外周血T 淋巴细胞、IL-4 及趋化因子CXCL13 在神经梅毒患者中的检测意义

彭超 林阳 何俐

梅毒是一种常见的慢性、系统性、全身性传染性疾病，主要由梅毒螺旋体（Treponema pallidum，TP）引起，主要传播途径为性传播，间接接触途径为传染、输血、哺乳及胎盘等［1］。相关临床实践资料显示，有部分梅毒患者经临床统一规范治疗后症状可得到显著改善，但实验室检测血清学指标仍旧为持续阳性，进而发展成为血清固定；有部分患者由于TP 侵犯中枢神经系统而发展成为神经梅毒［2-3］。目前，梅毒进展为血清固定及神经梅毒的具体机制尚不明确，且缺乏根治治疗手段，给临床诊疗带来了挑战［4］。梅毒的发病和病情进展与细胞免疫异常密切联系，但具体机制和相关指标尚未完全明确［5］。T 淋巴细胞是人体免疫系统中的重要成分，对于抵抗感染和疾病恢复具有关键作用；而白介素-4（Interleukin-4，IL-4）是一种由T 淋巴细胞分泌的细胞因子，在免疫反应和炎症过程中发挥重要作用。趋化因子CXC 配体13（Chemokine CXC ligand 13，CXCL13）是一种小分子蛋白质，可以吸引白细胞迁移到炎症部位。研究表明，CXCL13 在神经梅毒患者的脑脊液中表达水平升高，可能参与了神经梅毒的发病和进展［5］。本研究旨在分析外周血T 淋巴细胞、IL-4 及CXCL13 水平检测在神经梅毒患者中的临床意义，具体报道如下。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

选取2020 年9 月至2023 年1 月四川大学华西医院收治的188 例梅毒患者作为研究对象，其中包括62 例血清固定患者（血清固定组）及126 例神经梅毒患者（神经梅毒组）。神经梅毒组根据TP 侵犯部位和症状［6］分为无症状31 例，早期（主要损害脑脊膜及血管）58 例及晚期（主要损害脑和脊髓实质）37 例。另选取同时期于本院门诊和体检就诊的正常健康者（对照组）80 名。血清固定组男36例，女26 例，平均年龄（41.57±5.04）岁，平均病程（5.71±1.43）年；神经梅毒组男72 例，女54 例，平均年龄（42.21±1.66）岁，平均病程（5.93±1.51）年。对照组男46 例，女34 例，平均年龄（42.31±5.22）岁。三组在性别、年龄上比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经院医学伦理委员会批准通过，受试者及其家属已签署知情同意书。

纳入标准：①梅毒患者符合《2015 年美国疾病控制中心性传播疾病诊断和治疗指南中》［6］中梅毒及神经梅毒诊断标准；②全部研究对象18 岁以上者；③全部研究对象临床资料齐全。排除标准：①合并恶性肿瘤者；②合并其他传染病或结缔组织疾病者；③合并其他性病者；④妊娠、孕妇者。

1.2 方法

对照组于就诊当日，梅毒患者于入院次日晨起抽取静脉血3 mL，注入红色抗凝管中，及时送往实验室，其中1.5 mL 进行离心（3 000 r/min，10 min，离心半径8 cm），采取上清液；另1.5 mL 无需进行离心，均放置4℃冰箱以待检测。采用流式细胞仪DxP Athena（杭州敬润科技有限公司）检测T 淋巴细胞亚群（抗凝全血）；采用酶联免疫吸附法检测IL-4、CXCL13 水平（血清）。IL-4、CXCL13 试剂盒均来自杭州联科生物技术股份有限公司。

1.3 统计学方法

采用SPSS 21.0 软件进行统计分析，计量资料以（）表示，两组间比较采用独立t检验，多组间比较采用单因素方差（F检验）；计数资料已n（%）表示，采用χ2检验；绘制ROC 曲线分析外周血T 淋巴细胞、IL-4 及趋化因子CXCL13 联合检测对早期神经梅毒识别的诊断价值；以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同人群外周T 淋巴细胞亚群水平

CD4+、CD4+/CD8+值：神经梅毒组＜血清固定组＜对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 不同人群外周T 淋巴细胞亚群水平比较（）Table 1 Comparison of peripheral T lymphocyte subsets in different populations（）

表1 不同人群外周T 淋巴细胞亚群水平比较（）Table 1 Comparison of peripheral T lymphocyte subsets in different populations（）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与血清固定组比较，bP＜0.05。

2.2 不同人群IL-4 及趋化因子CXCL13 水平

IL-4、CXCL13 水平：神经梅毒组＞血清固定组＞对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同人群IL-4 及趋化因子CXCL13 水平比较（）Table 2 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different populations（）

表2 不同人群IL-4 及趋化因子CXCL13 水平比较（）Table 2 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different populations（）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与血清固定组比较，bP＜0.05。

