国家评价性抽验氟马西尼注射液质量分析

吴秋云，陈民辉

（江苏省食品药品监督检验研究院，江苏 南京 210019）

1 重点项目的法定检验结果

共抽验样品173 批，涉及全国全部13 家生产企业中的11 家（分别记为A -K），以及全国全部29 个批准文号中的20 个。其中，规格为2 mL∶0.2 mg 的23 批，为5 mL∶0.5 mg 的121 批，为10 mL∶1.0 mg 的29 批。共涉及31个省、自治区、直辖市（未纳入台湾省数据。且同一企业也可能涉及不同省级行政区），按抽样地点性质分为经营单位、生产单位、使用单位，分别有114批、33批、26批。

氟马西尼注射液法定检验项目共10项，包括性状、鉴别、pH、杂质、细菌内毒素、装量、可见异物、不溶性微粒、无菌、含量测定。按2020 年版《中国药典（二部）》［5］及企业内部标准进行检验，所有项目均达标检验结果才为合格。结果显示，173 批样品检验结果均为合格（100.00%）。重点项目的法定检验结果如下。

pH：综合各个法定质量标准，pH 应为3.5～4.2。结果各生产企业样品的pH均为3.8～4.2（见图1）。

图1 各生产企业样品pH测定结果箱线图Fig.1 Box plot of pH determination for samples from various manufacturing enterprises

杂质：法定质量标准中均采用高效液相色谱（HPLC）法进行测定。173 批样品单个最大杂质含量低于0.30%，杂质总量低于0.40%。详见图2。

图2 各生产企业样品中单个最大杂质和总杂质测定结果箱线图a.The biggest single impurity b.Total impuritiesFig.2 Box plot of the biggest single impurity and total impurities determination in samples from various manufacturing enterprises

含量测定：样品含量测定结果频数分布图基本呈正态分布，平均含量为100.28%。详见图3。

图3 样品含量测定结果频数分布图Fig.3 Frequency distribution of content determination of flumazenil in samples

2 探索性研究

2.1 杂质A

杂质可分为工艺杂质（合成起始原料、生产中间体、副产物等）和降解（制剂工艺中的降解和自然放置过程中的降解）杂质。在酸、碱条件下，氟马西尼中的主要降解杂质为杂质A，在强氧化条件下产生微量的杂质B。多数氟马西尼注射液现行标准中未对杂质A 进行单独控制。按2020 年版《中国药典（二部）》［5］方法制备的供试品溶液在室温条件下放置超过3 h 即可产生杂质A。采用HPLC 法测定173 批样品中杂质A 的含量，结果见图4。可见，各企业产品中杂质A 的含量均不超过0.3%，低于对单个杂质的控制限度（1.0%）［5］。

图4 各生产企业样品杂质A测定结果箱线图Fig.4 Box plot of content determination of impurity A in samples from various manufacturing enterprises

2.2 渗透压

注射液产生刺激性和疼痛性主要是由于不适当的pH与渗透压，且渗透压过低会导致溶血。氟马西尼注射液药品说明书中标示的用法为静脉注射或静脉滴注，其渗透压与用药安全相关，现行质量标准中均未规定渗透压项。按2020 年版《中国药典（四部）》通则中渗透压摩尔浓度测定法的要求［6］，对本次抽样的11 家生产企业的150批样品进行测定，结果见图5。等渗的范围一般为260～320 mOsmol/ kg，企业C 所有样品的渗透压均为38 mOsmol/kg，远低于人体血浆渗透压。根据其提供的处方工艺发现，该样品中未添加氯化钠调节等渗。其余10家生产企业样品的渗透压均在等渗范围内。

图5 各生产企业产品渗透压箱线图Fig.5 Box plot of osmotic pressure in samples from various manufacturing enterprises

2.3 依地酸盐

依地酸盐是常用的稳定剂，与微量的金属离子形成螯合物后，可阻止金属离子对药物自身氧化的催化作用，从而提高药物在制备、存储和临床配制过程中的稳定性。但大量摄入依地酸二钠会引起低血钙或骨钙流失。氟马西尼注射液现行标准中均未对依地酸盐进行单独控制。采用HPLC 法测定11 家生产企业的30 批样品中依地酸盐的含量，结果见表1。可见，所有样品均加入了依地酸盐，但含量相差较大，建议加以控制。

表1 各生产企业依地酸盐含量测定结果（mg/mL，n=2）Tab.1 Results of content determination of edetate in samples from various manufacturing enterprises（mg / mL，n = 2）

