弗罗里矽柱依次用5 mL丙酮+正己烷（10+90）、5 mL正己烷预淋洗，弃去淋洗液，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即加入待净化液，收集洗脱液于15 mL刻度离心管中，用5 mL丙酮+ 正己烷（10+90）淋洗离心管后倒入弗罗里矽柱，并重复1次。将盛有洗脱液的离心管于50 ℃氮吹至近干，用A級5 mL单标线移液管移加入5.00 mL正己烷，混匀，过膜后测定。

3 结论

（1）当称样量为25.0 0 g，k =2（置信概率为 95%），气相色谱法测定西葫芦中百菌清含量结果报告为（0.1069±0.0050）mg/kg。

（2）通过各分量评定发现，测量不确定度主要来源于标准溶液配置、回收率、测量重复性、气相色谱仪四个方面，其他方面，尤其是样品称量，对测量不确定度的影响较小。

（3）本测量条件下，标准溶液配置对测量不确定度影响最大。与沈玮气相色谱法测定黄瓜中腐霉利含量的不确定度评定[15]、金雅慧气相色谱法测定黄精中甲胺磷残留量的不确定度评定结果一致[22]。本方法采用了单点校正法，与标准曲线法相比，减少了标准溶液稀释过程产生的不确定分量和标准曲线拟合过程产生的不确定度分量。但单点校正法作为外标法的一种，实际是利用原点作为标准曲线的另一个点，且标准溶液的浓度与被测样品的浓度必须相近，才能保证定量结果的准确度[23-25]。因此，单点校正法虽简便快捷，但其测定范围较窄，应用时要注意其适用条件。

（4）回收率对测量不确定度的影响次之。加标回收是实验室质量监督和内部质量控制的方法之一，加标回收率应符合检测标准或者GB/ T 27404—2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的要求[26]。标准化方法下，过程重复性强，加标回收率体现了实验人员前处理过程的规范化水平。目前回收率不确定度的评定普遍是对平均回收率的不确定度评定，但研究发现，回收率不确定度是依据过程和模型的计算结果，包含了与回收率具有复函数关系的所有因素，平均回收率的不确定度只是回收率不确定度的一个分量，只有当这个分量占绝对优势才可代表回收率总不确定度[27]。因此，关于回收率不确定度评定还需进一步优化。

（5）测量重复性和气相色谱仪对测量不确定度的影响也较大。说明在整个检测过程中，要注意好样品、溶液的均匀性，实验人员要规范操作，减少人为误差，气相色谱仪要做好定期的维护保养，确保仪器状态稳定。

参考文献

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