MCUS 联合CYFRA21-1、TAP 及SCCA 检测在食管癌术前分期诊断中的应用

刘洁 李泽宇 高倩 贾璐璐

食管癌是临床常见的、致死率较高的消化系统恶性肿瘤，其早期症状隐匿，绝大多数患者确诊时已进入中-晚期病程，治疗干预效果差。相关研究认为，治疗前准确的影像学分期可使患者得到更加合理的治疗方案，有效提高预后［1］。探头超声内镜（Mini-probe endoscopic ultrasonography，MCUS）是基于传统超声内镜附加微探头，其兼顾传统内镜与超声的作用，不仅可仔细观察到肿瘤病变的形态，还可分辨肿瘤的浸润程度［2］。在临床上肿瘤标志物不仅可用于辅助诊断食管癌，并在一定程度上可判断肿瘤的发展进程以及评估患者预后［3］。细胞角蛋白19 片段抗原（Cytokerantin-19-fragment，CYFRA21-1）、鳞状细 胞癌抗 原（Squamous cell carcinoma antigen，SCCA）是常见的肿瘤血清标志物，可对食管癌的发病情况进行评估。肿瘤异常蛋白（Tumor abnormal ptotein，TAP）是肿瘤细胞完成代谢后分泌的一种糖蛋白，其可判断肿瘤的发生以及评估肿瘤的发展进程［4］。对此，本文旨在分析MCUS 联合CYFRA21-1、TAP 及SCCA 检测在食管癌术前分期诊断中的应用价值。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

选取2020 年8 月至2022 年11 月期间于郑州大学第一附属医院进行治疗的食管癌患者137 例为研究对象。纳入标准：①均符合食管癌的诊断标准［5］；②既往未采用手术治疗、化疗治疗者；③临床资料完整者；排除标准：①合并患有其他部位恶性肿瘤；②转移性食管癌；③具有精神、语言障碍者；④重要器官功能衰竭者。其中男86 例，女51 例；平均年龄（55.74±5.38）岁；肿瘤部位：上段食管19 例，中段食管70 例，下段食管48 例；病理分型或组织学分型：鳞状细胞癌117 例，腺样结构食管癌12 例，小细胞神经内分泌癌8 例；病理学分 期［6］：T1患者27 例，T2患者31 例，T3患者59 例，T4患者20 例；分化程度：低分化32 例；中分化60 例，高分化45 例；TNM 分期：Ⅰ～Ⅱ期76 例，Ⅲ～Ⅳ期61 例。本研究经医院伦理委员会批准同意。所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 CYFRA21-1、SCCA 检测

抽取两组研究对象5 mL 空腹静脉血，所有样本均在室温下放置30 min，使用血型血清学离心机HT12MM（转速为3 500 r/min、离心半径为8 cm）离心8 min，提取血清，于4℃保存。采用磁微粒化学发光法检测CYFRA21-1（试剂由泰州泽成生物技术有限公司提供）。采用电化学发光法对SCCA 进行检测，仪器采用：Roche 电化学发光仪E170 型号，试剂与仪器均由瑞士Roche 公司提供。严格按照试剂盒说明书执行。

1.2.2 T AP 检测

采集患者3 mL 血液，加凝聚助剂干燥，制成血液标本，利用生物显微镜、摄像机图像传感器、计算机TAP 检测系统进行观察、检测。阳性：观察到有TAP 颗粒，且颗粒呈现网结状花。阴性：TAP颗粒呈雪花状、散沙状或树枝状，且为黑褐色［7］。

1.2.3 MCUS 检查

应用Olympus XQ200 电子胃镜与Fujinon SP-501 MCUS，调整频率至15～20 Hz，探头直径为2.6 cm，进行360°全方位旋转扫描，并采用Sony UP-8900 超声黑白打印机进行检测。患者在检查前肌注地西泮（西安利君制药有限责任公司；国药准字H61 022214；规格2 mL：10 mg）5～10 mg，嘱其采取半坐卧位，自制水囊套在内镜前端，插入病灶节段后，注入无气水20～30 mL，直至水囊充盈且紧贴病灶。将微型探头从内镜活检孔中送进食管，再慢慢退出，并在直视下扫描病灶全段。正常食管癌MCUS 图像显示为5 层结构：黏膜层、黏膜肌层、黏膜下层、固有肌层以及外膜。肿瘤侵犯标准［8］：食管癌各架构的增厚、中断或破坏，不均匀的软组织回声影，或肿瘤与周围组织界线的消失或融合。MCUS 分期标准［8］：T1：肿瘤侵犯黏膜或黏膜下层边界不清，固有肌层尚完整；T2：肿瘤侵犯但未超过固有肌层；T3：肿瘤侵犯至食管周遭组织，但未侵犯临近器官；T4：肿瘤侵犯至临近器官。

1.2.4 病理学分期标准［7］

T1：肿瘤仅侵犯食管黏膜或黏膜下层；T2：肿瘤侵犯食管肌层；T3：肿瘤侵犯食管外膜层；T4：肿瘤侵犯周围组织或临近器官。

1.3 观察指标

分析血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 阳性表达联合MCUS 分期对食管癌病理学分期的诊断价值：包括敏感度、特异度及准确率，n 代表总例数，a 表示真阳性，b 表示假阳性，c 表示假阴性，d 表示真阴性，灵敏度=a/（a+c），特异度=d/（b+d），准确率=（a+d）/n。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0 统计软件进行统计分析，计量资料采用（）表示，两组间比较采用t检验，多组间采用F检验；计数资料通过n（%）表示，并采用χ2检验；均以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 MCUS 分期与病理学分期的关系

