人参提取物安全毒理学研究

◎ 彭小娟

（琼台师范学院，海南 海口 571100）

人参是五加科植物人参的干燥根及根茎，是我国名贵的药材，已有数千年的药用和保健历史[1]。《神农本草经》记载，人参属于上药，多服久服不伤人，可延年不老[2]。人参具有“补五脏，安精神，止惊悸，开心益智，明目，轻身延年”功效。现代药物化学研究表明，人参的主要活性成分为人参皂苷、人参多糖等[3]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 受试物的制备

将人参粉碎，使用8 倍量70%乙醇回流提取3 次，每次2 h，经过滤、浓缩、干燥及粉碎过筛制得人参提取物[4-5]。人参提取物按人口服0.5 g/日，以成人体重60 kg 计算，相当于8.33 mg·kg-1bw。

1.1.2 实验动物

SPF 级小鼠、SD 大鼠，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。

1.2 实验方法

1.2.1 急性经口毒性试验

选雌、雄小鼠各10 只，经口灌胃人参提取物最大配制浓度为0.5 g·mL-1，最大灌胃量为20 mL·kg-1bw，即10.0 g·kg-1bw。连续观察14 d，记录中毒表现及死亡情况。

1.2.2 90 d 经口毒性试验

选雌、雄大鼠各60 只，进行90 d 经口毒性试验。设对照组和低、中、高（0.833 g·kg-1bw、1.670 g·kg-1bw、2.500 g·kg-1bw，分别相当于人体推荐剂量的100、200、300 倍）剂量组，每组20 只；在试验中期（45 d）、恢复期结束分别设对照卫星组和高剂量卫星组，每组10 只，雌雄各半。低、中、高剂量组受试液配制浓度分别为0.083 3 g·mL-1、0.167 0 g·mL-1、0.250 0 g·mL-1，按10 mL·kg-1bw 体积给大鼠灌胃，对照组给予等体积蒸馏水，每日1 次，连续灌胃90 d。试验期间对大鼠进行生长发育情况观察、血液学检查、血生化学检查、体重测量、脏器重量及脏/体比值计算、尿液检查、大体解剖、病理组织学检查等，并在试验前和试验结束时，对高剂量组和对照组大鼠进行眼部检查。

1.3 数据分析

用SPSS 等软件对实验数据进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 急性经口毒性试验

给小鼠灌胃人参提取物后未见明显中毒症状，观察14 d 无死亡，经口半数致死量LD50＞10.0 g·kg-1bw，属实际无毒级。结果见表1。

表1 小鼠急性经口毒性试验结果表

2.2 90 d 经口毒性试验

2.2.1 样品对大鼠生长发育的影响

喂养期间，各剂量组大鼠生长发育良好，无异常行为和中毒症状，无死亡。

2.2.2 样品对大鼠血液学指标的影响。

试验中期（卫星组）、试验结束（剂量组）、恢复期结束（卫星组），各剂量组大鼠的血常规指标、凝血酶原时间（Prothrombin Time，PT）、活化部分凝血活酶时间（Activated Partial Thromboplastin Time，APTT）与对照组比较差异不显著（P＞0.05）。结果见表2 ～表4。

表2 受试物大鼠90 d 喂养试验中期血液学检查结果表（±s）

表2 受试物大鼠90 d 喂养试验中期血液学检查结果表（±s）

项目雄雌对照卫星组高剂量卫星组对照卫星组高剂量卫星组白细胞计数/L（×109）7.16±1.287.24±1.357.12±1.167.09±1.07淋巴细胞/%72.9±2.6271.8±2.4173.1±2.5372.6±2.74中性粒细胞/%21.5±3.5721.9±3.2620.8±3.6321.2±3.47单核细胞/%4.52±1.034.28±0.994.60±0.964.67±1.08红细胞计数/L（×1012）7.41±0.427.46±0.387.45±0.477.39±0.51血红蛋白/（g·L-1）146±8.3148±7.5147±6.7146±5.2红细胞压积/（L·L-1）0.462±0.030.458±0.040.441±0.020.439±0.03血小板计数/L（×109）753±134760±152739±163732±175 PT/s8.5±1.18.3±0.98.1±0.67.6±0.8 APTT/s24.8±12.424.5±11.624.6±10.725.2±12.1

