YKL-40、sTREM-1、HMGB1在重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中的表达及意义

王冬旭　史雪

【摘要】 目的：探究甲殼质酶蛋白40（YKL-40）、可溶性髓系细胞触发受体-1（sTREM-1）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中的表达及意义。方法：选取2020年4月—2022年4月西藏自治区人民医院接收的重症肺炎患儿100例为研究对象。所有患儿均采集血清、支气管肺泡灌洗液，并对血清、支气管肺泡灌洗液中的YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平进行检测，分析不同情况患儿YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平，并探讨三个因子之间的相关性。结果：与血清比较，支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平均明显更高，差异均有统计学意义（P<0.05）。不同性别、年龄重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；不同感染类型、胸腔积液、发绀情况的重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；细菌性肺炎、有胸腔积液、有发绀重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平均明显高于支原体肺炎、病毒性肺炎、无胸腔积液、无发绀重症肺炎患儿，差异均有统计学意义（P<0.05）。支气管肺泡灌洗液中，YKL-40与sTREM-1呈正相关（r=0.487，P<0.001）；YKL-40与HMGB1呈正相关（r=0.607，P<0.001）；sTREM-1与HMGB1呈正相关（r=0.544，P<0.001）。结论：YKL-40、sTREM-1、HMGB1在重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中异常升高，三者可能共同参与此病的进展。

【关键词】 甲壳质酶蛋白40 可溶性髓系细胞触发受体-1 高迁移率族蛋白B1 重症肺炎 支气管肺泡灌洗液

Expression and Significance of YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 in Bronchoalveolar Lavage Fluid of Children with Severe Pneumonia/WANG Dongxu， SHI Xue. //Medical Innovation of China， 2024， 21（04）： -123

[Abstract] Objective： To investigate the expression and significance of chitinase protein 40 （YKL-40）， soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1 （sTREM-1） and high mobility group box 1 （HMGB1） in bronchoalveolar lavage fluid of children with severe pneumonia. Method： A total of 100 children with severe pneumonia admitted to Tibet Autonomous Region People's Hospital from April 2020 to April 2022 were selected as the study objects. Serum and bronchoalveolar lavage fluid were collected from all children， and YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 levels in serum and bronchoalveolar lavage fluid were detected， and the levels of YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 in children with different conditions were analyzed， and the correlation among the three factors was explored. Result： Compared with serum， YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 levels in bronchoalveolar lavage fluid were significantly higher， the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences of YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 levels in bronchoalveolar lavage fluid of severe pneumonia children with of different gender and age （P>0.05）. The levels of YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 in bronchoalveolar lavage fluid of severe pneumonia children with different infection types， hydrothorax and cyanosis condition were statistically significant （P<0.05）. The levels of YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 in bronchoalveolar lavage fluid of children with severe pneumonia of bacterial pneumonia， with hydrothorax and cyanosis were significantly higher than those of children with mycoplasma pneumonia of mycoplasmal pneumonia， viral pneumonia， no hydrothorax and cyanosis， the differences were statistically significant （P<0.05）. In bronchoalveolar lavage fluid， YKL-40 was positively correlated with sTREM-1 （r=0.487， P<0.001）， YKL-40 was positively correlated with HMGB1 （r=0.607， P<0.001） and sTREM-1 was positively correlated with HMGB1 （r=0.544， P<0.001）. Conclusion： YKL-40， sTREM-1 and HMGB1 are abnormally elevated in bronchoalveolar lavage fluid in children with severe pneumonia， which may be involved in the progression of the disease.

[Key words] Chitinase protein 40 Soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1 High mobility group box 1 Severe pneumonia Bronchoalveolar lavage fluid

重症肺炎，是一种常见于儿童的严重呼吸系统疾病，通常由多种病原体引起，其特点是快速的病程进展和高死亡率[1]。在诊断和治疗的过程中，生物标志物的监测对于理解其病理机制和病情评估至关重要。近年来，甲壳质酶蛋白40（YKL-40）、可溶性髓系细胞触发受体-1（sTREM-1）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）作为新兴的生物标志物，引起了广泛关注[2-4]。YKL-40被认为与炎症和纤维化过程相关，而sTREM-1则是一种在炎症和感染反应中发挥作用的免疫调节蛋白。HMGB1作为一种核蛋白，也在细胞死亡、炎症反应和免疫调节中扮演着关键角色。尽管它们各自在其他疾病中的作用已被广泛研究，但它们在重症肺炎中的具体作用和相互关系尚需进一步探讨。本研究通过分析YKL-40、sTREM-1和HMGB1在重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中的表达及其相关性，期望为深入理解重症肺炎的病理机制提供新的视角。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取西藏自治区人民医院在2020年4月—2022年4月收治的100例重症肺炎患儿为研究对象。纳入标准：重症肺炎符合文献[5]《儿童社区获得性肺炎管理指南（2013修订）》中诊断标准；无免疫系统疾病；自主呼吸功能正常。排除标准：合并缺氧缺血性脑病；肺结核；合并其他肺部疾病；血液系统疾病；先天性心脏病。男52例，女48例；年龄4～12岁，平均（8.10±3.27）岁。本研究经本院医学伦理委员会批准，所有患儿家属均知情，并签署知情同意书。

