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不同甜瓜品种氮钾双高效评价指标筛选及鉴定

2024-05-22康利允李晓慧高宁宁王慧颖李海伦梁慎常高正赵卫星

江苏农业科学 2024年7期
关键词:综合评价聚类分析主成分分析

康利允 李晓慧 高宁宁 王慧颖 李海伦 梁慎 常高正 赵卫星

(河南省农业科学院园艺研究所,河南郑州 450002)

摘要:为鉴定甜瓜耐低氮低钾能力,筛选氮钾双高效评价指标,为甜瓜氮钾双高效品种选育提供理论依据。以河南省主推甜瓜品种为供试材料,苗期试验采用穴盘基质栽培,设正常供氮钾(CK,N含量4.88 mmol/L、K2O含量 2.50 mmol/L)、低氮(LN,N含量0.01 mmol/L)、低钾(LK,K2O含量0.01 mmol/L)、低氮钾(LNK,N含量0.01 mmol/L、K2O含量 0.01 mmol/L)4个处理,采用主成分分析、隶属函数法及聚类分析等多元统计方法,对甜瓜氮钾双高效进行综合评价,同时利用田间产量进行验证。结果表明,与CK相比,除茎粗和氮含量外各性状在低氮、低钾、低氮钾处理下的降低幅度均达显著水平。综合耐低氮系数、耐低钾系数、耐低氮钾系数主成分分析结果,确立株高、氮积累量和钾积累量为甜瓜苗期氮钾双高效品种鉴定的主要指标,茎粗、叶面积、干重、氮含量、钾含量是次要指标。综合氮效率和钾效率D值聚类分析结果,初步确立钱隆蜜、雪彤9号、锦绣翠玉既是氮高效又是钾高效型甜瓜品种,世纪星靓丽瓜姿既是氮敏感型又是钾敏感型甜瓜品种,结合氮钾效率D值聚类分析结果,最终确立锦绣翠玉是甜瓜氮钾双高效型品种,世纪星靓丽瓜姿为氮钾双敏感型品种。结合田间产量表现,认为氮、钾高效型品种在低氮、低钾胁迫下也可获得相对较高的产量,具有穩产的特性。本研究综合分析了氮高效、钾高效、氮钾高效筛选结果,且结合了田间产量表现,选用的评价方法是准确可行的,可为今后甜瓜氮、钾养分逆境栽培及品种选育提供理论依据。

关键词:甜瓜;氮钾双高效;综合评价;鉴定指标;主成分分析;隶属函数法;聚类分析

中图分类号:S652.06  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2024)07-0148-11

甜瓜(Cucumis melo L.)为一年生葫芦科(Cucurbitaceae)蔓性草本植物,果实甜美多汁,风味独特,营养丰富,深受全国各地人们的喜爱。据联合国粮食及农业组织(FAO)统计,2021 年我国甜瓜种植面积为38.7万hm2,总产量为1 400万t。设施甜瓜具有集约化程度高、经济效益好等优点,生产中普遍存在盲目过量施肥的问题,[JP2]造成土壤盐渍化及环境污染等[1],导致作物减产、品质降低和肥料利用率低[2-3]。彭澎等研究发现,山东省设施土壤当季氮、钾肥施用量分别高达1 483~4 670、1 454~3 623 kg/hm2,陕西省分别高达1 485~1 893、1 359~1 930 kg/hm2,河北省分别高达1 033~3 297、512~1 746 kg/hm2[4]。郭亚雯等调查陕西省设施甜瓜施肥现状发现,氮、钾养分总投入量平均分别为1 059、842 kg/hm2,其中化肥氮和钾平均施用量分别为315 kg/hm2和281 kg/hm2,氮和钾化肥施用过量的农户均占74.9%,氮和钾化肥减施潜力分别为65%和68%,当季氮和钾养分利用率分别仅为7.60%和17.8%[5]。因此,在确保甜瓜产量和品质的前提下,如何降低氮、钾肥施用量已成为设施甜瓜生产过程中亟待解决的产业问题。

