电针风池穴对颈性高血压模型兔血清肾素-血管紧张素-醛固酮系统指标的影响

方浩亮 刘 芳 谢思维 顾逸文 杨雨烨

颈性高血压是一种继发性高血压，由于颈项部位肌肉群和椎体失衡累及血管及神经丛而导致血压升高，可出现眩晕、头昏、肢体麻木等症状[1]。在颈椎病患者人群中，约18%患者出现血压升高[2]。中医传统疗法广泛应用于高血压的预防和治疗，包括针刺疗法。风池穴，因其所处的特殊解剖部位及穴位主治功效，是临床治疗高血压最常用的穴位之一，研究表明选取风池穴进行针刺治疗能有效发挥降压作用[3]。然而，电针风池穴对颈性高血压的治疗机制尚不清楚。本实验采用颈上交感神经节牵拉法建立家兔颈性高血压模型，经电针治疗后观测家兔血清肾素-血管紧张素-醛固酮系统（renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS） 相关指标及股动脉平均动脉血压（mean arterial pressure，MAP）变化情况，旨在探讨电针风池穴对颈性高血压模型兔RAAS 指标的影响，以期为针灸治疗颈性高血压提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 成年健康新西兰家兔18 只，普通级，体质量2.3～2.7 kg，雌雄各半，由浙江中医药大学实验动物中心提供，生产许可证号：SYXK（浙）2021-0012。单笼饲养，保证动物自由饮水和摄食，室内温度15～25 ℃，相对湿度40%～50%，12 h 明暗交替节律光照。适应性喂养1 周后进行实验。将家兔按随机数字表法分为正常组、模型组和电针组，每组6只。本动物实验方案经浙江中医药大学实验动物管理与伦理委员会批准（批准号：IACUC-2021 0705-11）。

1.2 主要仪器与试剂 SEM 扫描电子显微镜（HITACH 公司，型号SU1510）、生物信号采集处理系统（南京美易科技有限公司，型号MedLab-U/4C501H）、life science（深圳市瑞沃德生命科技有限公司，型号Catalog No：R540IE）、酶标仪（美国Rayto，型号RT-6100）；血管紧张素原（angiotensinogen，AGT）、血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）、醛固酮（aldosterone，ALD）及去甲肾上腺素（nore-pinephrine，NE）兔酶联免疫吸附试验（ELISA）检测盒（批 号MB -9046A、MB -9060A、MB -9047A、MB -9045A，江苏酶联生物科技有限公司）。

1.3 造模方法 参考文献造模方法[4]，通过牵拉颈上交感神经节法建立兔颈性高血压模型。正常组不予造模，模型组和电针组于同一时间进行造模。造模方法：家兔麻醉后，置于固定架呈仰卧位。分离股动脉，行股动脉插口，接MedLab 生物信号采集处理系统记录股动脉血压。作颈正中切口，暴露双侧颈交感神经和颈上交感神经节，一侧颈上交感神经节穿线备用。每只家兔用20 g 重量向腹侧上方牵拉一侧颈上交感神经节，牵拉和放松时间均持续10 min，交替2次。分别于牵拉前和牵拉结束后，记录股动脉血压，血压显著升高者视为造模成功。

1.4 干预方法 正常组：仅在电针组治疗时对家兔给予相同的固定。模型组：造模完成后，仅在电针组治疗时对兔给予相同的固定。电针组：造模成功后，即日开始针刺双侧风池穴治疗，取穴参照《实验针灸学》[5]，毫针斜刺深度5 mm，电针连接风池穴，选取疏密波，频率2 Hz，强度2 mA，以家兔安静无躁动且耳廓轻度煽动或肌肉局部收缩为度。每次治疗30 min，1 天1 次，连续治疗7 d。

1.5 观察指标

1.5.1 体质量测量 分别在造模前、造模后第1、4 及7 天采用电子天平测量各组实验兔体质量变化。

1.5.2 平均动脉血压测量 造模前及治疗前、后各检测1 次。分离股动脉，行股动脉插管，接MedLab 生物信号采集处理系统监测操作过程中的股动脉收缩压、舒张压，测量三次，取平均值，计算平均动脉血压。

