血清纤维胶凝蛋白3、胶原三股螺旋重复蛋白1对非小细胞肺癌的诊断价值及与临床病理特征的关系

苏政军 黄珊珊 陈万进

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一[1]。肺癌分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)和小细胞肺癌(small-cell lung carcinoma,SCLC),其中,NSCLC约占所有肺癌病例的85%[2]。NSCLC早期治愈率高但大多数病人确诊时已发展到中晚期肺癌。纤维胶凝蛋白3(ficolin-3,FCN3)由FCN3基因编码,可通过与甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASPs)相关的途径激活补体,在机体免疫应答中发挥重要作用[3]。有研究表明,血清FCN3水平已被确定为食管癌病人的潜在预后生物标志物[4]。胶原三股螺旋重复蛋白1(collagen triple helix repeat containing-1,CTHRC1)是已知的胶原合成调节因子,可抑制Ⅰ型和Ⅲ型胶原转录[5-6]。有研究表明,CTHRC1高表达可正向调控肿瘤的扩散、侵袭、迁移、黏附和转移[7-8]。本研究检测NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1表达水平,分析NSCLC病人临床病理特征与二者表达水平的关系。

对象与方法

一、对象

我院2021年7月～2022年8月收治的73例NSCLC病人为研究组,均经病理学或细胞学检查确诊。男45例,女28例;年龄41～75岁,平均(62.14±8.06)岁;有吸烟史病人47例;肿瘤直径≥3 cm 39例,<3 cm 34例;病理类型:腺癌40例,鳞癌33例;依据AJCC TNM分期标准[9],Ⅰ、Ⅱ期32例,Ⅲ、Ⅳ期41例;分化程度:中、低分化54例、高分化19例;淋巴结转移20例。纳入标准:(1)未接受过放疗、化疗;(2)均行同一方式手术治疗,临床病理检测资料完整;(3)自愿签署知情同意书者。排除标准:合并高血压、糖尿病、肺结核及肝肾功能严重障碍;合并感染性及免疫系统疾病;合并其他部位原发恶性肿瘤。选取同期本院健康体检者55例为对照组,男34例,女21例,年龄40～76岁,平均年龄(62.96±7.53)岁,有吸烟史33例。两组年龄、性别、有无吸烟史等比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本研究获得本院伦理委员会批准。

二、方法

1.样本收集:收集病人入院后次日清晨空腹静脉血4～5 ml,对照组静脉血于体检当日采集。室温静置30分钟,使用高速离心机CR22N4 ℃、5 000 r/min离心8分钟,留取上清液,分装于无菌EP管中,于-20 ℃冰箱中保存,待检。

2.血清FCN3、CTHRC1水平检测:采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法,采用酶标仪测定不同浓度标准品在450 nm处的吸光度值,绘制FCN3、CTHRC1的标准品回归曲线。于-20 ℃冰箱中取适量血清样本,解冻,测定各样本在450 nm处的吸光度值,依据标准回归曲线计算血清FCN3、CTHRC1水平。

三、统计学方法

结果

1.两组血清FCN3、CTHRC1水平比较见表1。结果表明,与对照组相比,研究组血清FCN3、CTHRC1水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 两组血清FCN3、CTHRC1水平比较

2.血清FCN3、CTHRC1水平与NSCLC病人临床病理特征的关系见表2。结果表明,血清FCN3、CTHRC1水平与NSCLC病人性别、年龄、有无吸烟史、肿瘤直径、病理类型无关(P>0.05);与癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。

表2 不同临床病理特征NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平比较

3.NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平的相关性分析见图1。Pearson法分析显示,NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平呈正相关关系(r=0.258,P=0.028)。

图1 NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平的相关性

4.NSCLC发生的Logistic回归分析:以是否发生NSCLC为因变量(是=1,否=0),以研究组与对照组之间有差异的血清FCN3、CTHRC1为自变量(自变量之间无共线性,方差膨胀因子<10),行Logistic回归分析。结果显示,血清FCN3、CTHRC1表达是NSCLC发生的影响因素(P<0.05)。见表3。

表3 Logistic回归分析NSCLC发生的影响因素

5.血清FCN3、CTHRC1水平对NSCLC发生的诊断价值:血清FCN3水平诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积为0.869,血清CTHRC1水平诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积为0.810,二者联合诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积为0.881,优于血清FCN3、CTHRC1各自单独诊断(Z二者联合-FCN3=2.065、Z二者联合-CTHRC1=2.429,P=0.011、0.001)。见表4和图2。

图2 血清FCN3、CTHRC1水平诊断NSCLC发生的ROC曲线

表4 血清FCN3、CTHRC1水平对NSCLC发生的诊断价值

讨论

肺癌是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,是男性癌症死亡率最高的肿瘤,女性癌症死亡率第二高的肿瘤,NSCLC是最常见的肺癌类型[10]。NSCLC早期无特殊临床症状,易错过最佳治疗时机[11]。因此,及时诊断NSCLC发生,对NSCLC病人的临床治疗具有非常重要的价值。

FCN3是一种由FCN3基因编码的寡聚结构凝集素,在凝集素补体途径中起关键作用,主要表达于人体组织中的肺和肝脏[3]。Jang等[12]研究表明,FCN3可通过诱导内质网应激发挥对肺腺癌的抑制作用。本研究中,研究组血清FCN3水平显著高于对照组。NSCLC病人血清FCN3水平与癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴转移有关,当有淋巴转移、癌细胞分化程度低和TNM分期在Ⅲ、Ⅳ时,NSCLC病人血清CTHRC1水平更高。Logistic回归分析显示,血清FCN3是NSCLC发生的独立影响因素,FCN3表达水平升高预示着NSCLC的发生、发展。ROC曲线显示,血清FCN3水平诊断NSCLC发生的AUC为0.869,这说明检测血清FCN3水平对诊断NSCLC发生有一定参考价值,临床可根据病人血清FCN3水平制定诊疗方案,防止病人病情恶化。

CTHRC1是一种分泌性糖基化蛋白,可以通过调节TGF-β和Wnt信号通路来调节胶原蛋白的合成,在多种实体肿瘤中广泛上调[13]。He等[14]研究表明,CTHRC1是一种癌症侵袭驱动基因,通过激活NF-κB/MMP9等信号传导促进NSCLC进展,以CTHRC1为治疗靶点可能用于增强抗癌药物对NSCLC的治疗效果,此外,其研究亦称CTHRC1是用于评估NSCLC不良临床病理特征的有效生物标志物。本研究中,研究组血清CTHRC1水平高于对照组,与文献报道一致[15]。血清CTHRC1水平与癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴转移有关,而且有淋巴结转移、癌细胞分化程度低和TNM分期在Ⅲ、Ⅳ时,NSCLC病人血清CTHRC1水平升高,说明CTHRC1促进了肿瘤的侵袭和转移,与文献报道一致[7,14]。血清CTHRC1是影响NSCLC发生的因素,提示CTHRC1表达水平持续升高,增加了NSCLC病人病情恶化的风险。ROC曲线显示,血清CTHRC1水平诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积为0.810,提示血清CTHRC1水平对NSCLC诊断有临床参考价值。Pearson法分析显示,NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平呈正相关关系,提示二者在NSCLC发生的分子机制中可能有一定的协同作用。二者联合诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积为0.881,优于血清FCN3、CTHRC1各自单独评估,提示FCN3、CTHRC1联合可更有效地诊断NSCLC的发生。

综上所述,NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平均升高,且与癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,二者联合对NSCLC早期诊断更具价值。但FCN3、CTHRC1在NSCLC具体的作用机制尚未明确,需进一步探究。