诸多研究证明,不同基因型品种的耐低氮[6]和耐低钾[7]能力存在显著差异。利用甜瓜遗传多样性,充分挖掘作物自身潜力,提高氮、钾肥利用率,摆脱甜瓜对肥料的过分依赖,是实现减肥增效的最有效方法。作物的氮效率和钾效率是一个复杂过程,仅通过单一性状不能准确反映出不同品种的耐低氮、低钾能力的差异。目前多采用主成分分析、聚类分析等方法,对不同作物品种的氮效率[8]或钾效率[9]进行综合评价及鉴定,大多研究主要集中于甜瓜氮高效或钾高效综合评价方面,而关于利用多元统计方法评价不同甜瓜品种氮钾双高效鉴定及指标筛选方面的研究却鲜有报道。

本研究以河南省主推的14个甜瓜品种为试验材料,利用穴盘基质栽培方法研究不同甜瓜品种对不同氮钾水平的响应,采用主成分分析、隶属函数法及聚类分析等多元统计方法对甜瓜氮钾双高效进行综合评价和分类,筛选出氮钾双高效甜瓜品种,确定与甜瓜氮钾双高效密切相关的苗期性状,同时利用田间产量进行验证,为氮钾双高效甜瓜品种选育及耐低氮钾机制研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试的14个甜瓜品种分别为众云18、青玉3号、众天8号、菊城9号、花魁、钱隆蜜、雪彤9号、菊城622、珍甜18、玉锦脆、锦绣翠玉、翠玉6号、天佑甜宝、世纪星靓丽瓜姿,均由河南省农业科学院园艺研究所提供。

1.2 试验设计

苗期试验于2023年2—3月在河南省农业科学院温室进行。采用穴盘基质栽培方法,培养基质为草炭 ∶蛭石=3 ∶1(体积比)。设正常供氮钾(CK,N含量 4.88 mmol/L、K2O含量2.50 mmol/L)、低氮(LN,N含量 0.01 mmol/L)、低钾(LK,K2O含量0.01 mmol/L)、低氮钾(LNK,N含量0.01 mmol/L、K2O含量0.01 mmol/L)4个处理。挑选籽粒饱满、均匀一致的种子直播于32孔穴盘中,待子叶完全展开后,浇pH值为6.0的营养液,营养液由1/2 Hoagland和1/1 000 Arnon微量元素组成。第1周用1/4浓度营养液,第2周用1/2浓度营养液,以后均用全量营养液。

田间试验采用连栋棚加地膜覆盖栽培方式,于2023年3—7月在河南省农业科学院现代试验基地(原阳)连栋棚内进行。试验采用二因素裂区设计,以氮、钾处理为主区,以品种为副区,3次重复。试验设置正常供氮钾(CK,N含量200 kg/hm2、K2O含量 300 kg/hm2)、低氮(LN,N含量0 kg/hm2)、低钾(LK,K2O含量0 kg/hm2)、低氮钾(LNK,N含量 0 kg/hm2、K2O含量0 kg/hm2)4个处理。各品种种植的行株距为1.1 m×0.4 m,其他田间管理均按当地高产栽培要求。

试验小区设于棚内中段,两头留有3 m长的缓冲带,以避免棚口温度和湿度差异较大引起的误差。试验地0~20 cm土壤理化性质:pH值为785,有机质含量16.1 g/kg,全氮含量0.93 g/kg,碱解氮含量18.7 mg/kg,有效磷含量10.4 mg/kg,速效钾含量152.8 mg/kg。

1.3 测定项目与方法

苗期试验:待植株生长到5叶期(以低氮钾处理为标准)时,取 20株甜瓜苗从根部剪掉,分别测定其株高、茎粗、叶面积等。甜瓜苗于105 ℃杀青30 min后,75 ℃烘至恒重,测定其干重。氮含量采用浓硫酸-过氧化氢法消煮,半微量凯氏定氮法测定,钾含量采用浓硫酸-过氧化氢法消煮,火焰光度法测定。

