基于真实食品的兽药残留快检结果准确性验证及应用探索

刘海虹 刘耀慧 雷毅

作者简介：刘海虹（1988—），女，广东揭阳人，硕士，工程师。研究方向：食品安全与检测技术。

通信作者：雷毅（1977—），男，云南宜良人，博士，主任药师。研究方向：食品安全与质量分析。E-mail：Leiy04@qq.com。

摘 要：目的：验证多种兽药残留项目快检试剂产品的准确性，评估快检在抽检中的实际筛查效果。方法：采用真实样品为验证基质，比对不同快检试剂产品的检测结果与实验室检验结果，以氯霉素为例探讨快检应用于食品抽检的可行性。结果：13种快检试剂产品的平均结果验证符合率为96.6%，实例表明产品H、O的抽检命中率分别为74.1%、100.0%。结论：科学合理地应用快检技术，可以在抽检中提高靶向命中率。

关键词：快速检测；真实食品；阳性；结果验证

Accuracy Verification and Application Exploration of Rapid Testing Results of Veterinary Drug Residues Based on Real Food

LIU Haihong， LIU Yaohui， LEI Yi*

（Guangdong Institute of Food Inspection， Guangzhou 510435， China）

Abstract： Objective： Verify the accuracy of a variety of veterinary drug residue items rapid test results and evaluate the rapid screening effect in sampling inspection. Method： Real samples were drawn， and the test results of different fast detection products were compared with the laboratory test results. Taking chloramphenicol as an example to discuss the feasibility of using rapid detection in food sampling. Result： The average verification coincidence rate of 13 kinds of rapid detection reagent products was 96.6%. The examples showed that the sampling hit rates of products H and O were 74.1% and 100.0%， respectively. Conclusion： Scientific and reasonable use of fast detection technology can improve the target hit rate in quantitative sampling.

Keywords： rapid detection; real food; positive; result verification

快检技术作为一种检测手段，被广泛应用于食品安全监管[1-3]。随着我国食品快检制度体系的不断完善，快检操作逐渐规范化[4-5]。巨大的市场需求推动了快检技术的发展[6-8]。国家市场监督管理总局文件《关于规范食品快速检测使用的意见》中规定，市场监管总局对声称采用市场监管总局公布食品快检方法的快检产品，组织开展符合性评价，并鼓励市场监管部门采购通过符合性评价或获得认证的食品快检产品[4]。目前，快检产品的评价验证备受关注，评价指标包括灵敏度、交叉反应率、假阴性率和假阳性率等，经过评价的快检产品性能得到保障，能有效避免快检结果假阴性情况的发生[9-13]。

快检产品符合性評价采用的盲样基质为典型样品基质，通常采用空白样品加标的方式制备盲

样[14-17]。真实样品通常含有多种干扰成分，且目标物的含量范围较宽，基质效应也各有差别，因此采用真实样品进行验证时，快检结果出现假阳性的情况较多。抽查发现快检结果呈阳性的食用农产品样品，处理方式多是直接销毁，送实验室检验的情况较少，关于快检结果的准确性验证报道较少[18-19]。

本研究基于农贸市场抽取的风险监测真实样品，包括鱼类、虾类、贝类、禽肉、畜肉及鲜蛋等，采用实验室参比方法与快检试剂产品进行比对，对快检结果准确性进行验证分析。由于阴性和阳性样品数量及比例无法预先设定，不以假阳性率和假阴性率作为指标，以验证符合率进行结果论证。以氯霉素为例，开展抽检应用研究，通过验证快检试剂产品符合率及分析产品本身存在的问题，探讨快检技术应用于食品抽检的可行性。

1 材料与方法

1.1 仪器

Xevo TQ-S micro超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪（美国Waters公司）；多通道涡旋振荡器（上海ANPEL科技股份有限公司）；ROUTINE高速冷冻离心机（美国Thermo Fisher Scientific公司）。

1.2 验证项目及对象

本研究共验证13个快检产品，涉及氯霉素、孔雀石绿、呋喃唑酮代谢物、恩诺沙星及氟苯尼考5种兽药残留项目，不同快检结果的验证信息见表1。

本研究选择氯霉素项目的2个快检产品，包括胶体金免疫层析法、时间分辨荧光免疫层析定量法[20-22]两种快检技术，开展抽检应用研究，检测对象包括贝类养殖水及组织，快检产品信息见表2。

1.3 验证方式

快检结果验证的判定标准为当快检结果呈阳性，其对应项目的实验室验证结果大于或等于快检检出限（最低检出水平）的最大负偏离（一般情况不超过20%，对于痕量物质检测时可达30%）时，则判定为验证通过，结果符合；当快检结果呈阴性时，实验室验证结果小于快检检出限水平，则判定为验证通过，反之為不通过。