表3 受试物大鼠90 d 喂养试验结束血液学检查结果表（±s）

表3 受试物大鼠90 d 喂养试验结束血液学检查结果表（±s）

项目雄雌对照组低剂量中剂量高剂量对照组低剂量中剂量高剂量白细胞计数/L（×109） 7.32±1.42 7.47±1.38 7.24±1.25 7.29±1.16 7.42±1.53 6.83±1.67 7.36±1.85 7.14±1.62淋巴细胞/%74.8±3.75 73.2±3.42 73.9±2.74 74.1±2.36 75.2±3.62 76.0±4.51 75.6±4.27 74.3±3.51中性粒细胞/%21.3±3.86 20.8±4.05 21.2±3.72 21.6±4.13 20.5±3.84 19.9±2.87 21.3±4.10 20.6±3.82单核细胞/%4.71±0.95 4.53±0.88 4.50±0.92 4.39±0.99 4.68±1.27 4.62±1.30 4.70±1.08 4.65.±1.14红细胞计数/L（×1012） 7.32±0.31 7.38±0.47 7.43±0.39 7.39±0.37 7.42±0.40 7.51±0.51 7.46±0.53 7.48±0.33血红蛋白/（g·L-1）142±6.2144±7.4145±6.0146±5.7145±6.3148±7.5150±5.6149±4.9红细胞压积/（L·L-1） 0.453±0.05 0.452±0.02 0.448±0.03 0.450±0.02 0.439±0.04 0.435±0.02 0.443±0.03 0.440±0.01血小板计数/L（×109） 772±148 783±155 776±137 769±142764±173757±164748±171743±182 PT/s8.2±0.77.9±0.58.1±0.28.0±0.19.1±0.38.8±0.49.0±0.69.3±0.2 APTT/s24.5±11.2 24.3±10.3 23.6±12.1 24.7±10.8 23.9±6.25 22.8±7.42 24.2±5.91 23.5±6.34

表4 受试物大鼠90 d 喂养试验恢复期结束血液学检查结果表（±s）

表4 受试物大鼠90 d 喂养试验恢复期结束血液学检查结果表（±s）

项目雄雌对照卫星组高剂量卫星组对照卫星组高剂量卫星组白细胞计数/L（×109）7.35±1.427.26±1.307.43±1.347.41±1.52淋巴细胞/%76.3±1.8374.9±2.0577.2±1.8476.8±2.11中性粒细胞/%23.2±2.7622.8±2.5123.6±2.3923.0±2.64单核细胞/%5.20±1.255.13±1.175.18±1.125.24±1.23红细胞计数/L（×1012）7.70±0.937.59±0.767.68±0.827.64±0.88血红蛋白/（g·L-1）140±6.4138±5.9146±6.7143±6.2红细胞压积/（L·L-1）0.448±0.120.443±0.090.451±0.100.457±0.07血小板计数/L（×109）769±116762±131775±125770±122 PT/s9.0±1.18.7±1.18.5±0.78.3±1.3 APTT/s24.6±10.824.1±11.223.8±10.324.3±11.7

2.2.3 样品对大鼠血生化学指标的影响

试验中期（卫星组）、试验结束（剂量组）、恢复期结束（卫星组），各剂量组大鼠的生化指标与对照组比较均无显著性差异（P＞0.05），结果见表5～表7。

表5 样品大鼠90 d 喂养试验中期生化检验结果表（±s）

表5 样品大鼠90 d 喂养试验中期生化检验结果表（±s）

项目雄雌对照卫星组高剂量卫星组对照卫星组高剂量卫星组丙氨酸氨基转移酶/（U·L-1）53.6±4.3754.1±4.2952.3±4.8351.9±4.72门冬氨酸氨基转移酶/（U·L-1）162.8±3.1163.2±2.7150.7±1.8151.1±1.6碱性磷酸酶/（U·L-1）52.4±3.751.8±4.060.6±5.260.2±4.6谷氨酰转肽酶/（U·L-1）3.5±3.33.6±3.73.6±2.03.4±3.1尿素/（mmol·L-1）6.35±1.136.31±1.246.26±1.056.19±1.10肌酐/（μmol·L-1）47.1±3.7246.9±3.5747.6±5.2447.2±5.13血糖/（mmol·L-1）6.76±1.156.73±1.286.84±1.366.79±1.31总蛋白/（g·L-1）62.2±3.6762.5±3.2458.7±5.1359.3±5.08白蛋白/（g·L-1）33.1±3.2832.6±3.1430.7±2.5331.5±2.19总胆固醇/（mmol·L-1）1.93±0.511.88±0.471.82±0.361.76±0.32甘油三酯/（mmol·L-1）0.70±0.210.69±0.260.65±0.170.62±0.13氯/（mmol·L-1）113.0±3.1112.6±2.8111.4±2.2112.1±2.5钾/（mmol·L-1）5.30±0.265.26±0.215.17±0.185.10±0.14钠/（mmol·L-1）149.7±3.0150.8±3.3149.5±2.4148.3±1.9