田间试验:果实成熟后,每小区采集生长整齐一致的6株果实,称其重量,计算产量。

氮(钾)积累量(g/株)= 干重(g/株)×氮(钾)含量。

耐低氮(钾)系数 =[正常供氮(钾)处理参数-低氮(钾)处理参数]/正常供氮(钾)处理参数×100%。

隶属函数值u(Xj)=(Xj-Xmin)/(Xmax-Xmin);权重wj=∑nj=1pj;综合氮(钾)效率评价值D=∑nj=1[u(Xj)×(wj)]。

式中:Xj表示第j个筛选指标;Xmax、Xmin 分别为筛选指标的最大值和最小值;wj表示第j个筛选指标在所有指标中所占的权重;pj表示第j个筛选指标的贡献率。

1.4 数据处理与分析

数据采用 Excel 2007和SPSS 20.0统计分析软件处理,其中,主成分分析采用降维-因子分析法,相关分析采用Pearson法,聚类分析采用系统聚类法。

2 结果与分析

2.1 不同氮钾含量处理对甜瓜苗期主要性状的影响

由图1可知,低氮、钾胁迫导致不同甜瓜品种苗期多数性状降低,但不同性状对低氮、钾胁迫的响应存在差异。株高、叶面积、干重、钾含量、氮积累量和钾积累量均表现为CK处理显著高于其他处理,表明低氮、低钾、低氮钾胁迫均抑制了甜瓜上述性状的增加。茎粗则表现为低钾处理显著高于其他处理,氮含量为CK和低钾处理显著高于低氮和低氮钾处理,而CK和低钾处理间差异不显著,表明低钾胁迫反而能促进甜瓜茎粗的生长,且低钾处理较低氮、低氮钾处理促进甜瓜对氮素的吸收。

2.2 不同甜瓜品种氮高效鉴定

2.2.1 耐低氮系数及相关分析 由表1可知,低氮条件下,不同甜瓜品种苗期大多数性状的耐低氮系数降低(耐低氮洗漱<1),而部分品种钾含量的耐低氮系数升高(耐低氮洗漱>1)。在各性状的耐低氮系数中,氮积累量和钾积累量的耐低氮系数平均值最小,分别为0.21和0.29,而钾含量的耐低氮系数平均值最高,高达0.92。且不同甜瓜品种间苗期各性状耐低氮系数的变异幅度亦较大,变异系数为9.50%~47.13%,除钾含量外其他性状耐低氮系数的变异系数均大于10%。因此,利用单个性状的耐低氮系数来鉴定不同甜瓜品种的耐低氮能力存在一定的片面性。

各性状耐低氮系数的相关性分析结果(表2)显示,干重与株高、茎粗呈显著或极显著正相关;氮含量与叶面积呈显著正相关;氮积累量与株高、叶面积、干重和氮含量呈显著正相关;钾积累量与株高、干重、钾含量和氮积累量呈显著或极显著正相关。由于各性状间存在或大或小的相关性,导致提供的信息大量重叠,为消除影响,需在此基礎上进行主成分分析。

2.2.2 主成分分析 对各性状的耐低氮系数进行

主成分分析,由结果(表3)可知,前4个主成分累计贡献率达到90.234%,可反映原始数据信息的90234%,具有较大的信息代表性。主成分1的贡献率为39.245%,主要由株高、干重、氮积累量和钾积累量决定;主成分2的贡献率为25.475%,主要由株高、干重、氮含量、钾含量决定,主成分3的贡献率为12.794%,主要由茎粗决定,主成分4的贡献率为12.72%,主要有叶面积和钾含量决定。

2.2.3 综合评价 根据D值大小可对不同甜瓜品种的耐低氮能力强弱(表4)进行评价,雪彤9号D值最大,高达0.83,表明其对低氮胁迫最不敏感,耐低氮能力最强;世纪星靓丽瓜姿D值最小,表明此品种对低氮胁迫最敏感,耐低氮能力最弱。对D值进行聚类分析(图2)可知,不同甜瓜品种氮效率可分为4类,Ⅰ类为氮高效型品种,分别有钱隆蜜、雪彤9号、菊城622和锦绣翠玉;Ⅱ类为中度氮高效型品种,分别有青玉3号、众天8号、珍甜18、玉锦脆、翠玉6号、天佑甜宝;Ⅲ类为中度氮敏感型品种,分别有众云18、菊城9号、花魁;Ⅳ类为氮敏感型品种,有世纪星靓丽瓜姿。