1.5.3 血清AGT、AngⅡ、ALD 及NE 检测 各实验组家兔经治疗处理7 d 后，于清晨空腹外周采血3 mL，3000 r/min 离心15 min 分离血清，低温保存备检。使用ELISA 试剂盒检测血清AGT、AngⅡ、ALD 及NE 水平，严格按照说明书进行操作，选择相应的波长，用多功能酶标仪测定样品的吸光值，并用样品浓度进行标化。

1.6 统计学方法 应用SPSS 25.0 统计软件包建立实验结果数据库并进行统计学分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，组内比较使用配对t 检验。以P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组家兔体质量比较 造模期间，电针组由于家兔不耐受麻醉药物剂量而出现麻醉致死1 例。造模前，各组家兔体质量组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。随着饲养时间的增加，正常组家兔体质量呈现逐渐增高的趋势。造模后1 d，各组家兔组间体质量差异均无统计学意义（P＞0.05）。造模后4 d，模型组家兔体质量明显低于正常组（P＜0.05），电针组家兔体质量与正常组、模型组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。造模后7 d，模型组家兔体质量仍明显低于正常组（P＜0.05），电针组与正常组之间差异无统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，电针组家兔体质量更高（P＜0.05）。见表1。

表1 各组家兔体质量比较（g，±s）

表1 各组家兔体质量比较（g，±s）

注：电针组造模，予毫针斜刺风池穴5 mm，电针疏密波2 Hz 2 mA，固定30 min；模型组造模，固定30 min；正常组固定30 min；与正常组比较，aP＜0.05；与模型组比较，bP＜0.05

组别正常组模型组电针组兔数665造模前2385.22±102.04 2372.38±149.14 2392.95±140.45造模后1 d 2504.67±106.11 2389.10±97.33 2411.55±194.83造模后4 d 2508.33±97.78 2371.00±73.11a 2494.17±146.91造模后7 d 2651.00±97.54 2480.83±82.64a 2625.83±138.56b

2.2 各组家兔平均动脉血压比较 造模前，各组家兔平均动脉血压均在正常值范围内，各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。造模结束后，模型组、电针组家兔平均动脉血压较同组造模前均明显升高（P＜0.01）；与同期正常组比较，模型组、电针组家兔平均动脉血压均升高（P＜0.01 或P＜0.05），且模型组与电针组组间比较差异无统计学意义（P＞0.05），提示造模成功。治疗7 d 后，模型组家兔平均动脉血压较治疗前无明显变化（P＞0.05），电针组家兔平均动脉血压较治疗前明显降低（P＜0.05）；两组组间比较，电针组家兔平均动脉血压较模型组明显降低（P＜0.05）；与同期正常组比较，模型组家兔平均动脉血压显著升高（P＜0.01），电针组家兔经治疗后平均动脉血压与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 各组家兔治疗前后平均动脉血压比较（mmHg，±s）

表2 各组家兔治疗前后平均动脉血压比较（mmHg，±s）

注：电针组造模，予毫针斜刺风池穴5 mm，电针疏密波2 Hz 2 mA，固定30 min；模型组造模，固定30 min；正常组固定30 min；与同组造模前比较，aP＜0.01；与同组治疗前比较，bP＜0.05；与同期正常组比较，cP＜0.05，dP＜0.01；与同期模型组比较，eP＜0.05

组别正常组模型组电针组兔数665造模前84.33±7.45 80.17±10.21 77.60±9.96治疗前80.67±5.28 94.17±7.96ad 89.40±6.19ac治疗后79.33±2.66 91.50±6.86d 81.40±4.04be

2.3 各组家兔治疗后血清AGT、AngⅡ、ALD 和NE水平比较 治疗后，与正常组比较，模型组家兔血清AGT、ALD 及NE 含量均升高（P＜0.05 或P＜0.01），AngⅡ含量与正常组比较无明显差异（P＞0.05）。电针组家兔血清AGT、AngⅡ、ALD 及NE 水平与正常组比较均无明显差异（P＞0.05）。与模型组比较，电针组家兔血清ALD 明显降低（P＜0.05），血清AGT、AngⅡ及NE 含量均无明显差异（P＞0.05）。见表3。

