复方中草药对大口黑鲈幼鱼生长、消化和血液生化指标的影响

2024-04-29国洺达李佳昕朱国霞白东清

饲料工业 2024年8期

■ 国洺达王洋李佳昕朱国霞杨广白东清

（天津农学院水产学院，天津市水产生态及养殖重点实验室，天津 300384）

大口黑鲈（Micropterus salmoides）是一种淡水肉食性鱼类[1]，因其适应性强、生长快、肉质美，被引入中国后，产量日益增长，被誉为“第五大家鱼[2]”。国内外研究主要集中在大口黑鲈养殖技术、鱼病治理、繁殖孵化和生长发育等方面，养殖中发现，幼鱼摄食配合饲料易导致消化不好、发育停滞、饲料利用率过低、死亡率高、水环境污染严重、养殖成本高等问题[3]。为此，研究开发大口黑鲈幼鱼用促消化的中草药饲料意义重大。中草药历史悠久，作为一种天然物质，具有助消化，促生长，防病治病的功效，种类繁多、毒副作用小等特点，被广泛用于人类和动物疾病的防治[4-7]。有研究发现，山楂、神曲、半夏在人类上具有促进消化酶的分泌，提高抗氧化能力，增长食欲，促进胃肠运动，保护胃黏膜等作用，并且目前也已应用到水产养殖中[8-10]。李小梅等[11]研究表明饲料中加入山楂、广藿香等中草药能够增强草鱼免疫力。薛继鹏[12]饲喂皱纹盘鲍神曲、山楂等中草药80 d，发现降低了饵料系数，且提高了免疫能力。关于半夏在水产养殖中的研究相对较少，仅有少部分学者使用半夏进行抑菌方面的研究，效果均不明显。目前关于促消化中草药在大口黑鲈养殖中的作用鲜有报道[13]。基于此，在本实验室前期研究的基础上，选择更小规格大口黑鲈幼鱼为研究对象，探讨促消化用复方中草药（山楂、神曲、半夏）对大口黑鲈幼鱼生能、消化及血液生化指标的影响，为循环水条件下大口黑鲈幼鱼健康养殖提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验鱼

试验用750 尾健康大口黑鲈水花取自天津蓝科水产养殖有限公司，在水产生态与养殖国家级实验教学示范中心养殖、驯化20 d 后测量体重和体长，初始体质量为（0.61±0.01） g，初始体长为（3.14±0.02） cm。

1.1.2 试验饲料

购于江苏铭治生物科技有限公司的苗生元（微囊料，营养成分含量：水分7.04%、粗灰分12.35%、粗脂肪17.88%、粗蛋白56.67%）用于暂养期间饲料，正式试验使用通威股份有限公司的通威开口乐4 段特种鱼苗种膨化配合饲料（粒径0.3 mm，成分含量：水分6.18%、粗灰分11.63%、粗脂肪11.61%、粗蛋白51.12%）投喂6 周，第7 周开始使用通威特种鱼苗专用饲料（粒径1 mm，营养成分含量：水分6.05%、粗灰分12.80%、粗脂肪16.02%、粗蛋白56.81%）。

山楂、神曲、半夏均购自九州大药房，将三种中草药分别粉碎后过80 目筛，按6：2：2 比例混匀，参考詹富强[14]的中草药方法对其进行煎煮，待药液冷却后按照2.5‰、5‰、7.5‰、10.0‰喷洒到配合饲料表面，分别制成4 种不同饲料，现用现做，不喷洒组作为对照组，设定为中草药含量为0。

1.2 试验方法

1.2.1 试验设计及饲养管理

采用循环水系统进行养殖，将试验鱼随机分为5组，养殖于60 cm×40 cm×35 cm 的水族缸中，分别投喂0、2.5‰、5‰、7.5‰、10.0‰复方中草药饲料，每组3个重复，每个重复50 尾鱼。试验期间24 h 连续充气，水温为25～28 ℃，溶解氧≥6.0 mg/L，pH 为6.8～7.5，氨氮＜0.2 mg/L，每日投喂3 次（08：00、13：00、18：00），采用表观饱食法。每2 d换一次水，试验周期为8周。

1.2.2 生长指标的测定

试验开始前和试验结束后测量每尾鱼的体重、体长用于计算增重率、摄食率、特定生长率、饲料系数、脏体比、肥满度。

增重率（WGR，%）=100×（W2-W0）/W0

摄食率（FR，%/d）=100×W1/[T×（W2+W0）/2]

