中药痛消饮治疗寒凝血瘀证原发性痛经效果及对MAPK/ERK信号通路的影响

司 晴,王桂华,张铁铮,郑新平,马艳东

(衡水市中医医院妇科,河北 衡水 053000)

原发性痛经是临床常见的妇科疾病,多见于青春期或年轻女性,据统计其发病率高达90%,若未得到及时有效治疗,可能会导致生育功能低下甚至不孕症[1]。西医多采用布洛芬镇痛,但无法达到根治的效果,还会伴有胃肠道不适等不良反应[2]。中医学中,原发性痛经最常见的证型为寒凝血瘀证,需采用化瘀止痛、温经散寒之法治疗[3]。中药痛消饮是治疗妇女经期或行经前后出现周期性痛经的经典药物,具有温经散寒、化瘀止痛之效,最适宜治疗以“寒湿凝滞、气滞血瘀”为病机的痛经患者[4]。相关研究[5]表明,丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(mitogen activated protein kinase/extracellular regulated protein kinase,MAPK/ERK)信号通路与原发性痛经发病最为相关。但关于中药痛消饮对该通路的调节作用仍有待验证。为此,本研究探讨中药痛消饮治疗寒凝血瘀证原发性痛经的效果及对MAPK/ERK信号通路的影响,旨在为临床提供参考数据。

1 资料与方法

1.1 病例选取标准

纳入标准:西医均符合原发性痛经的诊断标准[6];中医均符合寒凝血瘀证原发性痛经诊断标准[7];患者均知晓自身病情,并签订知情同意书。排除标准:存在造血系统疾病者;继发性痛经者;心肝肾等重要脏器严重功能异常者;参与本研究前1个月内服用强效镇痛药或激素者;存在药物过敏者。

1.2 一般资料

选取衡水市中医医院2019年1月至2021年5月诊治的寒凝血瘀证原发性痛经患者106例,按随机数字表法分为中药组和常规组,各53例。2组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),有可比性,见表1。本研究经本院伦理委员会审批通过(审批号:伦审2018-107-01)。

表1 2组一般资料比较

1.3 治疗方法

常规组给予布洛芬颗粒(石药集团欧意药业有限公司,批号:20190224,规格:0.2 g·包-1),1包·次-1,2次·d-1,开水冲服。

中药组给予中药痛消饮。药物组方:乌药、巴戟天、小茴香、干姜、土茯苓、肉桂、当归、丹参、川楝子、白芍、黄柏、五灵脂、蒲黄、元胡(打)、苍术、炒薏米,每服加1000 mL水煎煮至300 mL,无菌罐装密封,150 mL·袋-1,早晚隔水加热后温服,1袋·次-1。

2组均于月经预来潮前7 d开始服药至月经来3 d后停服,共服用3个月经周期。

1.4 观察指标、检测及评价标准

1)2组疗效。疼痛及其他症状完全消失,连续3个月经周期无复发为治愈;疼痛明显减轻,视觉模拟评分(visual analog score,VAS)、COX痛经症状量表(Cox dysmenorrhea symptom scale,CMSS)评分下降至治疗前的1/2以下,其他症状减轻或消失,不服止痛药可坚持工作为显效;疼痛减轻,VAS、CMSS评分下降至治疗前的1/2～3/4,其他症状好转,服止痛药可坚持工作为有效;未达到上述标准为无效。将治愈、显效、有效纳入总有效率。

2)2组治疗前后VAS、CMSS评分。VAS评分范围为0～10分,分值越高,说明疼痛程度越严重。CMSS评分包括腹痛、恶心、呕吐等18个痛经症状,分为痛经持续时间和严重程度2个维度,持续时间:无为0分,持续时间<3 h为1分,持续时间3～7 h为2分,持续时间7～24 h为3分,持续时间>24 h为4分;严重程度:无为0分,轻度为1分,中度为2分,较显著为3分,剧烈为4分,分值越高,提示痛经越严重。

3)2组治疗前后血清疼痛介质[β-内啡肽(β-endorphins,β-EP)、前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)]水平。采集清晨空腹静脉血3 mL,离心处理,3500 r·min-1,10 min,取上清液,保存于-70 ℃恒温冰箱内,待检。采用酶免疫吸附法检测血清β-EP、PGE2、PGF2α水平。

4)2组治疗前后外周血单个核细胞MAPK/ERK信号通路相关因子[丝裂原活化细胞外调节激酶(mitogen activated extracellular regulated kinase,MEK)1、MEK2、ERK1、ERK2 mRNA]水平,采集清晨空腹静脉血3 mL,置于4 ℃冰箱,2 h内提取总DNA,采用PCR定量检测外周血单个核细胞中MEK1、MEK2、ERK1、ERK2 mRNA相对表达量。

5)2组治疗前后采用美国GE公司Voluson 730彩色多普勒超声仪检查子宫微循环状态[子宫动脉血流阻力指数(resistance index,RI)、搏动指数(pulsatility index,PI)、收缩期峰值/舒张期峰值(systolic peak/diastolic peak,S/D)]。

6)2组不良反应(恶心、呕吐,胃痛,腹泻)发生率。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 2组疗效比较

中药组总有效率高于常规组(P<0.05),见表2。

表2 2组疗效比较 n(%)

2.2 2组治疗前后VAS、CMSS评分比较

治疗前,2组VAS评分、CMSS量表持续时间、严重程度评分比较差异均无统计学意义(P>0.05);2组治疗后VAS评分、CMSS量表持续时间、严重程度评分低于治疗前,且中药组低于常规组(P<0.05)。见表3。