2.4 微量元素

参考文献［7］，分别测定11 家生产企业的86 批样品中铅、镉、砷、锑、铬、锌、镁、铜8 种微量元素的含量。结果86 批样品中，砷、锑、铅、镉4 种有害元素的含量均低于0.1 mg/L，未见明显迁移；不同生产企业样品中铬和铜含量均低于0.02 mg/L；不同生产企业样品中镁、锌、铅含量差异较大（分别为0.002～0.067 mg/ L、0.000 1～0.177 mg/ L、0.000 2～0.044 mg/ L），提示不同的生产工艺对产品中元素的含量影响较大。

2.5 加速试验

选择11家生产企业及相对湿度同一生产企业不同规格样品（共30 批）在温度为40 ℃、相对湿度为100%的条件下放置1，3，5 个月，考察性状，pH，有关物质、氟马西尼含量变化，评价不同处方工艺产品的稳定性。结果各生产企业样品性状均未改变，pH变化不大（0.08～0.24）。杂质A的含量与总杂质含量呈同步上升趋势，放置5个月后，杂质A 的含量约为放置1个月后的2倍，推测与高温引起氟马西尼降解有关。

氟马西尼含量在加速试验后均有不同程度下降，1 个月、3 个月、5 个月后最多下降分别为2.3%，2.5%，3.8%，推测与氟马西尼降解为杂质A 有关。同一生产企业不同规格样品未见明显差异。

2.6 长期试验

收集6 家生产企业的24 批近效期样品，测定其杂质的含量。结果显示，样品杂质主要为杂质A，其他最大单个杂质含量均低于0.2%，杂质A 和总杂质含量均不超过1.0%，远低于限度要求［5］。故在接近药品实际贮存条件下，各生产企业样品在有效期内质量稳定。

2.7 基于多指标数学建模的药物质量控制分析

参考文献［8 - 10］，采用化学计量学方法，结合法定检验结果对11 家生产企业的173 批样品进行多变量考察。采用ChemPattern 软件的多元统计分析技术-主成分分析法，以样品检查的重点项目pH、氟马西尼含量为主要成分1（PC1）、杂质含量为PC2建立共有模式，并分析样本间的相关性（见图6）。各生产企业样品重点项目的综合检验结果呈较明显的相对聚集和离散。聚集的紧密程度体现出该生产企业样品处方、生产工艺控制的相对稳定性。可见，生产企业F，J，K的样品呈较明显的相对聚集，提示其产品的处方工艺控制较稳定；生产企业A，B，C的样品则较分散，提示其产品批间差异较大。

图6 氟马西尼注射液重点项目得分载荷图Fig.6 Scoring plot of key items of Flumazenil Injection

3 发现的问题

3.1 质量标准

2020 年版《中国药典（二部）》有关物质项下未提及扣除空白辅料峰，但在实测过程中出现较大的空白辅料峰，且各生产企业辅料峰有差异；标准规定中仅控制了单个杂质和总杂质的限度。杂质A是氟马西尼注射液中的主要风险杂质，但多数生产企业未对其进行单独控制。氟马西尼注射液多用于静脉注射，各现行标准中均未对渗透压进行控制。生产企业C的样品处方中未添加氯化钠调节渗透压导致产品渗透压过低；其他生产企业的样品中均添加了依地酸盐作为稳定剂，但依地酸盐添加量不同。建议进一步完善标准，对有关物质中的杂质A 进行单独控制，对空白辅料峰进行扣除，并对该品种的渗透压和添加的依地酸盐进行控制。

3.2 包装材料与违规违法生产

本次抽验样品的内包装均为玻璃安瓿。除部分生产企业未标明具体材质外，其余均标明材质为低硼硅玻璃，易引发质量安全问题，如灌装偏酸或偏碱的药物后易产生脱片，玻璃瓶装的大输液在输注过程中易引起污染，安瓿小瓶在掰开过程中玻璃碎屑可能会落入药物中等［11］。本次抽样发现，不同生产企业样品折断安瓿所需的力度不同，且折断面不平整，易造成玻璃碎片溅入药液的问题。建议生产企业进一步考察包装材质，消除安全隐患。根据检验和企业调研结果，抽验样品均在效期内检验合格。未发现偷工减料、擅自改变生产工艺、非法添加其他物质及违规投料、低限投料、非法添加替代物质等问题。

3.3 药品说明书存在的问题

1）参比制剂药品说明书中显示该品种临床使用方法为静脉注射或静脉滴注。但生产企业J未标明静脉输注，且在适应证、用法用量、不良反应、注意事项、药物相互作用、药物过量、药物代谢动力学方面描述不全面。2）部分生产企业药品说明书中辅料描述不完整。生产企业A 和B均采用氢氧化钠溶液调pH，生产企业C采用pH 3.8磷酸盐缓冲液调pH，均未在药品说明书中标注。3）药品说明书中包装材料均为安瓿，但部分生产企业未标明具体材质。建议生产企业进一步完善药品说明书。