特定生长率（SGR，%/d）=100×（lnW2－lnW0）/T

饲料系数（FCR）=W1/（W2-W0）

脏体指数（VSI，%）=100×Wa/Wb

肥满度（CF，%）=100×W2/L3

式中：W0——鱼初体质量（g）；

W2——鱼末体质量（g）；

T——投喂天数（d）；

W1——平均摄食饲料总质量（g）；

Wa——鱼末内脏质量（g）；

Wb——鱼末体质量（g）；

L——鱼末体长（cm）。

1.2.3 样品采集

养殖8 周后禁食12 h 采样，从每个重复组随机选取20 尾鱼用MS-222 进行快速麻醉，称重，测量体长后，用一次性注射器从尾部静脉采血置于离心管中，在4 ℃冰箱中静置2 h 后，在4 ℃下4 000 r/min 离心10 min 收集血清，用于测定生化指标。后在冰盘上剖开腹腔，取出胃、幽门盲囊、肝胰脏和肠道，用预冷生理盐水清洗内外，迅速塑封袋，冻存于-80 ℃冰箱内备用。

1.2.4 样品测定

淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶及血液中生化及抗氧化指标均采用南京建成生物工程研究所有限公司生产试剂盒进行测定。

1.2.5 数据分析

结果采用SPSS 26 统计软件进行分析，采用单因素ANOVA 检验，选择LSD 和Duncan’s 法多重比较，P＜0.05 表示差异显著，数据结果均以“平均值±标准误”来表示。

2 结果与分析

2.1 复方中草药对大口黑鲈幼鱼生长性能的影响

由表1 可知，饲料中不同水平复方中草药对大口黑鲈幼鱼的增重率、特定生长率、摄食率、饲料系数均有不同程度影响，但对脏体指数和肥满度影响不显著（P＞0.05）。

表1 复方中草药对大口黑鲈幼鱼生长性能的影响

5‰组增重率和特定生长率最高，比对照组和10.0‰ 组分别提高了10.0%、7.0%（P＜0.05），但与2.5‰组和7.5%组差别不显著（P＞0.05）；2.5‰组和5.0‰组的摄食率显著低于对照组和10.0‰组（P＜0.05），与7.5‰组差别不显著（P＞0.05）；2.5‰和5.0‰组的饲料系数最低，比对照组和10.0‰组均降低了3.0%（P＜0.05）。可见从生长和饲料利用方面，5.0‰复方中草药添加水平效果较高。

2.2 复方中草药对大口黑鲈幼鱼消化系统消化酶活性的影响

饲料中不同水平复方中草药会显著影响大口黑鲈消化系统消化酶活性，且影响大小与消化酶种类及不同组织有关，结果见表2。

表2 复方中草药对大口黑鲈幼鱼消化酶活性的影响

由表2可知，中草药对胃中α-淀粉酶活性影响不显著（P＞0.05），但对幽门盲囊、肠道以及肝胰脏影响显著，其中，2.5‰组幽门盲囊中α-淀粉酶活性比对照组提高了10%（P＜0.05）；5‰组肠道α-淀粉酶活性最高，显著高于两个高水平组（P＜0.05）；7.5‰组肝胰脏α-淀粉酶活性最高，比对照组提高了60%（P＜0.05）。

复方中草药显著提高胃中脂肪酶活性，2.5‰～10.0‰分别比对照组提高110%、172%、94%、72%（P＜0.05）；7.5‰组幽门盲囊中脂肪酶活性最高，比对照组提高了12%（P＜0.05）；复方中草药显著提高肠道中脂肪酶活性，分别比对照组提高了110%、295%、452%、316%（P＜0.05），其中7.5‰组肠道中酶活性最高；2.5‰～7.5‰肝胰脏中脂肪酶活性显著高于对照和最高水平组（P＜0.05），其中5.0‰组最高，比对照组提高了93%。

5.0‰组胃中蛋白酶活性最高，显著高于其余各组，比对照组提高了20%（P＜0.05）；而复方中草药对幼鱼幽门盲囊蛋白酶活性影响不显著（P＞0.05）；5.0‰～7.5‰组肠道中酶活性分别比对照组提高了70%、59%（P＜0.05），而10.0‰组酶活性显著降低（P＜0.05）；10。0‰组肝胰脏中蛋白酶活性最高，显著高于两个低水平组，其中比对照组提高了50%（P＜0.05）。

同时可以看出，不同组织酶活性大小不同，α 淀粉酶活性肝胰脏＞幽门盲囊＞胃＞肠道，脂肪酶和蛋白酶也是以肝胰脏为最高。不同水平中草药可以影响不同组织中酶活性的分泌。

可见，从促消化角度考虑，复方中草药添加水平以5.0‰为宜。

2.3 复方中草药对大口黑鲈幼鱼血液抗氧化能力的影响

由表3 可知，一定水平复方中草药会显著提高大口黑鲈幼鱼血液抗氧化能力（P＜0.05）。与对照组相比，5.0‰组幼鱼血液中的总抗氧化能力（T-AOC）提高了12%（P＜0.05），70.5‰和5.0‰组的超氧化物歧化酶（SOD）活性分别提高了14%和13%（P＜0.05），7.5‰和10.0‰组谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性分别提高了23%和12%（P＜0.05）；而中草药添加组均可以显著降低血液中丙二醛（MDA）含量，其中2.5‰MDA 含量最低，比对照组降低了157%（P＜0.05）。可见，复方中草药添加组均可有效提高大口黑鲈幼鱼抗氧化能力。