2.3 神经梅毒组不同TP 侵犯部位和症状的外周T 淋巴细胞亚群水平

CD4+、CD4+/CD8+值：晚期组＜早期组＜无症状组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 神经梅毒组不同TP 侵犯部位和症状的外周T 淋巴细胞亚群水平比较（）Table 3 LComparison of peripheral T lymphocyte subsets in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

表3 神经梅毒组不同TP 侵犯部位和症状的外周T 淋巴细胞亚群水平比较（）Table 3 LComparison of peripheral T lymphocyte subsets in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

注：与无症状组比较，aP＜0.05；与早期组比较，bP＜0.05。

2.4 神经梅毒组不同TP 侵犯部位和症状的IL-4及趋化因子CXCL13 水平

IL-4、CXCL13 水平：晚期组＞早期组＞无症状组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 神经梅毒组不同TP 侵犯部位和症状的IL-4 及趋化因子CXCL13 水平比较（）Table 4 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

表4 神经梅毒组不同TP 侵犯部位和症状的IL-4 及趋化因子CXCL13 水平比较（）Table 4 Comparison of IL-4 and CXCL13 levels in different TP invasion sites and symptoms in neurosyphilis group（）

注：与无症状组比较，aP＜0.05；与早期组比较，bP＜0.05。

2.5 外周血T 淋巴细胞、IL-4 及趋化因子CXCL13单一、联合检测对神经梅毒早期识别的诊断价值

ROC 显示，外周血T 淋巴细胞、IL-4 及趋化因子CXCL13 检查灵敏度为89.68%，特异度为91.11%，AUC=0.862，均高于三指标单一检查（P＜0.05）。见表5、图1。

图1 ROC 曲线Figure 1 ROC curve

表5 外周血T 淋巴细胞、IL-4 及趋化因子CXCL13 单一、联合对神经梅毒早期识别的诊断价值Table 5 Diagnostic value of peripheral blood T lymphocytes，IL-4，and chemokine CXCL13 single and combined for early recognition of neurosyphilis

3 讨论

据临床实践病例显示，早期神经梅毒患者症状隐蔽，且症状与神经受累部位密切相关［7］。然而，影像学检查在此类病例时缺乏特异性［8］。有数据显示，梅毒患者若不及时予以规范统一治疗，有将近1/3 患者可进展为晚期神经梅毒，对患者心脑血管系统均有严重影响，最终可导致患者死亡［9-10］。

本研究结果显示：血清固定组及神经梅毒组外周血T 淋巴细胞中CD4+、CD4+/CD8+值显著低于对照组，且神经梅毒组更低。CD4+T 细胞代表辅助性T 细胞分化抗原，若CD4+T 细胞减少，可能导致辅助性T 细胞的免疫应答减弱，影响抗梅毒螺旋体的免疫反应；CD8+T 细胞代表抑制性T 细胞分化抗原，若CD8+T 细胞减少，可能反映抑制性T 细胞的免疫应答减弱，导致炎症反应的持续或加剧，故CD4+和CD8+T 细胞水平的表达与机体免疫功能有着直接联系［11］。Brandt 和Hedrich 的研究表明［12］，梅毒血清固定患者较健康人群的CD4+T 淋巴细胞水平和CD4+/CD8+比值下降，本组研究结果与其一致。另一方面，在神经梅毒患者中，早期和晚期患者CD4+、CD4+/CD8+值较无症状者均显著下降，晚期下降程度更大，提示T 淋巴细胞亚群与神经梅毒病情进展密切联系。Logo 等［13］学者研究发现，神经梅毒患者与普通梅毒患者均出现了Th1/Th2 免疫漂移的现象，并且梅毒患者的血清IL-4 含量明显增高。本数据分析提示IL-4 对于神经梅毒早期诊断有重要价值。分析原因为：IL-4 是炎性因子之一，主要为Th2 细胞产生，器能对细胞免疫功能进行抑制，对Th2 细胞具有促使分化定向的作用，因而IL-4 的异常往往提示机体免疫功能的异常，而随着神经梅毒分期的进展，免疫应答过程中Th1 优势变化逐渐转变为Th2 优势变化，免疫水平处于不断降低过程，从而导致IL-4 水平逐渐上升［14-15］。CXCL13 是CXC 趋化因子家族的成员，主要由次级淋巴组织、淋巴结和树突细胞分泌，可反映中枢神经系统感染后的免疫反应。既往临床多研究脑脊液中CXCL13 在神经梅毒中的临床意义。本组研究结果提示外周血CXCL13 表达异常对神经梅毒的早期诊断及病情评估也有着重要意义。经ROC 曲线进一步分析证实得：外周血T 淋巴细胞、IL-4 及趋化因子CXCL13 联合检测在神经梅毒早期识别诊断中的应用价值更高，这一发现为神经梅毒的早期诊断提供了新的方向，有助于提高诊断准确性和及时性，从而改善患者的治疗和预后。

综上所述，外周血T 淋巴细胞、IL-4 及趋化因子CXCL13 水平变化与神经梅毒患者病情密切联系，三者联合检测度对神经梅毒的早期识别诊断具有更好的灵敏度、特异度，在神经梅毒病情进展评估及临床指导上具有更好的应用价值。