表6 样品大鼠90 d 喂养试验结束生化检验结果表（±s）

表6 样品大鼠90 d 喂养试验结束生化检验结果表（±s）

项目雄雌对照组低剂量中剂量高剂量对照组低剂量中剂量高剂量丙氨酸氨基转移酶/（U·L-1） 55.8±6.53 54.1±6.14 53.6±4.27 55.2±5.36 54.5±5.71 52.9±6.03 51.8±4.51 53.4±5.26门冬氨酸氨基转移酶/（U·L-1）145.3±2.8 147.9±1.6 145.6±3.2 144.7±2.5 151.2±2.7 149.3±1.8 150.6±2.2 152.3±1.4碱性磷酸酶/（U·L-1）52.7±6.1 51.6±5.8 50.8±6.3 53.2±4.9 61.5±8.3 62.2±6.7 60.9±7.561.8±6.4谷氨酰转肽酶/（U·L-1）3.6±1.72.9±2.6 3.2±1.9 3.7±2.23.5±1.83.3±2.42.8±1.03.4±2.3尿素/（mmol·L-1）6.43±1.07 6.25±0.99 5.92±1.14 6.38±1.02 6.17±0.91 6.38±0.88 6.05±1.06 5.98±0.94肌酐/（μmol·L-1）47.6±5.31 48.2±4.96 47.3±6.02 47.8±5.17 48.2±6.42 49.5±5.71 47.8±5.59 50.3±4.76血糖/（mmol·L-1）6.83±1.07 6.71±0.96 6.43±1.16 6.92±1.32 7.06±1.40 6.83±1.29 7.11±2.14 6.75±2.07总蛋白/（g·L-1）61.3±5.37 60.2±5.61 61.5±5.28 62.4±4.98 59.7±6.02 62.4±4.86 59.1±6.12 60.3±5.27白蛋白/（g·L-1）32.4±2.15 33.1±2.36 32.8±2.13 31.9±2.08 31.8±1.83 30.2±2.14 31.6±2.07 32.3±1.94总胆固醇/（mmol·L-1）1.94±0.23 1.90±0.15 1.89±0.19 1.95±0.26 1.89±0.17 1.92±0.31 1.88±0.19 1.97±0.24甘油三酯/（mmol·L-1）0.68±0.15 0.65±0.12 0.59±0.16 0.67±0.18 0.62±0.11 0.64±0.15 0.69±0.21 0.66±0.19氯/（mmol·L-1）112.3±2.6 109.2±3.1 113.5±2.2 112.7±1.9 109.8±1.3 110.2±1.1 108.7±1.8 111.3±1.6钾/（mmol·L-1）5.27±0.30 5.08±0.26 5.13±0.27 5.22±0.19 4.86±0.15 4.92±0.11 4.81±0.19 5.04±0.23钠/（mmol·L-1）150.4±1.8 148.7±2.1 149.2±1.3 151.3±2.4 148.6±1.2 147.5±1.6 148.2±2.0 148.8±2.5

表7 样品大鼠90 d 喂养试验恢复期结束生化检验结果表（±s）

表7 样品大鼠90 d 喂养试验恢复期结束生化检验结果表（±s）

项目雄雌对照卫星组高剂量卫星组对照卫星组高剂量卫星组丙氨酸氨基转移酶/（U·L-1）56.1±3.8555.7±3.6253.2±4.1754.1±4.32门冬氨酸氨基转移酶/（U·L-1）180.3±4.2182.5±5.3164.2±2.8153.1±2.4碱性磷酸酶/（U·L-1）55.6±2.852.9±3.658.8±4.359.3±2.9谷氨酰转肽酶/（U·L-1）3.8±1.73.6±2.13.3±3.33.2±2.8尿素/（mmol·L-1）6.57±1.096.43±1.036.35±1.276.31±1.18肌酐/（μmol·L-1）48.2±2.6148.5±3.0850.1±4.1651.2±3.95血糖/（mmol·L-1）6.81±1.246.85±1.196.76±1.436.77±1.37总蛋白/（g·L-1）65.1±2.4763.6±2.2461.7±3.5260.8±3.38白蛋白/（g·L-1）35.6±1.8636.1±2.4333.4±3.3432.6±2.80总胆固醇/（mmol·L-1）2.02±0.642.13±0.531.95±0.291.87±0.30甘油三酯/（mmol·L-1）0.68±0.350.67±0.310.66±0.240.64±0.19氯/（mmol·L-1）114.6±1.9113.5±2.4110.8±2.2111.7±1.6钾/（mmol·L-1）5.29±0.315.27±0.255.20±0.135.24±0.17钠/（mmol·L-1）151.4±2.8152.3±2.2150.6±1.5148.7±1.3