表3 复方中草药对大口黑鲈幼鱼血液生化及抗氧化指标的影响

2.4 复方中草药对大口黑鲈幼鱼血液生化指标的影响

由表3 可知，饲料中一定水平复方中草药会显著影响大口黑鲈幼鱼血液中总蛋白、葡萄糖、总胆固醇、三酰甘油以及低密度脂蛋白胆固醇的含量（P＜0.05）。与对照相比，5.0‰组总蛋白含量显著降低，只与7.5‰组差别不显著（P＞0.05）；2.5‰和5.0‰组葡萄糖含量显著升高，分别比对照组提高了66%、169%（P＜0.05）；5.0‰和7.5‰组血液的总胆固醇含量显著降低，分别比对照组降低了65%、51%（P＜0.05）；5.0‰和7.5‰三酰甘油含量显著降低，分别比对照组降低了30%、45%（P＜0.05）；2.5‰和5‰组低密度脂蛋白胆固醇含量分别比对照组降低了51%、43%(P＜0.05)。可见从脂类代谢水平上来看，5.0‰复方中草药具有较好降脂效果。

3 讨论

3.1 复方中草药对大口黑鲈幼鱼生长的影响

中草药能够有效促进水产动物对营养物质的利用率和机体代谢以及生长发育[15]。在本试验中，5.0‰复方中草药时能够有效促进大口黑鲈的生长和饲料利用。这与国内的一些关于复方中草药在水产动物上的究结果相似。王晨颖[16]发现，饲料中加入8‰神曲、金银花等复方中草药可显著提高花鲈增重率和特定生长率，且显著降低了饲料系数。杨旭红等[17]发现，饲料中加入0.75%败酱、罗摩等复方中草剂可显著提高美国牛蛙终末体重。但曲木等[18]发现，在试验第14天和第21天，饲料中野菊花、党参和黄芪显著降低黄颡鱼增重率。推测原因可能与中草药种类、配方、给药方式、水产动物种类等因素有关。

3.2 复方中草药对大口黑鲈幼鱼消化酶活性的影响

消化酶的活性影响水产动物对营养物质的消化和利用的情况[19]。本试验中，与对照组相比，饲料中复方中草药一定程度上提高了大口黑鲈的消化酶活性，但不同组织、不同消化酶所受影响不同。冒树泉等[20]发现，饲喂黄芪和黄柏可显著提高大鳞副泥鳅肠道与肝胰腺中脂肪酶的活力。刘玉廷[21]发现，10.0‰黄芩、百合等复方中草药投喂泥鳅可使肠道中胃蛋白酶、淀粉酶活性极显著提高。解文丽[22]发现，饲料中添加鱼腥草、白头翁等中草药对花鳗鲡肠道蛋白酶活性无显著影响，这些结论均与本试验结果相似。分析其原因可能与山楂作用有关，山楂可消食开胃，增加消化酶的分泌，加强脂肪酶和蛋白酶的活性[23]。

3.3 复方中草药对大口黑鲈幼鱼抗氧化能力的影响

水产动物机体的酶类抗氧化系统包括SOD、T-AOC、MDA以及GSH-Px等，SOD和GSH-Px可共同作用减少脂质过氧化反应引起的细胞损伤，MDA 是水产动物机体内脂质过氧化反应后的主要组成成分，对鱼体有害[24-26]。本试验中，复方中草药可以有效提高大口黑鲈幼鱼抗氧化能力，其中5.0‰组显著提高血液中T-AOC 和SOD 活性，7.5‰和10.0‰组时可显著提高血液中GSH-Px 活性（P＜0.05），所有中草药添加组均可显著降低血液中MDA 含量（P＜0.05）。杨政高[27]发现，投喂山楂等中草药显著提高珍珠龙胆石斑鱼SOD 活性。狄大可［28］发现，投喂茯苓和山萸肉等中草药可提高褐篮子鱼抗氧化能力，这些结果均可以相互印证。

3.4 复方中草药对大口黑鲈幼鱼血液生化指标的影响

总蛋白能够反映机体对蛋白质吸收、代谢和利用情况[29]。血糖反映水产动物机体营养状况，是水产动物面对应激情况的主要能量来源，因此，在保持葡萄糖动态平衡的基础上，适量地提高血液中的葡萄糖水平有利于增强鱼体的抗应激能力[30]。三酰甘油和总胆固醇能够反映鱼体内血脂代谢状况[31]，低密度脂蛋白胆固醇的含量可以反映机体对脂质转运的情况[32]。在本试验中，5.0‰复方中草药显著降低大口黑鲈幼鱼血液中总蛋白含量，提高葡萄糖含量，显著降低胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇含量。低密度脂蛋白胆固醇含量显著降低，表明降低了代谢水平，但同时也减少了疾病的发生[33]。齐茜[34]等得出，金银花、桑叶和紫草混合可使闪光鲟血糖升高。李金龙等[35]研究表明，饲喂山楂等中草药可有效降低黄鳝血脂含量。