膀胱癌组织中MYBL2、AGR2、PAX8及NR4A3表达与临床病理特征及预后的相关性

马冰冰

作者单位：450000 郑州大学第一附属医院

膀胱癌为临床常见的恶性肿瘤,具有较高的发生率与死亡率[1-2],其发病机制较为复杂,临床并未彻底明晰,往往认为与遗传、环境等因素联系紧密[3-4]。膀胱癌易复发、转移,且在患病初期多数患者无明显症状,临床诊断较为困难,患者预后较差[5]。因此,选择与膀胱癌发生与发展的有关生物标志物,于早期及时诊断出疾病,并施以个体化的治疗,对于改善患者预后意义重大。基于此,本研究分析成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)、前梯度蛋白2(AGR2)、配对盒基因8(PAX8)、核受体亚家族4成员3(NR4A3)在膀胱癌组织内的表达及与患者临床病理特征、预后的关系。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021年1月至2022年2月本院收治的87例膀胱癌患者。纳入标准:经病理检查证实;患者生命体征平稳;意识清晰,能够正常交流;依从性良好。排除标准:合并其它恶性肿瘤者;伴有凝血系统紊乱者;合并自身免疫性疾病者;存在肝肾功能衰竭者。所有患者中,男性53例,女性34例;年龄41～75岁,平均年龄(60.31±2.59)岁;肿瘤直径1.3～4.8 cm,平均直径(2.53±0.46)cm;临床分期:50例Ⅰ～Ⅱ期,37例Ⅲ～Ⅳ期;分化程度:41例低分化,46例中、高分化;淋巴结转移42例。

1.2 方法

收集所有患者的癌组织与癌旁正常组织(距离病灶边缘≥3 cm),将其分别纳入观察组与对照组,以免疫组织化学法检测MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表达。具体检查步骤:运用10%甲醇溶液持续固定上述标本24 h,石蜡包埋,制作成4 μm切片;然后以柠檬酸钠缓冲液开展抗原修复,滴入3%过氧化氢溶液,在室温条件下持续孵育15 min,然后以磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗涤3次;以10%的山羊血清在室温环境下封存0.5 h,滴入一抗,次日以PBS洗涤3次,滴入二抗,再于室温下孵育0.5 h,最后染色、脱水、封片、镜检。阳性评估依据:①染色强度:不着色为0分;淡黄色为1分;棕黄色为2分;棕褐色为3分。②阳性表达率:阳性表达率在1%～10%间为1分;阳性表达率在>10%～50%间为2分;阳性表达率>50%为3分。两者相乘>3分为阳性,相反则为阴性。

1.3 观察指标

(1)癌组织及癌旁组织中MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3阳性表达差异。(2)MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表达与患者临床病理特征间的关系:收集患者年龄、性别等资料,探究四者表达与各项特征间的关系。(3)MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表达与患者生存率的关系:随访1年,分析四者表达与患者生存率的联系。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3阳性表达

癌组织中的MYBL2、AGR2、PAX8阳性表达率高于癌旁组织,NR4A3阳性表达率低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 组织中MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3的阳性表达情况(例,%)

2.2 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表达与患者临床病理特征间的关系

MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表达与患者年龄、性别、肿瘤直径无关,差异无统计学意义(P>0.05);与患者分化程度、临床分期、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表达与患者临床病理特征间的关系(例,%)

2.3 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表达与患者生存率的关系

随访1年,MYBL2、AGR2、PAX8阳性表达生存率分别为42.86%(18/42)、42.11%(16/38)、41.30%(19/46),低于阴性表达的66.67%(30/45)、65.31%(32/49)、70.73%(29/41);NR4A3阳性表达的生存率为77.78%(14/18),高于阴性表达的49.28%(34/69),差异有统计学意义(χ2=4.979、4.658、7.590、4.689,P=0.026、0.031、0.006、0.030)。

3 讨论

膀胱癌的患病率与致死率均处在较高水平,50岁以上男性为该病的高发群体[6]。近年,随着各种致癌因素的增加,膀胱癌的患病人数急剧上涨。由于临床并未彻底了解该病的发病机制,故积极探寻与疾病发生的分子生物标志物用于指导临床采取针对性治疗,对于降低死亡率至关重要。

本研究结果显示,癌组织的MYBL2、AGR2、PAX8阳性表达率高于癌旁组织,NR4A3阳性表达率低于癌旁组织;且四者表达与患者分化程度、临床分期、淋巴结转移有关,由此可见,在膀胱癌患者癌组织内,上述MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3的表达处于异常,与疾病的发生、发展具有紧密联系。分析原因认为,MYBL2属于高度保守的癌基因编码转录因子,与细胞周期、细胞增殖分化等多种病理过程密切相关[7]。MYBL2的高表达会抑制因子DKK1调节Wnt/β-catenin信号通路,从而影响膀胱癌细胞的增殖和转移。AGR2是一种分泌或定位在内质网中的蛋白,与外胚层、早期阶段前后位的分化等具有紧密联系[8]。AGR2的高表达会抑制p53磷酸化及其活性,使其失去调节细胞周期能力,进而导致细胞发生癌变。PAX8是转录因子配对盒基因家族内的一员,可参与细胞增殖、免疫反应等病理生理过程[9]。PAX8的高表达会减弱血管内皮细胞与癌细胞间的粘附作用,进而促进癌细胞转移。NR4A3是抑癌基因,其表达在多种癌组织内降低,当其表达上升时,能够抑制癌细胞侵袭、转移[10]。本研究结果还显示,MYBL2、AGR2、PAX8表达越高,NR4A3表达越低,患者预后越差。

综上所述,MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3在膀胱癌组织内表达异常,且参与肿瘤的发生与发展,与患者预后存在紧密联系。