2.3 不同甜瓜品种钾高效鉴定

2.3.1 不耐低钾系数及相关分析 由表5可知,低钾条件下,不同甜瓜品种苗期大多数性状指标的耐低钾系数降低(耐低钾系数<1),而部分品种株高、茎粗、叶面积、干重、氮含量、氮积累量的耐低钾系数升高(耐低钾系数>1)。在各性状的耐低钾系数中,钾含量和钾积累量的耐低钾系数平均值最小,分别为0.59和0.50,而茎粗的耐低钾系数最高,高达1.16。不同甜瓜品种间苗期各性状耐低钾系数的变异幅度亦较大,变异系数为12.49%~37.60%,各性状耐低钾系数的变异系数均大于10%。因此,利用单个性状的耐低钾系数来鉴定不同甜瓜品种的耐低钾性存在一定的片面性。

各性状耐低钾系数的相关性分析结果(表6)显示,叶面积与茎粗呈显著正相关;干重与株高呈极显著正相关; 氮含量与茎粗、叶面积呈极显著正相关;钾含量与株高呈显著正相关;氮积累量与株高、干重呈显著正相关;钾积累量与株高、干重和氮积累量呈显著或极显著正相关。由于各性状间存在或大或小的相关性,导致提供的信息大量重叠,为消除影响,需在此基础上进行主成分分析。

2.3.2 主成分分析 对各性状的耐低钾系数进行主成分分析结果(表7)可知,前3个主成分累计贡献率达到78.691%,可反映原始数据信息的78691%,具有较大的信息代表性。主成分1的贡献率为41.686%,主要由株高、干重、钾含量、氮积累量和钾积累量决定;主成分2的贡献率为22488%,主要由茎粗和叶面积决定,主成分3的贡献率为14517%,主要由氮含量、氮积累量决定。

2.3.3 综合评价 根据D值大小可对不同甜瓜品种的耐低钾能力强弱(表8)进行评价, 玉锦脆D值最大,高达0.88,表明其对低钾胁迫最不敏感,耐低钾能力最强;世纪星靓丽瓜姿D值最小,表明此品种对低钾胁迫最敏感,耐低钾能力最弱。对D值进行聚类分析(图3)可知,不同甜瓜品种钾效率可分为3类,Ⅰ类为钾高效型品种,分别有钱隆蜜、雪彤9号、珍甜18、玉锦脆、锦绣翠玉、翠玉6号;Ⅱ类为中度钾高效型品种,分别有众云18、众天8号、菊城9号、花魁、菊城622、天佑甜宝;Ⅲ类为钾敏感型品种,分别有青玉3号、世纪星靓丽瓜姿。

2.4 不同甜瓜品种氮钾双高效鉴定

2.4.1 耐氮钾系数及相关分析 由表9可知,低氮钾条件下, 不同甜瓜品种苗期大多数性状的耐低氮钾系数降低(耐低氮钾系数<1),而部分品种茎粗的耐低氮钾系数升高(耐低氮钾系数>1)。在各性状的耐低氮钾系数中,氮积累量和钾积累量的耐低氮钾系数平均值最小,分别为0.23和0.27,而钾含量的耐低氮钾系数最高,达0.76。不同甜瓜品种间苗期各性状耐低氮钾系数的变异幅度亦较大,为9.97%~50.68%,各性状耐低氮钾系数的变异系数除钾含量外均大于10%。因此,利用单个性状的耐低氮钾系数来鉴定不同甜瓜品种的耐低氮钾性存在一定的片面性。

各性状耐低氮钾系数的相关性分析结果(表10)显示,干重与株高呈极显著正相关;氮含量与株高、干重呈显著正相关;氮积累量与干重、氮含量呈显著正相关;钾积累量与干重、钾含量和氮积累量呈显著或极显著正相关。由于各性状间存在或大或小的相关性,导致提供的信息大量重叠,为消除影响,需在此基础上进行主成分分析。

2.4.2 主成分分析 对各性状的耐低氮钾系数进行主成分分析结果(表11)可知,前3个主成分累计贡献率达到76.558%,可反映原始数据信息的76558%,具有较大的信息代表性。主成分1的贡献率为36.562%,主要由株高、干重、氮积累量和钾积累量决定;主成分2的贡献率为23.809%,主要由株高、茎粗、干重、钾含量、钾积累量决定,主成分3的贡献率为16.187%,主要由茎粗和叶面积决定。

综合分析耐低氮系数、耐低钾系数和耐低氮钾系数主成分分析结果,确立株高、氮积累量和钾积累量是甜瓜苗期氮钾双高效品种鉴定的主要指标,茎粗、叶面积、干重、氮含量、钾含量是次要指标。

