老年冠心病患者PCI术后血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平变化及意义

郑彬彬 范晓涌 柴辉 佟勤红 吴瑷斌

(兰州市第一人民医院心血管内科,甘肃 兰州 730050)

冠心病是威胁我国居民生命健康的主要疾病之一,随着生活、工作压力的增加及人口老龄化,其发病率呈上升趋势〔1〕。经皮冠状动脉介入(PCI)能够快速开通血管,改善心肌血流灌注,被广泛用于冠心病的临床治疗〔2〕。但PCI术后远期疗效受多种因素影响,准确评估患者预后水平对术后治疗方案的合理制定具有重要参考价值。细胞间黏附分子(ICAM)-1属于免疫球蛋白超家族,在血管内皮细胞表面黏附后参与炎症反应过程,与动脉粥样硬化的发生与发展密切相关〔3〕。微小RNA(miR)-19b在胸主动脉夹层患者血浆中含量明显下降,miR-19b低表达会抑制血管平滑肌细胞增殖〔4〕。视黄醇结合蛋白(RBP)4是肝脏合成的维生素转运蛋白,广泛分布于血液、尿液等体液中,作为维生素A的特异性载体蛋白,参与其转运过程〔5〕。相关研究显示,RBP4与2型糖尿病、脂代谢异常等慢性病密切相关,可能通过内分泌代谢、慢性炎症反应等发挥作用,而2型糖尿病、高脂血症等慢性病是冠心病的危险因素〔6〕。本研究旨在探讨老年冠心病患者PCI术后血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平变化及意义。

1 对象与方法

1.1研究对象 选取2021年7月至2022年5月因行PCI术在兰州市第一人民医院住院治疗的老年冠心病患者115例。入选标准:①年龄≥60岁,冠状动脉造影检查显示主要冠状动脉和大分支的狭窄程度达到50%及以上;②符合PCI术适应证,自愿接受PCI术治疗;③配合完成随访。排除标准:①近1年有冠状动脉支架植入史者;②合并恶性肿瘤、自身免疫性疾病者。其中男59例,女56例;年龄60～74岁,平均(69.03±7.91)岁;体质量指数(BMI)21～27 kg/m2,平均(23.19±1.78)kg/m2;饮酒史19例,吸烟史17例。根据PCI术后6个月的随访结果分为预后不良组24例,预后良好组91例。本研究经医院伦理委员会审核通过,患者自愿参与本研究并签署知情同意书。

1.2资料收集 收集老年冠心病患者性别、年龄、BMI、饮酒史、吸烟史、发病至球囊扩张时间、多支病变、病程、支架长度、支架直径,病变部位(右冠状动脉、左前降支、左回旋支),冠状动脉Gensini评分。其中Gensini评分根据冠状动脉造影结果对每支冠状动脉进行定量评定:冠状动脉造影狭窄程度≤25%计1分,26%～50%计2分,51%～75%计4例,76%～90%计8分,91%～99%计16分,100%计32分;冠状病变部位为第二对角支、后侧支系数为0.5;左前降支远段、后降支、左回旋支选段、第一对角支、右冠状动脉系数为1;左前降支中段、左回旋支中段系数为1.5;左前降支近段、左回旋支近段系数为2.5;左主干系数为5。

1.3血清ICAM-1、RBP4浓度检测 分别于PCI术前、术后3 d采集外周静脉血5 ml,2 000 r/min离心15 min,收集血清后-20 ℃保持待测。酶联免疫吸附试验测定患者PCI前、术后3 d血清ICAM-1、RBP4浓度,其中ICAM-1试剂盒购于康朗(上海)生物科技有限公司,RBP4试剂盒购于上海一研生物科技有限公司。

1.4时实荧光定量(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-19b表达水平 将血清转入EP管中,按1 mg/μl的比例加入预冷的Trizol提取总RNA,加入预热的焦碳酸二乙酯处理并经高温高压灭菌的超纯水,完全溶解后测定RNA纯度,-80 ℃保存。使用cDNA合成试剂盒逆转录得到cDNA,保存于-20 ℃备用。PCR扩增按照试剂盒说明书进行。miR-19b上游引物5′-CCCTTTTGACCTGCACCTCCA C-3′,下游5′-ACCAAAGTGTCGACCTAAACGG-3′,扩增产物片段115 bp。U6上游引物5′-TGTCCAGAAA CGCCTAACTACTC-3′,下游5′-GAATCACAATGTGG GCCACTGAG-3′,扩增产物片段180 bp。PCR体系20 μl:10倍反应缓冲液3 μl,cDNA模板1 μl,dNTP 2 μl,上游引物1 μl,下游引物1 μl,Taq酶0.5 μl,双蒸馏水11.5 μl。共反应40个循环,以U6为内参计算相对表达量。

1.5随访 PCI术后进行6个月随访,记录主要不良心血管事件发生情况,包括再发心绞痛10例、冠状动脉再狭窄9例、再发心肌梗死3例、心源性死亡2例,纳入预后不良组;其余91例纳入预后良好组。