2.2.4 样品对大鼠体重、脏器重量及脏/体比值的影响

各剂量组大鼠喂养试验末禁食后体重、脏器重量及脏/体比值与对照组比较差异无显著性（P＞0.05）。结果见表8 ～表9。

表8 样品大鼠90 d 喂养试验末禁食后体重及脏器重量测量结果表（±s）

表8 样品大鼠90 d 喂养试验末禁食后体重及脏器重量测量结果表（±s）

项目雄雌对照组低剂量中剂量高剂量对照组低剂量中剂量高剂量禁食后体重/g 273.2±18.4 262.8±20.1 269.5±18.5 260.8±17.3 200.9±15.4 197.6±12.1 193.8±14.6 201.2±13.5肝脏/g9.46±0.459.27±1.069.12±0.67 9.34±0.59 6.65±0.68 6.81±0.72 6.49±0.616.90±0.77肾脏/g2.41±0.182.38±0.262.43±0.16 2.42±0.23 1.90±0.14 1.88±0.11 1.85±0.171.87±0.19脾脏/g0.80±0.130.81±0.100.76±0.15 0.78±0.12 0.56±0.11 0.57±0.13 0.58±0.100.59±0.08胸腺/g0.52±0.090.51±0.110.49±0.13 0.53±0.15 0.49±0.12 0.48±0.10 0.51±0.080.50±0.09睾丸（卵巢）/g 3.15±0.193.13±0.163.17±0.24 3.16±0.27 0.15±0.03 0.14±0.02 0.13±0.040.14±0.02

表9 样品大鼠90 d 喂养脏/体比测量结果表（±s）

表9 样品大鼠90 d 喂养脏/体比测量结果表（±s）

项目雄雌对照组低剂量中剂量高剂量对照组低剂量中剂量高剂量肝/体/%3.47±0.21 3.54±0.33 3.39±0.16 3.58±0.14 3.32±0.25 3.46±0.34 3.35±0.21 3.43±0.41肾/体/%0.89±0.07 0.92±0.09 0.91±0.08 0.93±0.07 0.96±0.06 0.95±0.09 0.96±0.05 0.94±0.08脾/体/%0.30±0.05 0.32±0.06 0.29±0.02 0.31±0.04 0.29±0.06 0.30±0.04 0.31±0.07 0.30±0.05胸腺/体/%0.20±0.05 0.20±0.07 0.19±0.04 0.21±0.06 0.25±0.05 0.25±0.03 0.26±0.04 0.25±0.06睾丸/体（卵巢/体）/% 1.16±0.07 1.19±0.10 1.18±0.11 1.21±0.09 0.074±0.07 0.071±0.05 0.068±0.06 0.070±0.09

2.2.5 样品对大鼠尿液检查、眼部检查、大体解剖及病理组织学检查结果的影响

各剂量组大鼠尿液各项指标未见异常；试验前后高剂量组和对照组大鼠角膜、虹膜及晶状体清晰，球结膜未见充血；各脏器的色泽、大小、形态结构等均未见明显异常；高剂量组大鼠病理组织学检查未见明显与样品有关的异常改变。

3 结论

本文依据《食品安全国家标准 食品安全性毒理学评价程序》（GB 15193.1—2014）对人参提取物的安全性进行研究。人参提取物的小鼠急性经口LD50＞10.0 g·kg-1bw，属实际无毒级。大鼠90 d 经口毒性试验中，各剂量组动物生长发育良好，无中毒、死亡现象，大鼠各项血液学指标、生化学指标、体重、脏器重量及脏/体比值与对照组比较，均无显著性差异（P＞0.05）；各剂量组大鼠尿液各项指标未见异常；高剂量组和对照组大鼠眼部检查未见明显异常；高剂量组大鼠病理组织学检查未见明显异常改变。综上，长期食用人参提取物对小鼠安全无毒副作用。