云南省红河州冠心病患者CYP2C19基因多态性分布研究*

王梦蝶,杨发建,2a△,沈 磊,马 韬,侯梦凌,王雄飞

(1.大理大学药学院,云南 大理 671000;2.云南省滇南中心医院/红河州第一人民医院 a.药学部临床药学室 b.心血管疾病医学中心,云南 蒙自 661100)

冠状动脉疾病(coronary artery disease,CAD)和急性冠状动脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)[1]是全球重大的公共卫生负担,导致发病率和死亡率很高。双联抗血小板治疗(dual antiplatelet therapy,DAPT)[2,3]已被证明可以减少复发性缺血事件。DAPT治疗中,规范使用其中之一的药物氯吡格雷仍有4%～30%的可能出现支架内血栓、再发心梗,甚至心源性死亡的事件,这可能与氯吡格雷的代谢酶CYP2C19有关。如慢代谢型CYP2C19(*2、*3)使氯吡格雷活性代谢物生成减少,代谢减慢,血小板活性抑制作用减弱。在我国,CYP2C19基因多态性存在地域和民族差异[4]。目前,全国很多地区对CYP2C19基因型的地区和民族差异进行了研究[5],但未见对红河州地区的报道。因此,本文旨在探索云南省滇南中心医院冠心病患者CYP2C19基因多态性分布特点,以了解该基因在红河州地区的分布情况,并比较该基因多态性的地区和民族差异,为本地区冠心病患者抗血小板治疗提供理论依据,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源

选取2022年1月-2022年12月就诊于云南省滇南中心医院(红河州第一人民医院)心内科冠心病患者462例,其中男327例,女135例;年龄26～82岁,平均年龄(62.79±11.30)岁。纳入标准:(1)年龄18～90岁。(2)红河州哈尼族、彝族、汉族常住居民。(3)经冠脉造影证实至少 1 支主要冠脉分支的管腔狭窄≥50%或支架植入≥ 1 枚。(4)正在接受阿司匹林联合氯吡格雷或其中一种抗血小板药治疗。排除标准:(1)不能排除主动脉夹层或其他高出血风险者。(2)近1月内有活动性内脏出血、外科大手术史、创伤史。(3)近6月内罹患脑卒中。(4)合并恶性肿瘤、血液病。本研究经本院医院伦理委员会批准,伦理编号HY2023LLSC-79。

1.2 仪器与试剂

Fascan48E多通道荧光定量分析仪、Mini-8K低速离心机、XW-80A旋涡混合器、MK-10干式恒温器、SNP-U3测序反应通用试剂盒、移液枪10μL、冰箱(-20℃)、生物安全柜。

1.3 检测方法

抽取2mL外周静脉血,置于乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetie acid,EDTA)抗凝管,无凝血或溶血,检测血液样本的单个核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(CYP2C19*2 c.681G>A、CYP2C19*3 c.636G>A和CYP2C19*17 c.-806C>T)碱基类型,统计分析等位基因突变率、基因型、代谢表型。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 Hardy-Weinberg平衡定律检验结果

表1 CYP2C19基因型Hardy-Weinberg平衡检验

2.2 冠心病患者不同代谢表型的临床资料比较

纳入本研究的462例冠心病患者的性别、年龄、合并疾病、吸烟史、饮酒史等临床资料在快代谢型(rapid metabolizer,RM)、正常代谢型(normal metabolizer,NM)、中间代谢型(intermediate metabolizer,IM)、慢代谢型(poor metabolizer,PM)之间进行比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。

表2 冠心病患者不同代谢表型的临床资料比较[n(%)]

2.3 冠心病患者CYP2C19等位基因分布情况

本研究发现冠心病患者CYP2C19等位基因*1、*2、*3、*17的分布频率分别为63.31%、30.63%、5.19%,0.87%,见表3。

表3 冠心病患者CYP2C19等位基因分布(%)

2.4 冠心病患者CYP2C19基因型分布

本研究发现,本院冠心病人群CYP2C19基因型主要有8种,野生纯合型:*1/*1(40.91%);携带一个功能增强的突变杂合基因型为:*1/*17(1.30%);携带一个功能减弱的突变杂合基因型为:*1/*2(37.01%)、*1/*3(6.49%);携带一个功能减弱和功能增强的突变杂合基因型为:*2/*17(0.43%);携带两个功能减弱的基因型为:2/*2(10.17%)、*3/*3(0.22%)、*2/*3(3.46%),见表4。