1.6统计学分析 采用SPSS25.0统计学软件进行t检验、χ2检验、多因素Logistic回归分析及受试者工作特征(ROC)曲线分析。

2 结 果

2.1两组人口学特征及临床指标比较 预后不良组发病至球囊扩张时间、多支病变比例、冠状动脉Gensini评分明显高于预后良好组(P<0.05);性别比例、年龄、BMI、饮酒史比例、吸烟史比例、病程、支架长度、支架直径、病变部位差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2手术前后血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b表达比较 老年冠心病患者PCI术后3 d血清ICAM-1、RBP4水平低于手术前,血清miR-19b表达水平高于手术前,差异有统计学意义(P<0.01)。见表2。

表2 手术前后血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b比较

2.3两组血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b表达比较 预后不良组血清ICAM-1、RBP4水平高于预后良好组,血清miR-19b表达水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 两组血清ICAM-1、RBP4水平及miR-19b表达比较

2.4老年冠心病患者PCI预后的多因素Logistic回归分析 以老年冠心病患者PCI预后情况为因变量(预后不良=1,预后良好=0),发病至球囊扩张时间、多支病变比例、冠状动脉Gensini评分及血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平为自变量,进行多因素Logistic回归分析显示,多支病变比例、冠状动脉Gensini评分及血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平是PCI预后的独立影响因素(P<0.01)。见表4。

表4 老年冠心病患者PCI预后的多因素Logistic回归分析

2.5血清ICAM-1、miR-19b、RBP4对老年冠心病患者PCI预后的预测价值 构建ROC曲线,以血清ICAM-1、miR-19b、RBP4评估老年冠心病患者PCI预后的敏感度为纵坐标,以1-特异性为横坐标,结果显示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4对老年冠心病患者PCI预后均具有较高的预测价值(P<0.01)。将血清ICAM-1、miR-19b、RBP4纳入Logistic回归模型结果显示,各指标联合检测的预测价值最高〔曲线下面积(AUC=0.942〕。见表5、图1。

3 讨 论

冠心病是全球患病率和死亡率最高的疾病之一,每年约2 000万人死于心脏病。随着我国社会经济的快速发展、居民生活方式的转变,特别是伴随人口老龄化的加速,冠心病患者数呈逐年上升趋势〔7〕。PCI治疗、抗凝药物、抗血小板药物是目前临床治疗冠心病的主要手段。虽然PCI治疗能够快速控制和缓解冠心病病情,但无法痊愈,治疗后仍需注意全身代谢、血小板治疗、其他冠状动脉狭窄等,改善预后水平。流行病学研究显示,即使冠心病患者已接受PCI治疗,且接受双抗、他汀等治疗,2年内仍有10%以上的患者出现心肌梗死、支架血栓、脑卒中等心脑血管不良事件,老年冠心病患者因身体功能下降,心脑血管不良事件的发生率更高〔8〕;因此,准确评估老年冠心病患者PCI预后对治疗、随访方案的合理制定,改善预后水平具有重要意义。正常生理状态下人体ICAM-1低表达,冠状动脉的血管内皮细胞在缺血状态下会大量分泌炎症细胞因子,进而上调ICAM-1表达〔9〕。研究显示,ICAM-1可上调内皮细胞中的促白细胞黏附组织,进而促进炎症过程,加速血管活性物质合成与释放,引发心肌缺血、心肌缺氧〔10〕。亦有研究显示,冠心病患者处于进展期时,内皮细胞中的ICAM-1逐渐转变为平滑肌细胞、巨噬细胞,促进平滑肌增生,增加PCI后冠心病患者不良预后的发生风险〔11〕。

miRNA能够稳定存在于人体组织细胞中,研究显示,急性冠状动脉综合征患者血清miR-19b表达水平明显下降,可能是病情进展的潜在标志物〔12〕。亦有研究显示,miR-19b过表达能够减轻血管内皮损伤,降低血管内炎症反应程度〔13〕。RBP4是肝脏分泌的脂肪因子,能够参与胰岛素抵抗、脂代谢异常、炎症反应等过程〔14〕。研究报道显示,RBP4与冠心病、急性冠状动脉综合征密切相关,其水平变化可用于评估冠心病病情严重程度和预后〔15〕。糖脂代谢异常参与冠状动脉粥样硬化的发生与发展,而冠状动脉粥样硬化是冠心病的主要病理基础。冠心病患者血清RBP4水平越高,冠状动脉病变严重程度和病变血管支数越多,症状越严重〔16〕。本研究结果提示,PCI治疗能够降低患者ICAM-1、RBP4表达,升高miR-19b表达,进而改善老年冠心病患者病情。

目前关于血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平变化与老年冠心病患者PCI治疗预后关系的研究仍未见相关报道。本研究结果提示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4与老年冠心病患者PCI治疗预后密切相关,可用于PCI治疗预后评估。进一步分析显示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4联合检测对PCI治疗预后的预测价值最高,同时还应当观察患者冠状动脉病变情况,合理制定治疗方案,改善患者预后水平。