表3 各组家兔治疗后血清AGT、AngⅡ、ALD 及NE 含量比较（pg/mL，±s）

表3 各组家兔治疗后血清AGT、AngⅡ、ALD 及NE 含量比较（pg/mL，±s）

注：电针组造模，予毫针斜刺风池穴5 mm，电针疏密波2 Hz 2 mA，固定30 min；模型组造模，固定30 min；正常组固定30 min；AGT 为血管紧张素原；AngⅡ为血管紧张素Ⅱ；ALD 为醛固酮；NE 为去甲肾上腺素；与正常组比较，aP＜0.05，bP＜0.01；与模型组比较，cP＜0.05

组别正常组模型组电针组兔数665 AGT 71.81±17.40 126.82±43.95b 95.12±26.18 AngⅡ86.04±20.03 118.67±45.62 91.53±17.53 ALD 103.33±29.83 160.07±38.14a 116.32±36.86c NE 19.29±4.48 32.34±12.49a 23.89±8.71

3 讨 论

颈性高血压以眩晕为主要症状，可归于中医学“眩晕”病范畴，肝肾阴虚、肝阳上亢为其常见中医证型。风池穴是临床改善眩晕症状及发挥降压作用的常用穴位[6]。风池穴为足少阳胆经穴位，足少阳胆经与阳维脉会于风池，又称“诸阳之会”[3]。风性宣散，其性属木；而池属水，能够濡养风木，故风池穴具平肝熄风之效，可治疗内外风动[7]。

RAAS 是调节血压的重要途径之一，在实现循环血容量、水盐代谢以及血流动力学稳定性的调控过程中扮演重要角色。AngⅡ是RAAS 系统中导致血压升高的最主要效应物质，可与对应靶器官或组织的AngⅡ1 型受体结合，直接作用于小动脉，引起平滑肌收缩；刺激肾上腺皮质球状带，促进ALD 分泌引起水钠潴留，增加血容量；同时刺激交感神经元，使NE 分泌增加[8-9]。高血压状态下血清AngⅡ、ALD 含量明显升高，两者水平检测对于诊断与治疗继发性高血压具有至关重要的意义。

目前对于RAAS 系统降压机制的研究主要集中于原发性高血压领域，电针治疗能够降低AngⅡ、ALD 及NE 水平，从而降低血压[10]。相关研究证实针刺可降低高血压动物模型肾素活性，减少AngⅡ、ALD 含量，使血管扩张，外周阻力下降，对RAAS 起到良性调节作用，从而达到降压目的[11]。临床选取风池穴治疗原发性高血压，效果显著，可以减少血液中肿瘤坏死因子-α 等炎性因子分泌，缓解血管纤维化，从而改善血压状况[12]。对于颈性高血压主要以临床研究为主，目前其公认发病机制为因颈部肌肉及骨关节失衡引发血管及神经功能紊乱从而导致血压升高，可选取风池穴等颈部穴位进行针刺、针刀及正骨等治疗，松解颈部肌群并恢复软组织力学平衡状态，从而解除颈部血管及神经受压情况，达到降压目的[13-16]。研究发现电针风池穴能够改善实验小鼠脑供血量，以缓解其因动脉供血不足引发的头痛症状[17]。针刺风池穴能够平衡颈区肌群，改善其紧张度从而缓解神经及血管压迫以发挥降压作用[18]。

本研究结果显示，电针风池穴能够有效降低颈性高血压家兔平均动脉血压，同时能够维持家兔血清AngⅡ、ALD 以及NE 含量处于正常稳定范围，并降低其血清AGT 含量。因此，我们推测：电针风池穴改善颈性高血压模型兔血压的机制不仅与缓解颈部肌群痉挛、改善血管及神经受压情况相关，与抑制RAAS 系统活性亦存在关联，但由于实验样本量受限，具有偶然性及误差，仍需要进一步扩大研究。