2.4.3 综合评价 根据D值大小可对不同甜瓜品种的耐低氮钾能力强弱进行评价(表12),锦绣翠玉D值最大,达0.82,表明其对低氮钾胁迫最不敏感,耐低氮钾能力最强;菊城9号D值最小,表明此品种对低氮钾胁迫最敏感,耐低氮钾能力最弱。对D值进行聚类分析(图4)可知,不同甜瓜品种氮钾效率可分为3类,Ⅰ类为氮钾高效型品种,分别有众天8号、锦绣翠玉、翠玉6号、天佑甜宝;Ⅱ类为中度氮钾高效型品种,分别有青玉3号、钱隆蜜、雪彤9号、菊城622、珍甜18、玉锦脆;Ⅲ类为氮钾敏感型品种,分别有众云18、菊城9号、花魁、世纪星靓丽瓜姿。

2.4.4 氮钾双高效鉴定 综合氮效率和钾效率D值聚类分析结果,初步确立钱隆蜜、雪彤9号、锦绣翠玉既是氮高效又是钾高效型甜瓜品种,世纪星靓丽瓜姿既是氮敏感型又是钾敏感型甜瓜品种,结合氮钾效率D值聚类分析结果,最终确立锦绣翠玉是甜瓜氮钾双高效型品种,世纪星靓丽瓜姿为氮钾双敏感型品种。

2.5 不同氮、钾高效型甜瓜品种产量表现

由表13可知,在低氮、低钾、低氮钾处理下,所有品种的产量均明显下降,但耐低氮、鉀能力不同的品种对其响应不同。对氮高效型品种而言,与CK处理相比,低氮处理产量下降了5.72%~10.26%,氮敏感型品种下降了35.17%;对钾高效型品种而言,与CK处理相比,低钾处理产量下降了6.01%~17.05%,钾敏感型品种下降了16.54%~22.03%;对氮钾高效型品种而言,与CK处理相比,低氮钾处理产量下降了12.91%~18.06%,氮钾敏感型品种下降了36.18%~40.53%,其中氮钾双高效型品种锦绣翠玉产量下降了18.06%,氮钾双敏感型品种世纪星靓丽瓜姿产量下降了39.09%,表明氮、钾高效型品种在低氮、钾胁迫下也可获得相对较高的产量,具有稳产的特性。

3 讨论

3.1 低氮、低钾胁迫对甜瓜苗期生长发育及养分吸收的影响

苗期是群体建成的关键时期,亦是肥料需求矛盾的关键时期[10],根据苗期生长发育及养分吸收情况评价氮、钾高效品种,已在大豆[11-12]、水稻[13]、甘薯[14-15]等多种作物中得到证实。本研究发现,低氮、低钾、低氮钾胁迫导致株高、叶面积、干重、钾含量、产量及氮、钾积累量均显著降低。产量的下降可能主要是由于低氮、低钾、低氮钾胁迫抑制植株生长,限制了光合同化产物和氮、钾素的积累造成的,导致干物质和氮、钾积累量不足,造成减产[16-17]。本研究还发现,低钾胁迫反而能促进茎粗的生长,且低钾处理较低氮、低氮钾处理促进甜瓜对氮素的吸收,这与前人研究结果[18-19]相似。综上所述,低氮、低钾、低氮钾胁迫影响甜瓜生长发育及养分吸收可能主要是通过影响株高和叶面积,降低干物质及氮、钾积累量,最终导致减产。

3.2 甜瓜苗期耐低氮、低钾评价指标的筛选

作物耐低氮、低钾能力受多种机制、因素影响,最终通过产量、生理生化、形态等指标表现出来。不同性状对低氮、低钾胁迫的反映不尽相同,不同研究者筛选的评价指标亦不尽相同[20-21],缺乏统一的标准,因此,选择合理的评价指标是作物耐低氮、低钾能力鉴定的关键因素。范文静等利用隶属函数等方法,确定根长、蔓长、叶片数、地上干重、氮积累量、氮素生理利用效率,可作为甘薯苗期耐低氮能力的鉴定指标[22]。 刘明等利用隶属函数法确定[CM)]了以总干物质增加量、根系干物质增加量、地上部干物质增加量、根钾积累量、总钾积累量和地上部钾积累量可作为鉴定甘薯苗期耐低钾能力的主要指标[23]。张宁利用主成分分析法通过对8份钾高效水稻品种在低氮胁迫下进行筛选,将根冠比、植株氮素利用率、茎叶氮素利用率、根系氮素利用率作为鉴定水稻苗期氮钾双高效性的评价指标[13]。然而,结合低氮、低钾、低氮钾胁迫筛选作物氮钾双高效性方面的研究还未见报道,缺乏氮钾双高效评价标准。