2 结果与分析

2.1 验证结果

采用快检检测及实验室参比方法对2020—2022年抽取的农贸市场食用农产品分别进行检测，验证结果见表3。共验证1 367项次，验证符合1 320项次，不符合的情况以假阳性结果为主，其中假阳性40项次，假阴性7项次，平均验证符合率为96.6%。

2.2 验证结果分析

对验证结果不一致的样本进行分析，结果见表3、表4。21项次氯霉素假阳性结果中，有15项次的检出值低于参比方法检出限，说明快检产品的实际检出限普遍低于标示值；另有6项次检出高浓度的氟苯尼考、甲砜霉素，说明该快检产品存在对结构相似物的交叉反应。本研究组采用的产品A1～A4的标示检出限均为0.1 μg·kg-1，经验证，鱼肉基质加标检出限为0.02～0.06 μg·kg-1，普遍比标示值低。

氯霉素快检产品A1出现4项次假阳性结果，其中3项次的检出值接近0.1 μg·kg-1，表明快检试剂盒产品实际检出限低于0.1 μg·kg-1，1项次贝类检出高含量的氯霉素同类型物质氟苯尼考和甲砜霉素。氯霉素快检产品A1出现5项次假阴性结果，其中1批次贝类中的氯霉素含量为0.1 ?g·kg-1，其他4批次为虾和鱼，检出值均大于0.17 ?g·kg-1，最大为皖鱼

1.92 ?g·kg-1，表明该快检产品质量不稳定。

孔雀石绿快检产品B3出现3项次假阳性结果，实验开展过程中该产品的快速检测卡的T线显色随时间变化较快，影响最终判读结果。

呋喃唑酮代谢物快检产品C1出现1项次假阳性结果，样品为虾，经参比方法确认样品中含量为

0.30 ?g·kg-1，低于法检方法检出限0.5 ?g·kg-1。

恩诺沙星试剂盒D1、D2的标示检出限为

100 μg·kg-1。恩诺沙星快检产品D1出现9项次假阳性结果，样品为鱼类和贝类，8项次恩诺沙星的检出数值远低于试剂盒标示检出限，样品中可能含有其他喹诺酮类抗生素；快检产品D2出现3项次假阳性结果，样品均为鱼类，3项次参比方法检出数值分别为75.9 ?g·kg-1、68.7 ?g·kg-1、55.2 ?g·kg-1；快检产品D2出现2批次的假阴性结果，样品为黄骨鱼，可能是基质杂质干扰，CT线均未显色，导致快检结果无效。

氟苯尼考快检产品E1出现1项次假阳性结果，样品为初生蛋，参比方法检出数值远低于0.1 ?g·kg-1。

2.3 应用实例

氯霉素快检产品A1、A2、A3和A4均为胶体金免疫层析法，其阳性验证符合率分别为69.2%（9/13）、44.4%（4/9）、30.0%（3/10）和37.5%（3/8），应用于食品安全抽检时，假阳性比例较高。为提高抽检命中率，本研究组采取对养殖水快筛及组织荧光定量手段开展实例应用。

本研究组在农贸市场现场筛查贝类养殖水，对快检阳性结果且样品量满足抽检需求的，抽检养殖水及其组织，分别进行实验室检验，测定其氯霉素含量，具体样品包括花甲、白贝、蛏子、沙甲及蚬等，共计27批次，对应的养殖水及其组织的氯霉素含量见图1。

27批次氯霉素快检阳性的养殖水中，检出氯霉素含量均在0.10 μg·L-1以上，产品H对养殖水氯霉素的阳性验证符合率为100%；对应组织的氯霉素含量参比方法确证结果在0.10 μg·kg-1及以上的共20批次，产品H对组织氯霉素的抽检命中率为74.1%（20/27）。

氯霉素作为一种广谱性抗生素，使用广泛，多种日常外用药均含有氯霉素。当养殖水中氯霉素含量水平较低时（0.1～0.5 μg·kg-1），对组织中氯霉素的筛查命中率较低，仅为50%。本研究组在农贸市场采用时间分辨荧光免疫层析定量法的产品O对

17批样品组织进行检测，对应的快检结果及实验室检验结果见表5。快检定量结果（＞0.1 μg·kg-1）的样

品，实验室确认结果均检出氯霉素，从表5可知，产品O对组织氯霉素的抽检命中率为100%。

3 结论与讨论

本研究针对风险较高的5种兽药残留项目，采用真实样品验证13种快检试剂产品的结果准确性，平均验证符合率约96.6%，反映了快检试剂产品在实际应用中的效果。

快筛技术应用在实际抽检时，涉及多个环节，需充分考虑检验项目与品种的针对性、快检试剂盒实际检出限及其对结构相似物的交叉反应率、检测方法定量限及不确定度判定、现场条件所限导致的样品间交叉污染风险、样品来源复杂导致的个体或批次差异等因素的影响。