表3 2组治疗前后VAS、CMSS评分比较 分

2.3 2组治疗前后血清疼痛介质水平比较

2组治疗前血清β-EP、PGE2、PGF2α水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后2组血清β-EP、PGE2水平高于治疗前,且中药组高于常规组;PGF2α水平低于治疗前,且中药组低于常规组(P<0.05)。见表4。

表4 2组治疗前后血清疼痛介质水平比较

2.4 2组治疗前后MAPK/ERK信号通路相关因子水平比较

治疗前2组外周血单个核细胞MEK1、MEK2、ERK1、ERK2 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);2组治疗后外周血单个核细胞MEK1、MEK2、ERK1、ERK2 mRNA相对表达量低于治疗前,且中药组低于常规组(P<0.05)。见表5。

表5 2组治疗前后MAPK/ERK信号通路相关因子水平比较

2.5 2组治疗前后子宫微循环状态比较

2组治疗前子宫动脉PI、RI、S/D比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2组子宫动脉PI、RI、S/D低于治疗前,且中药组低于常规组(P<0.05)。见表6。

表6 2组治疗前后子宫微循环状态比较

2.6 2组不良反应比较

2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表7。

表7 2组不良反应比较 n(%)

3 讨论

据统计,原发性痛经占所有痛经的40%左右,发病原因尚未完全明确,临床普遍认为与生殖激素分泌异常、精神因素、神经因素等有关,对女性身心健康造成严重影响[8-9]。布洛芬属于非甾体类药物,具有良好的镇痛效果,但难以取得理想疗效,长期服用还极易影响机体代谢功能、损伤神经系统[10]。目前,中医疗法成为临床治疗原发性痛经的研究热点。

中医学认为,寒凝血瘀证是原发性痛经的主要证型,主要病机为寒属阴邪,易袭阴位,寒邪过盛,气血津液运行不畅,造成经脉气血凝闭,胞脉气血壅滞,导致经行腹痛,治则当温经散寒、调经止痛[11]。中药痛消饮是在保留中医重要辨证施治优势基础上,结合现代药理研究,浓缩提取中药有效成分制成的药物,不仅服用方便,还能提高其临床获益[12]。本研究将中药痛消饮应用于寒凝血瘀证原发性痛经患者中发现,治疗后中药组总有效率高于常规组,VAS评分、CMSS量表持续时间和严重程度评分低于常规组,说明中药痛消饮应用于寒凝血瘀证原发性痛经治疗中能取得显著疗效。根据中医药理分析其原因为:中药痛消饮组方中乌药具有温肾散寒之效,干姜可温中散寒、回阳通脉,小茴香、肉桂具有温经散寒止痛作用,巴戟天能祛风除湿、补肾助阳,丹参、当归、白芍具有调经养血、敛阴镇痛之效,五灵脂温可络通经、散瘀活血,蒲黄可化瘀通淋,元胡具有镇静止痛、活血行气之效,川楝子可行气止痛,苍术能祛风散寒,黄柏具有清热燥湿功效,土茯苓可解毒除湿、通利关节,炒薏米具有清利湿热功效,诸药合用,全方共奏温经散寒、调经止痛之效[13-14]。β-EP、PGE2、PGF2α作为疼痛介质,表达水平可有效反映机体疼痛情况,其中PGF2α含量增加、PGE2含量减少时会导致子宫平滑肌痉挛性收缩,引发痛经;β-EP作为一种神经多肽,水平异常下调时造成子宫功能异常,导致痛经[15-16]。本研究结果表明,治疗后中药组上述疼痛介质水平均得到显著改善,可见中药痛消饮能通过调节β-EP、PGE2、PGF2α等疼痛介质表达水平发挥缓解疼痛的作用。

MAPKs信号通路是机体内调节炎症反应和免疫应答的重要通路,其中MAPK/ERK信号通路会在应激刺激下活化,降低疼痛阈值[17-18]。基于此,本研究尝试探讨中药痛消饮对MAPK/ERK信号通路的影响,结果发现,治疗后中药组外周血单个核细胞MEK1、MEK2、ERK1、ERK2 mRNA相对表达量低于常规组,表明中药痛消饮治疗寒凝血瘀证原发性痛经能经由调节MAPK/ERK信号通路的途径进一步提高治疗效果。现代药理研究[19]证实,肉桂醛具有抑制成纤维细胞MAPK信号通路中ERK活化的作用,小茴香能够明显抑制ERK磷酸化,当归可调节MAPK/ERK信号通路改善机体凝血状态,白芍总苷具有下调ERK1/2表达的作用。故中药痛消饮可在上述众多药物作用机制支持下达到显著调节MAPK/ERK信号通路的目的,为减轻痛经程度、强化治疗效果创造更有利条件。

相关研究[20-21]表明,“血瘀”与机体血液流变学、微循环状态联系紧密。王丽娜等[22]报道指出,原发性痛经患者子宫动脉血流阻力较大,子宫微循环障碍是引发子宫平滑肌痉挛、缺氧缺血、痛经的重要原因。本研究显示,治疗后中药组改善子宫微循环状态效果显著,明显优于常规组。是因为当归、丹参、白芍具有活血行气的功能,可改善机体凝血状态,纠正微循环障碍;五灵脂、蒲黄具有改善微循环作用[23]。因此中药痛消饮能通过多靶点、多途径改善寒凝血瘀证原发性痛经患者子宫微循环状态。

此外,本研究还发现,中药痛消饮具有良好的安全性。但本研究未进行远期随访分析中药痛消饮对寒凝血瘀证原发性痛经远期复发的影响,后续应做进一步分析与探讨,以获取更全面的数据支持。

综上所述,中药痛消饮治疗寒凝血瘀证原发性痛经疗效显著,能通过抑制MAPK/ERK信号通路相关因子和疼痛介质表达显著减轻痛经症状,还可改善子宫微循环状态,且不增加药物不良反应。