本研究选取与甜瓜苗期耐低氮、低钾能力相关的8个重要指标,认为低氮、低钾、低氮钾胁迫对不同性状指标的影响程度不尽相同,且各性状间存在或大或小的相关性,表明提供的信息大量重叠,直接利用这些性状指标会影响鉴定结果,为消除影响,需在此基础上进行主成分分析。综合耐低氮系数、耐低钾系数、耐低氮钾系数主成分分析结果,确立株高、氮积累量和钾积累量为甜瓜苗期氮钾双高效品种鉴定的主要指标,茎粗、叶面积、干重、氮含量、钾含量是次要指标。在甜瓜氮钾双高效品种鉴定与培育过程中,可以有针对性地选择与综合氮、钾效率评价值密切相关的性状指标,作为鉴定不同甜瓜品种耐低氮钾能力的核心指标。

与前人的研究结果[24-25]相比,本研究筛选出的耐低氮、低钾、低氮钾的指标均是以氮积累量和钾积累量为核心的养分吸收利用相关指标,为甜瓜耐低氮、低钾、低氮钾能力的重要体现,而低氮、低钾、低氮钾胁迫下株高也与苗期甜瓜耐低氮、耐低钾、耐低氮钾能力密切相关。由此可见,除产量是甜瓜耐低氮、低钾、低氮钾能力的重要外在表现外,较高的株高、氮积累量、钾积累量也是衡量甜瓜耐低氮、低钾、低氮钾能力的重要指标。

3.3 甜瓜品种苗期氮钾双高效鉴定

作物耐低氮、低钾能力鉴定的最终目的是划分供试材料的氮、钾高效等级,筛选氮、钾高效品种,以此来降低低氮、低钾胁迫对甜瓜生长发育的影响[26-28]。本试验在主成分分析基础上以氮、钾效率综合评价值为依据,对不同甜瓜品种进行耐低氮、低钾、低氮钾能力排序,并通过聚类分析,将14个甜瓜品种氮效率分成4类,分别为氮高效型、中度氮高效型、中度氮敏感型和氮敏感型品种;将钾效率分成3类,分别为钾高效型、中度钾高效型和钾敏感型品种;将氮钾效率分成3类,分别为氮钾高效型、中度氮钾高效型和氮钾敏感型品种。进一步分析氮效率和钾效率D值聚类结果,初步确立钱隆蜜、雪彤9号、锦绣翠玉既是氮高效又是钾高效型甜瓜品种,世纪星靓丽瓜姿既是氮敏感型又是钾敏感型甜瓜品种,结合氮钾效率D值聚类分析结果,最终确立锦绣翠玉是甜瓜氮钾双高效型品种,世纪星靓丽瓜姿为氮钾双敏感型品种。本研究发现,低氮、低钾胁迫下氮、钾高效型甜瓜品种产量下降幅度最小,而氮、钾敏感型品种产量下降幅度最大,这一结果与甜瓜苗期利用主成分分析、隶属函数、聚类分析等多元统计方法分析的结果基本一致,表明本研究选用的评价方法是准确可行的,可为甜瓜氮、钾养分逆境栽培及品种选育提供理论依据。

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基金项目:国家现代农业产业技术体系建设专项(编号:CARS-25);河南省西甜瓜产业技术体系建设项目(编号:HARS-22-10-G1);河南省农业良种攻关项目(编号:2022010503);河南省农业科学院自主创新项目(编号:2023ZC033);河南省重大科技专项(编号:221100110400)。

作者简介:康利允(1981—),女,河南滑县人,博士,助理研究员,主要从事西甜瓜育种及土壤、营养生理研究。E-mail:kangliyun2004@126.com。

通信作者:赵卫星,博士,副研究员,主要从事西甜瓜育种及栽培生理研究。E-mail:wxzhao2008@163.com。

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