MCUS 诊断食管癌病理学分期的综合准确率为88.89%。见表1。

表1 食管癌MCUS 分期与病理学分期的关系Table 1 Relationship between MCUS stage and pathological stage of esophageal carcinoma

2.2 血清CYFRA21-1、SCCA 水平以及TAP 阳性表达与病理特征的关系

血清CYFRA21-1、SCCA 水平：T3-4＞T1-2、低分化＞高、中分化、Ⅲ～Ⅳ期＞Ⅰ～Ⅱ期，差异有统计学意义（P＜0.05）；不同病理分期、分化程度以及TNM分期的TAP 阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 血清CYFRA21-1、SCCA 水平以及TAP 阳性表达与病理特征的关系［（），n（%）］Table 2 Relationship between serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression with pathological features［（），n（%）］

表2 血清CYFRA21-1、SCCA 水平以及TAP 阳性表达与病理特征的关系［（），n（%）］Table 2 Relationship between serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression with pathological features［（），n（%）］

2.3 MCUS 分期与血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 阳性表达之间的关系

T1与T2期的 血清CYFRA21-1、SCCA 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；T3、T4期较T1与T2期患者的血清CYFRA21-1、SCCA 水平升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；MCUS 不同分期的TAP阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 MCUS 分期与血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP阳性表达之间的关系［（），n（%）］Table 3 Relationship between MCUS staging and serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression［（），n（%）］

表3 MCUS 分期与血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP阳性表达之间的关系［（），n（%）］Table 3 Relationship between MCUS staging and serum CYFRA21-1，SCCA levels，and TAP positive expression［（），n（%）］

注：与T1 相比较，aP＜0.05；与T2 相比较，bP＜0.05；与T3 相比较，cP＜0.05。

2.4 血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 阳性表达联合MCUS 分期与病理学分期的比较

在MCUS 判断T 分期过度的11 例患者中，有8 例MCUS 定为T3期，在分期过低的6 例患者中，有3 例MCUS 定为T2期。血清CYFRA21-1、SCCA水平、TAP 阳性表达联合MCUS 检查对食管癌病理学分期判断的准确率提高至95.62%。见表4。

表4 血清CYFRA21-1、SCCA 水平、TAP 阳性表达联合MCUS 分期与病理学分期的比较Table 4 Comparison of serum CYFRA21-1，SCCA levels，TAP positive expression combined with MCUS staging and pathological staging

3 讨论

食管癌是常见的消化道肿瘤，其发病率位于全部恶性肿瘤的第六位，死亡率位于全部恶性肿瘤的第四位，其主要与饮食、生活习惯、癌前疾病、感染和遗传等因素有关。食管癌早期症状一般较轻，持续时间较短，常反复出现，而中晚期症状主要为吞咽困难、反流、疼痛。

MCUS 结合超声与内镜技术，近距离在食管内扫描，不仅可显示黏膜病变程度，还可判断肿瘤浸润深度，该技术现已被广泛运用于诊断食管癌的术前分期。本次研究发现，MCUS 判断食管癌病理学分期的准确率较高（88.89%），尤其是对早期肿瘤浸润的判断，但对于T2与T3病变的判断则有一定误差。当食管癌处于T2与T3病变病变时，肿瘤周围发生炎性改变和纤维化，因此易高估病变的T 分期［9］。此外，何建斌等［10］学者亦指出，MCUS 对食管癌患者T 分期的诊断存在差异，原因在于探头的探测范围有限，对于肿瘤的深层浸润难以检测，且周围气管内的气体会影响检测结果。

当机体内出现肿瘤细胞时，蛋白酶被充分激活，进而加快细胞降解速度，造成过多细胞角蛋白片段进入血液，使血清CYFRA21-1 浓度异常升高［11］。SCCA 在正常机体内表达水平较低，但当出现食管鳞癌病变时，会大量生成SCCA2 编码的酸性产物，进而导致血清SCCA 表达水平明显上升，且其水平变化与食管癌细胞的活跃程度有一定关联。有研究称，联合CYFRA21-1、SCCA 检测食管癌的准确度会大幅度提高，一定程度上避免了单独检测出现漏诊等情况，还可有效提高诊断的阳性检出率［12-13］。本文显示，随着分期的增加，CYFRA21-1、SCCA 水平也呈异常升高状态。故可通过检测CYFRA21-1、SCCA 等标志物为临床诊断食管癌提供一定参考。

TAP 是癌细胞增生的重要特征，可通过监测其基因水平的变化，从而了解癌细胞病变TAP 数量及程度。当癌变细胞的TAP 数量及程度达到一定量时就会向血液扩散，从而导致外周血中的TAP 水平明显升高［14］。故可通过检测TAP 的表达水平了解食管癌癌细胞的变化情况，从而评估患者病情程度，辅助诊断。研究报道，TAP 检测结果为阴性并不代表不存在癌细胞，可能是癌细胞的代谢水平较低，导致TAP 分泌、合成能力降低，因此TAP 检测结果为阴性的患者实际上也可能存在癌细胞［15］。因此，TAP 检测对病情评估及疾病诊断方面具有参考价值，但其于食管癌发生、发展的相关性有待进一步证实。本研究结果说明以上指标联合检测可提高对食管癌分期的诊断效能，MCUS、血清CYFRA21-1、SCCA 水平弥补了TAP检测技术中对疾病病变的了解程度，TAP 则是增加了对肿瘤细胞直接作用的了解，进而提高了诊断的准确性。

综上所述，MCUS 联合血清CYFRA21-1、SCCA 水平及TAP 检测可准确诊断食管癌术前分期，可为临床治疗食管癌提供可靠依据。