1.2 方法

检测重症肺炎患儿血清、支气管肺泡灌洗液YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平。（1）患儿入院当天早晨8点抽取6 mL空腹静脉血，离心处理（4 000 r/min转速，3 cm离心半径）10 min，分离血清，-70 ℃保存。（2）在检查前10 min，在患儿鼻腔及咽喉部喷洒6～10 mL的2%利多卡因气雾剂（生产厂家：上海上药信谊药厂有限公司，批准文号：国药准字：H10920107，规格：每瓶8 g，含利多卡因450 mg，每揿含利多卡因4.5 mg，每瓶100揿）进行局部麻醉。支气管镜经鼻腔进入，依照胸部CT检查结果，首先对健侧进行探查，后探查患侧，采用氯化钠（生产厂家：上海百特医疗用品有限公司，批准文号：国药准字：H19983149，规格：1 000 mL︰9 g）灌洗，灌洗量1～2 mL/kg。灌洗液使用负压吸引回收，回收率应在40%～60%，黏液通过无菌纱布过滤出后置入硅塑瓶中，获得标本3 mL，立即送往实验室，4 ℃、1 800 r/min下行10 min离心处理，取上清液，保存于-80 ℃冰箱。（3）血清、支气管肺泡灌洗液YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平通过酶联免疫吸附法（ELISA）进行检測，孔中加入10 μL待测样品、40 μL待测样品稀释液，摇晃均匀，加入酶标试剂100 μL，封板并孵育60 min（37 ℃），将孔中液体弃去，采用Liquinox的phosphate-free liquid detergent重复清洗后加入50 μL显色剂，摇晃均匀，显色处理15 min（37 ℃），后加入终止液50 μL，OD值在450 nm波长下检测。ELISA试剂盒由上海瓦兰生物科技有限公司提供。

1.3 统计学处理

采用SPSS 20.0统计软件进行分析处理。计量资料采用（x±s）描述，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用独立样本t检验；相关性采用Pearson相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 重症肺炎患儿血清、支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平比较

与血清比较，支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平均明显更高，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 不同情况重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平比较

不同性别、年龄重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；不同感染类型、胸腔积液、发绀情况的重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；与支原体肺炎、病毒性肺炎、无胸腔积液、无发绀重症肺炎患儿相比，细菌性肺炎、有胸腔积液、有发绀重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平均明显更高，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3 支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1相关性分析

Pearson相关性分析显示，YKL-40与sTREM-1呈正相关（r=0.487，P<0.001）；YKL-40与HMGB1呈正相关（r=0.607，P<0.001）；sTREM-1与HMGB1呈正相关（r=0.544，P<0.001）。见图1。

3 讨论

肺炎是儿童常见病和多发病，在所有患有肺炎的儿童中，有7%～13%为重症肺炎。由于重症肺炎起病快、病情重、变化快、并发症多，及时诊断和治疗非常重要，而提高治愈率、降低病死率是治疗的关键[6]。重症肺炎，是一种休克性肺炎，大多数是由革兰阳、阴性菌感染引起，患儿除了咳嗽、咳痰、唇色发紫、发热等症状外，常伴有其他器官损害[7-8]。

支气管肺泡灌洗已成为诊断和治疗重症肺炎的新方法，可对重症肺炎患儿气道分泌物进行有效清除，避免气道阻塞，降低呼吸道反复感染、肺不张、气道瘘、局部气肿的发生率，可显著提升小儿呼吸道疾病诊治水平[9]。此外，通过对灌洗液的分析也可以了解病毒和细菌感染情况，对患儿病情评估具有重要价值 [10]。YKL-40由巨噬细胞、中性粒细胞分泌，可促进肺纤维化、结构重塑、炎症反应[11-13]。何作华等[14]研究显示，血清YKL-40水平在轻症肺炎组、重症肺炎组患儿中均升高，并且随着患儿病情加重升高更明显，这一结果表明YKL-40水平变化的趋势可直接反映肺炎患儿的病情严重程度。本研究显示，重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40水平高于血清中YKL-40水平。YKL-40通常与组织炎症、纤维化和细胞增殖过程相关联，所以重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40的增高反映了肺部组织的炎症程度和病理状态。因此，临床可根据肺泡灌洗液中YKL-40水平的高低评估重症肺炎疾病情况。sTREM-1是免疫球蛋白超家族成员，在急性炎症过程中可表达于多种免疫细胞表面，可对炎症反应进行调节，在脂多糖导致的脓毒血症中有炎症放大的作用，在真菌、细菌的刺激下，sTREM-1水平显著上升，是早期诊断重症肺炎的重要标志物，对疾病的预后评估有重要意义[15-17]。孙印等[18]研究结果显示，sTREM-1水平与肺炎严重指数（PSI）评分呈正相关，且sTREM-1水平越高，重症肺炎患儿死亡风险越高，这一结论说明sTREM-1可用于评估重症肺炎的严重程度。

HMGB1一般存在细胞核中，当细胞受损、坏死时，细胞核中HMGB1释放进入细胞外，进而形成炎性刺激因子，对促炎因子分泌起到了促进作用，而促炎因子可在HMGB1上直接发挥作用，使得HMGB1水平进一步上升，形成恶性循环，最终加重炎症反应[19-20]。陈敏等[21]研究显示，重症肺炎的炎症反应过程中有HMGB1参与，HMGB1表达水平与局部急性肺损伤严重程度呈正比，作为一种晚期炎症因子，HMGB1可作为判断重症肺炎病情严重程度的新的参考指标。本研究发现，重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平均较血清中各指标的水平均更高，且有胸腔积液、发绀患儿的YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平均明显更高，说明重症肺炎发生后存在炎症免疫现象，病情越严重，以上指标水平升高越明显，与以上研究结果具有一致性。另外本研究结果显示，支气管肺泡灌洗液YKL-40、sTREM-1、HMGB1之间均呈正相关，提示YKL-40、sTREM-1、HMGB1可能共同参与此病的发生发展。

综上所述，重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1水平表达异常升高，可能共同参与此病的进展，临床可根据患儿支气管肺泡灌洗液中YKL-40、sTREM-1、HMGB1含量的高低评估病情。

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