表4 冠心病患者CYP2C19基因型分布[n(%)]

2.5 冠心病患者CYP2C19代谢型分布

本研究发现,本院冠心病患者中主要以IM为主,占43.94%;NM为40.91%、PM为13.85%、RM为1.30%占比最少,见表5。

表5 冠心病患者CYP2C19代谢型分布[n(%)]

2.6 本院不同民族冠心病患者CYP2C19等位基因及代谢表型分布

本研究共纳入红河州哈尼族45例、彝族75例、汉族342例冠心病患者,并行CYP2C19基因检测统计分析,CYP2C19等位基因及代谢表型无显著性差异(P>0.05),见表6。

表6 本院不同民族冠心病患者CYP2C19等位基因及代谢表型分布频率比较[n(%)]

2.7 红河州与其他民族、地区CYP2C19等位基因、代谢表型分布频率比较

红河州地区冠心病患者CYP2C19等位基因及代谢表型分布频率同维吾尔族、新疆地区藏族P<0.05相比较存在明显差异(P<0.05);同回族、蒙古族、云南汉族、广州汉族、北京丰台区、河南、攀西地区相比较[6-15]差异无统计学意义(P>0.05),见表7。

表7 红河州与其他民族、地区CYP2C19等位基因、代谢表型分布频率比较(%)

3 讨论

本研究采用实时荧光定量PCR对红河州462例冠心病患者(哈尼族45例、彝族75例、汉族342例)行CYP2C19(*2、*3、*17)基因检测分析,经Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验(P>0.05),本研究对象具本有地区代表性。通过研究发现,患者代谢表型与性别、年龄、病史、吸烟饮酒史无相关性。462例研究对象等位基因*1、*2、*3、*17的占比分别为63.31%、30.63%、5.19%,0.87%,无功能等位基因分布频率大于30%;基因型以*1/*1(40.91%)、*1/*2(37.01%)、*2/*2(10.17%)为主;经统计分析,红河州地区哈尼族、彝族、汉族冠心病患者CYP2C19等位基因及代谢表型无显著性差异(P>0.05),但存在哈尼族、彝族样本量较小等局限,需要扩大样本量进一步研究得到更准确的结论;红河州地区冠心病患者CYP2C19等位基因及代谢表型分布频率同维吾尔族、藏族及新疆地区相比较存在明显差异(P<0.05),维吾尔族正常功能等位基因*1(80.16%)、藏族正常功能等位基因*1(69.43%)、新疆地区功能增加等位基因*17(4.31%)占比较大;同回族、蒙古族、云南汉族、广州汉族、北京丰台区、河南、攀西地区研究结果一致。

CYP2C19的基因多态性与氯吡格雷的药效有较强的相关性[16]。氯吡格雷为前药,在肝脏经细胞色素 P450 酶CYP2C19转化成硫醇衍生物,不可逆的与血小板膜表面的ADP受体P2Y12结合,使纤维蛋白原与糖蛋白受体 GP II b/III a 无法结合,从而抑制血小板聚集[17]。然而,CYP2C19基因多态性存在很大的民族和地理位置差异,据现有文献报道,国内以汉族人群作为研究对象,对CYP2C19 基因多态性与氯吡格雷的疗效差异的研究较丰富,而对少数民族人群的研究相对较少。我国多个民族的风俗文化、生活习惯、疾病认知不同,疾病影响因素、疾病发生发展及预后不同[18]。了解不同地区和民族抗血小板药基因组学特征,检测相关基因预测药物疗效,选择合适的药物和剂量个体化施治是精准医学的必然趋势。

综上所述,鉴于红河州冠心病人群 CYP2C19基因多态性分布特点,CYP2C19中间代谢型(43.94%)和慢代谢型(13.85%)患者已超过半数,结合国内外最新研究报道和相关指南推荐,建议临床考虑使用氯吡格雷药物前行CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2C19*17基因检测,依据CYP2C19基因型和患者病理生理情况,以优化抗血小板治疗方案,实现个体化治疗,让冠心病患者获得最大治疗效益。