养殖水氯霉素的快检阳性结果验证符合率为100%，且快检筛查速度远比组织氯霉素的快检筛查速度要快，且操作简单，无须稀释，用于现场快筛，能极大提高抽检效率。养殖水中氯霉素的来源有多种可能性，存在较大交叉污染的风险。应用于抽检时，采用荧光定量法试剂盒对养殖水阳性的组织进行定量，可以有效避免低浓度的假阳性结果，筛查命中率可以大幅提高。

本研究通过开展多种快检试剂产品的结果验证，针对风险较高的氯霉素项目进行抽检应用，证明合理、科学地应用快检技术，在食品安全抽检中能提高靶向性、命中率，真正发挥快检技术为食品安全监管保驾护航的作用。

参考文献

[1]岳清洪，黄瑛，黄璐瑶，等.食品安全快速检测技术基层监管中存在的问题及对策[J].食品安全质量检测学报，2019，10（18）：6356-6361.

[2]栾振祥.食品快检技术与实验室检验技术在食品质量安全抽检中的应用探讨[J].现代食品，2018（20）：31-32.

[3]蔡若纯，刘海虹，邓皇翼，等.基于快检初筛的食用农产品质量安全抽检模式分析[J].食品安全質量检测学报，2020，11（16）：5385-5390.

[4]市场监督管理总局.市场监管总局关于规范食品快速检测使用的意见[EB/OL].（2023-01-18）[2023-09-20].https：//gkml.samr.gov.cn/nsjg/spcjs/202301/t20230129_353024.html.

[5]国家市场监督管理总局.食品快速检测方法数据库[EB/OL].（2017-09-20）[2023-09-20].http：//www.samr.gov.cn/spcjs/ksjcff/.

[6]林伟琦.食品安全快速检测技术的应用研究进展[J].食品安全质量检测学报，2020，11（3）：961-967.

[7]李向梅，刘志威，陈晓敏，等.食品安全免疫层析检测技术研究进展[J].食品安全质量检测学报，2020，11（15）：4939-4955.

[8]龚频，王思远，陈雪峰，等.胶体金免疫层析试纸条技术及其在食品安全检测中的应用研究进展[J].食品工业科技，2019，40（13）：358-364.

[9]谢刚，叶金，王松雪.食品安全快速检测方法评价技术研究进展[J].食品科学，2016，37（17）：270-274.

[10]刘欢，吴立冬，李晋成，等.农产品质量安全快速检测产品管理评价研究[J].农产品质量与安全，2016（4）：

41-46.

[11]赵博，张庆合，李红梅.快速筛选技术的评价验证[J].食品安全质量检测学报，2014，5（12）：4121-4127.

[12]宁霄，贺鑫鑫，金绍明，等.食品快速检测方法的评价及其贝叶斯推断[J].食品安全质量检测学报，2021，12（3）：1015-1020.

[13]ALEXANDER R，JENS A，IDESBALD B，

et al.Overview of validated alternative methods for the detection of foodborne bacterial pathogens[J].Trends in Food Science & Technology，2017，62：113-118.

[14]李涛，孙宁宁，刘海静，等.水产品中氯霉素快速检测产品的验证性评价及分析[J].食品安全质量检测学报，2018，9（11）：2596-2601.

[15]叶秋雄，梁俊发，张彬彬，等.胶体金免疫层析产品快速检测农药残留的评价与分析[J].食品工业科技，2021，42（4）：187-193.

[16]喻俊磊，陈沙，李雨露，等.动物源性食品中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇快速检测产品的稳健性评价[J].江西农业学报，2019，31（11）：105-110.

[17]刘婷，曹进，王钢力，等.市售食品快速检测产品的应用评价与分析[J].食品安全质量检测学报，2017，8（7）：2439-2447.

[18]刘海虹，申超群，蔡若纯，等.食品快速检测产品跟踪评价新模式探索[J].食品安全质量检测学报，2019，10（13）：4138-4144.

[19]何丽媛，倪树标，张冠文，等.食品安全快速检测方法与参比方法一致性的评价方法探讨[J].食品安全质量检测学报，2020，11（23）：8857-8861.

[20]崔乃元，赵义良，马义才，等.水产品中氯霉素时间分辨荧光免疫层析定量检测方法[J].食品与发酵工业，2019，45（24）：241-245.

[21]赵维章，崔乃元，张汉青，等.时间分辨荧光免疫层析定量检测牦牛肉中喹诺酮类药物[J].食品工业科技，2020，41（18）：239-243.

[22]HU L M，LUO K，XIA J，et al.Advantages of time-resolved fluorescent nanobeads compared with fluorescent submicrospheres，quantum dots，and colloidal gold as label in lateral flow assays for detection of ractopamine[J].Biosensors and Bioelectronics，2017（91）：95-103.